抗竞争法酶标抗体工作浓度的确定 ①将酶标抗体用稀释液做系列稀释， 加入包被有伤寒抗原的酶标板中 (50μl/孔)，37℃30min。 ②洗涤液充分洗涤3次，甩干。 ③各孔内加底物液0.1ml,置暗处20 min。 ④各孔内加入终止液终止反应。 ⑤用酶标仪检测OD值。 以OD值在0.8左右的最小稀释倍 数为待检样本的最佳稀释倍数
①将酶标抗体用稀释液做系列稀释， 加入包被有伤寒抗原的酶标板中 （50μl/孔），37℃ 30min。 ②洗涤液充分洗涤3次，甩干。 ③各孔内加底物液0.1ml，置暗处20 min。 ④各孔内加入终止液终止反应。 ⑤用酶标仪检测OD值。 以OD值在0.８左右的最小稀释倍 数为待检样本的最佳稀释倍数。 ❖ 抗竞争法酶标抗体工作浓度的确定
标准曲线的制备 ①从5倍开始用酶标稀释液进行系列倍比 稀释（连续稀释10个管)，与确定工作 浓度的酶标抗体一同加入包被有伤寒抗 原的酶标板中，另在2孔中加入稀释液 作空白对照，置37℃恒温箱30min。 ②取出用洗涤液充分洗涤3次，甩干。 ③各孔内加底物液0.1ml,置暗处20min。 ④各孔内加入终止液终止反应。 ⑤用酶标仪检测OD值。 空白对照OD值在0.8左右实验成立 以标本0D值在0.8~0.05的稀释度（抗 体单位)作为标准品的工作范围，根据 对标准抗体血清所测得的OD值，在方 格纸上以OD值为x轴，抗体单位为Y轴 绘制标准曲线
①从5倍开始用酶标稀释液进行系列倍比 稀释（连续稀释10个管），与确定工作 浓度的酶标抗体一同加入包被有伤寒抗 原的酶标板中，另在2孔中加入稀释液 作空白对照，置37℃恒温箱30 min。 ②取出用洗涤液充分洗涤3次，甩干。 ③各孔内加底物液0.1ml，置暗处20min。 ④各孔内加入终止液终止反应。 ⑤用酶标仪检测OD值。 空白对照OD值在0.8左右实验成立， 以标本OD值在0.8～0.05的稀释度（抗 体单位）作为标准品的工作范围，根据 对标准抗体血清所测得的OD值，在方 格纸上以OD值为x轴，抗体单位为Y轴 绘制标准曲线。 ❖ 标准曲线的制备
标本检测 按预试验摸索的实验涤件进行测定： ①将标准血清进行系列倍比稀释（连 续稀释10个管)。 ②将待检血清用酶标稀释液适当稀释。 ③稀释液作空白对照。 ④将稀释的酶标抗体（50μ/孔)，同 待检标本、不同单位的标准血清和 空白对照标本一同加入包被有伤寒 抗原的酶标板中(50μ/孔)。 ⑤置37℃恒温箱30min. ⑥加底物，终止反应后检测OD值
按预试验摸索的实验条件进行测定： ①将标准血清进行系列倍比稀释（连 续稀释10个管）。 ②将待检血清用酶标稀释液适当稀释。 ③稀释液作空白对照。 ④将稀释的酶标抗体（50μl/孔），同 待检标本、不同单位的标准血清和 空白对照标本一同加入包被有伤寒 抗原的酶标板中（50μl/孔）。 ⑤置37℃恒温箱30 min。 ⑥加底物，终止反应后检测OD值。 ❖ 标本检测
结果判定 阳性标本反应孔不显色，空白标本反应孔显 色说明实验成立。根据对标准抗体血清所测得的 OD值和其所对应的抗体单位标绘制准曲线或建 立的回归方程，根据绘制的准曲线求出每个标本 的抗体单位
阳性标本反应孔不显色，空白标本反应孔显 色说明实验成立。根据对标准抗体血清所测得的 OD值和其所对应的抗体单位标绘制准曲线或建 立的回归方程，根据绘制的准曲线求出每个标本 的抗体单位。 结果判定