第十三单元 (综合型实验)
第十三单元 （综合型实验）
实验一 酶联免疫吸附实验检测 伤寒O抗体方法的建立 (综合性实验)
实验一 酶联免疫吸附实验检测 伤寒O抗体方法的建立 （综合性实验）
实验原理 检测伤寒O抗体在伤寒菌感染的诊断中具有重要意 义，采用肥达反应可对抗体进行半定量检测；若采用 新一代的免疫检测技术建立对伤寒O抗体准确定量检测 的法，则可提高临床诊断效果。以伤寒0抗原免疫动物， 制备出抗伤寒O的抗体，将后者纯化抗体与酶连接制备 成酶标抗体；以伤寒0抗原包被酶标板，制备伤寒酶标 抗体为竞争抗体，以竞争法检测伤寒抗体酶联免疫检 技术
实验原理 检测伤寒O抗体在伤寒菌感染的诊断中具有重要意 义，采用肥达反应可对抗体进行半定量检测；若采用 新一代的免疫检测技术建立对伤寒O抗体准确定量检测 的法，则可提高临床诊断效果。以伤寒O抗原免疫动物， 制备出抗伤寒O的抗体，将后者纯化抗体与酶连接制备 成酶标抗体;以伤寒O抗原包被酶标板，制备伤寒酶标 抗体为竞争抗体，以竞争法检测伤寒抗体酶联免疫检 技术
实验材料 1.伤寒沙门菌菌体“0”抗原（免疫用) 2.伤寒沙门菌可溶性菌体“0”抗原（包备用) 3.饱和硫酸铵溶液 4. 酶标用洗涤液 5.酶标用稀释液 6.酶标用底物液 7.酶标用终止液(2mol/LH2S04) 8.伤寒“O”抗原包被酶标板 9.待检血清标本 10.实验室标准阳性血清 11.ELISA读数仪
1. 伤寒沙门菌菌体“O”抗原（免疫用） 2. 伤寒沙门菌可溶性菌体“O”抗原（包备用） 3. 饱和硫酸铵溶液 4. 酶标用洗涤液 5. 酶标用稀释液 6. 酶标用底物液 7. 酶标用终止液 (2mol/L H2SO4 ) 8. 伤寒“O”抗原包被酶标板 9. 待检血清标本 10.实验室标准阳性血清 11.ELISA读数仪 实验材料
实验流程 制备抗伤寒O抗体和O抗原 抗体纯化 酶(HRP)标记抗体 竞净ELISA检测伤寒O抗体条件的优化 标准曲线确定 标本检测与结果判断
制备抗伤寒O抗体和O抗原 抗体纯化 酶(HRP)标记抗体 竞争ELISA检测伤寒O抗体条件的优化 标准曲线确定 标本检测与结果判断 实验流程