3 Thymine Adenine 111A H ←一2.9A→ H -3.0A Cytosine Guanine N-H H 一29A→ 108A 5
三、DNA的一级结构及序列测定 l.双脱氧末端终止法一Sanger法 采用核苷酸链终止剂，2'，3'一双脱氧三磷 酸可终止DNA的延长。由于它缺少形成3'，5 磷酸二酯键所需要的3'-OH,一旦参入到DNA链 中，此DNA链就不能进一步延长
三、DNA 的一级结构及序列测定 1. 双脱氧末端终止法 — Sanger 法 采用核苷酸链终止剂，2′，3′－双脱氧三磷 酸可终止DNA的延长。由于它缺少形成3′，5′－ 磷酸二酯键所需要的3′-OH，一旦参入到DNA链 中，此DNA链就不能进一步延长
-P- -CH2 Base H H H H H H ddNTP
在模板链、引物及DNA聚合酶存 在下，将ddTTP加到4种正常的dNTP混 合物中。 根据碱基配对原则，每当DNA聚 合酶需要dTMP参与到正常延长的DNA链 中时，就有两种可能性：
在模板链、引物及DNA聚合酶存 在下，将ddTTP加到4种正常的dNTP混 合物中。 根据碱基配对原则，每当DNA聚 合酶需要dTMP参与到正常延长的DNA链 中时，就有两种可能性：
是参入ddTTP,结果导致脱氧核苷 酸链延长的终止； 二是参入dTTP,DNA链仍可延长，直 到参入下一个ddTTP 根据这一方法，就可得到一组以 ddTTP结尾的长短不一的DNA片段
一是参入ddTTP，结果导致脱氧核苷 酸链延长的终止； 二是参入dTTP，DNA链仍可延长，直 到参入下一个ddTTP。 根据这一方法，就可得到一组以 ddTTP结尾的长短不一的DNA片段