1、核酸的释放DNA和RNA均位于细胞内(病毒除外),因此核酸分离与纯化的第一步即是裂解细胞、释放核酸。16
16 1、核酸的释放 DNA和RNA均位于细胞内(病毒除外),因此 核酸分离与纯化的第一步即是裂解细胞、 释放核酸
各种组织细胞破碎方法应用细胞破碎方法1匀浆法机体软组织I机械法2捣碎法动物韧性组织3研磨法细菌、酵母1超声法细胞混悬液ⅡI物理法2反复冻融法培养细胞3冷热交替法细菌、病毒4低渗裂解红细胞1有机溶剂细菌、酵母川Ⅲ化学法2去垢剂组织、培养细胞3酶解法细菌、酵母
2024/5/25 17 各种组织细胞破碎方法 细胞破碎方法 应用 Ⅰ机械法 1匀浆法 机体软组织 2捣碎法 动物韧性组织 3研磨法 细菌、酵母 Ⅱ物理法 1超声法 细胞混悬液 2反复冻融法 培养细胞 3冷热交替法 细菌、病毒 4低渗裂解 红细胞 Ⅲ化学法 1有机溶剂 细菌、酵母 2去垢剂 组织、培养细胞 3酶解法 细菌、酵母
高速捣碎法高速组织捣碎机高速捣碎法:将组织加盐水(约1 /3~1 /2)装入捣碎机桶内。用10000r/min间断离心,每次30~60S,防止离心时间过长产生的热破坏抗原活性。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子
高速捣碎法:将组织加盐 水(约1/3~1/2)装入捣 碎机桶内。用10 000 r/ min间断离心,每次30~60 s,防止离心时间过长产生 的热破坏抗原活性。此法 适用于动物内脏组织、植 物肉质种子。 高速捣碎法 高速组织捣碎机
玻璃匀浆器玻璃匀浆器研磨法用玻璃匀浆器。主要经过旋转、挤压等方式将组织粉碎。用此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机高,对大分子的破坏也少。该法可用于粉碎少量软嫩材料(脑、胰、肝等)时常用的方法。19
19 玻璃匀浆器 研磨法用玻璃匀浆器。主 要经过旋转、挤压等方式 将组织粉碎。用此法细胞 破碎程度比高速组织捣碎 机高,对大分子的破坏也 少。该法可用于粉碎少量 软嫩材料(脑、胰、肝等) 时常用的方法。 玻璃匀浆器
2、核酸的分离提取应该清除的杂质主要包括三部分:A.非核酸的大分子污染物:蛋白质、多糖及脂类物质等B.非需要的核酸分子:分离某一特定的核酸分子时,其他的核酸分子皆为杂质;C.加入的有机溶剂和某些金属离子。20
20 2、核酸的分离提取 应该清除的杂质主要包括三部分: A.非核酸的大分子污染物:蛋白质、多糖及 脂类物质等; B.非需要的核酸分子:分离某一特定的核酸 分子时,其他的核酸分子皆为杂质; C.加入的有机溶剂和某些金属离子