DNA酶的抑制剂1.金属离子螯合剂DNA酶需要二价金属离子Mg2+等的激活，金属离子螯合剂可使DNA酶失活（如乙二胺四乙酸二钠枸橡酸盐）。EDTA、2.阴离子表面活性剂十二烷基磺酸钠SDS能抑制核酸酶活性，同时还能使蛋白质变性，并与之结合形成沉淀
11 DNA酶的抑制剂 1.金属离子螯合剂 DNA酶需要二价金属离子Mg2+等的激活，金属 离子螯合剂可使DNA酶失活（如乙二胺四乙酸二钠 EDTA、枸橼酸盐）。 2.阴离子表面活性剂 十二烷基磺酸钠SDS能抑制核酸酶活性，同时还 能使蛋白质变性，并与之结合形成沉淀
关于RNA酶RNA易被RNA酶水解，RNA酶除胞内还广泛存在于人的皮肤、睡液、汗液及周围的环境中。RNA酶分子结构中的二硫键使其生物学活性非常稳定，去除变性剂后，RNA酶的活性又可恢复。RNA酶不需要二价阳离子激活。RNA酶耐高温、耐酸、耐碱、不易失活。RNA分离提取的关键是避免细胞内外RNA酶的污染，创造一个无RNA酶的环境
关于RNA酶 Ø RNA易被RNA酶水解，RNA酶除胞内还广泛存在于人的皮肤、唾液、汗液及 周围的环境中。 Ø RNA酶分子结构中的二硫键使其生物学活性非常稳定，去除变性剂后，RNA 酶的活性又可恢复。 Ø RNA酶不需要二价阳离子激活。 Ø RNA酶耐高温、耐酸、耐碱、不易失活。 RNA分离提取的关键是避免细胞内外RNA酶 的污染，创造一个无RNA酶的环境
RNA酶抑制剂联合使用RNA酶的特异抑制剂(如RNasin与DEPC等）能极大地防止内源性RNase对RNA的降解。1、DEPC(焦碳酸二乙酯)高度活化的烷基化试剂，破坏RNA酶活性。用来灭活缓冲液或器皿中的RNA酶。0IIC-CH,-CH高温*CO,+H,OC-CH,-CH3IIQ13
13 RNA酶抑制剂 联合使用RNA酶的特异抑制剂(如RNasin与DEPC等） 能极大地防止内源性RNase对RNA的降解。 1、DEPC(焦碳酸二乙酯) 高度活化的烷基化试剂，破坏RNA酶活性。用来灭 活缓冲液或器皿中的RNA酶。 O C-CH2 -CH3 O C-CH2 -CH3 O = = CO2+H2O 高温
2、RNA酶的蛋白抑制剂①许多RNA酶可以与该类蛋白质结合形成非共价复合物从而使RNA酶失活。の 商品化的RNA酶蛋白抑制剂的名称各异(如RNAsin)。14
14 2、RNA酶的蛋白抑制剂 Ø 许多RNA酶可以与该类蛋白质结合形成非共价复合物 从而使RNA酶失活。 Ø 商品化的RNA酶蛋白抑制剂的名称各异(如RNAsin )
核酸分离纯化技米路线①材料的选择与预处理①核酸的释放①核酸的分离与纯化①核酸的浓缩、沉淀与洗涤15
15 Ø材料的选择与预处理 Ø核酸的释放 Ø核酸的分离与纯化 Ø核酸的浓缩、沉淀与洗涤 核酸分离纯化技术路线