國社 课程负责人刘海斌 空白管 标准挎 测定管 容白清(m1) 05 尿素氯标准应用液() 0.5 去蛋白血这液(m1) 0.5 乙酰一肟-孩氨溶液(m1) 0.5 0.5 0.5 混合鞍液m1) 3.0 3.0 3.0 充外摇匀后，沸水浴10mn。冒士流水中冷判至室识 以空白斧调零，在500m波K处比色，读取测定斧及标准管光密度0D值 对实验结果进行计算，并分析讨论 五、注意事顶 (一)沸水浴时间对显色程度影响很大，应该严格控制好水浴时间，以水浴 10min为宜。 (二)二乙酰一肟硫氨脲溶液不能久置，若有结晶析出应该重新配制。 (三)运动实践中利用这一指标评定机能恢复状况时，应分别在运动前、运 动后即刻及次日晨取血。若评定一个训练周期情况时，应在周期初始、中间及结 束时分别取晨血跟踪测试。 (四)血尿素含量超过40mg%时，应将样品稀释后重新测定。 六、作业与思考 (一)测定血尿素含量有什么实际意义？ (二)血尿素含量变化与身体机能有什么关系？ (三)如何通过测定血尿素氨浓度控制训练负荷？ 实验四血乳酸的测定 乳酸是体内糖无氧酵解的终产物。储存在肌肉中的糖原和葡萄糖，在无氧的 条件下分解成乳酸。乳酸经扩散进入血液，称为血乳酸。在正常情况下，乳酸的 生成与消除处于动态平衡中，正常人安静时血乳酸浓度保持在1~2mmol/L,运 动员血乳酸安静值与正常人无差异，但在比赛前情绪紧张时，运动员的血乳酸安 静值有可能出现升高至3mmol/L,这与体内的肾上腺分泌增多有关。 剧烈运动时，肌肉内糖的无氧分解加强，血乳酸浓度显著升高。运动时血乳 酸浓度的变化与所动用的能量系统有关。以磷酸原系统供能为主的运动，血乳酸 生成量较少，血乳酸一般不超过4mol/L:以糖酵解系统供能为主的运动，血乳
國社 课程负责人刘海斌 酸可达15mmol/L以上：而以有氧氧化系统供能为主的运动，血乳酸在4mmol/几 左右。 速度耐力性运动项目的高水平运动员，运动成绩好者，运动后血乳酸最大浓 度值也高：耐力性运动项目的运动员，在完成相同亚极量运动负荷时，优秀运动 员运动后血乳酸相对较低。根据这一特点可用以评定运动员训练水平或选材。可 根据运动后血乳酸的消除速率来评定运动员有氧代谢能力，若恢复速度快，表示 有氧代谢能力强。因此，血乳酸含量的测定，对于从事体有工作的人来说是很重 要的。 、实验目的 (一)学握血乳酸的测定方法。 (二)初步掌握血乳酸的运动生物化学评定方法及意义。 (三)学习用学式血乳酸分析仪测定血乳酸。 二、实验原理 去蛋白血滤液，加浓硫酸共热，可使乳酸氧化成乙醛，在酮离子存在时，乙 醛与对羟基联苯作用生成紫红色复合物，其显色程度与乳酸浓度成正比，故通过 比色可以测定其光密度值，从而计算出血液中乳酸的含量 三、实验器材 (一)1%氟化钠溶液：1g氟化钠溶液溶于100m1蒸馏水中。 (二)10%三氯乙酸溶液：10g三氯乙酸溶于100ml蒸馏水中。 (三)浓H2S04(分析纯、比重：1.838) (四)4%CuS04溶液：4gCuS04溶于100ml蒸馏水中。 (五)对羟基联苯试剂：将1.5g对羟基联苯溶于10ml的5a0溶液中， 待溶解后加水稀释至100m1,冷却后贮存于棕色瓶中。 (六)乳酸标准贮存液(1ml含1mg):称取乳酸锂106.6mg,溶于约10ml 水中，加H2S04(浓)2滴，移至100m1容量瓶，用水稀释至刻度，混匀。置于 冰箱保存。 (七)乳酸标准应用液(1ml含10g:取1ml乳酸标准贮存液，用100ml 容量瓶加蒸馏水稀释至刻度即成。此液临用时配制
國鞋 课程负责人刘海斌 (八)乳酸空白液：取1%氟化钠溶液和10%三氯乙酸溶液按1：3体积比混 合而成。 (九)台式离心机、恒温水浴箱、水浴锅、离心管、721分光光度计、试管、 移液管、滴管、吸血管、一次性采血针、消毒棉球、血乳酸分析仪。 四、实验步骤 (一)制备无蛋白血滤液：取2支离心管，按实验三表7-5操作。 表7-5无蛋白血滤液的制备 离心管 INa游液(ml) 0.48 新鲜手指直(l 0.02 立刻摇匀 10%-氯乙酸(n1) 15 充分混匀，离心5min(3000rain),将上清液倒入另-一离心管中 (二)取3支大试管，标明“空白管”、 “标准管”、“测定管”，按表 76操作。 表7-6血乳酸的测定 空白管 标准管 测定管 乳空白液(ml) 0.50 乳棱标准应用液() 0.50 无蛋白血滤液(m1) 0.50 4CuS0,溶液（滴） 浓价酸《l) 试脊放于冷水中，各加3m1,边加边摇匀 置沸水浴5min,冷水浴冷却至15c以下 对基联苯溶液（滴） 2 2 2 分摆匀。37C水保温15in,每循5in一次试管。然后魂水溶90s, 用冷水冷划至室温。以空白调零，在560波长处比色，读取测定斧及标准光密度00值 (三)用掌式血乳酸分析仪测定血乳酸 对实验结果进行计算，并分析讨论。 血乳酸(mg%)=0D测/0D标×100 血乳酸(mmol/L)=血乳酸(mg%)/9 五、注意事项 (一）浓硫酸对显色影响很大，必须选用纯净浓硫酸。加浓硫酸时，应把试 管放入冷水中，慢慢滴加，要边加边摇匀。浓硫酸有强的氧化性和腐蚀性，使用 时要小心
因数 课程负责人刘海烟 (二)严格控制水浴时保温温度和保温时间，以确保实验结果的准确性。 (三)滴加对羟基联苯时，试管应充分冷却，滴加时应滴加在液面上，并立 即摇匀，防止附者于管壁上 (四)血乳酸测定时取样时间非常重要，安静值应在早晨起床前安静时采样： 运动后血乳酸的测定应根据不同运动项目而定，一般运动强度较低的运动在运动 后20s左右取样，中等强度运动在运动后1~6min取样，大强度运动在运动后3~ 12min取样。在实际测试时，可多选几次采血时间（如1、3、5.分钟）间隔 采样。 六、作业与思考 (一)测定血乳酸时应如何控制采血样的时间？ (二)如何运用血乳酸指标监控运动强度？ (三)如何运用血乳酸指标评定运动员有氧代谢能力和无氧代谢能力？ 实验五尿肌酐的测定 人体90%肌酸存在于肌肉，而且大部分以磷酸肌酸的形式存在于肌肉中，磷 酸肌酸脱去磷酸后生成肌酐，肌酐随尿液排出即为尿肌酐。正常人尿肌酐日排出 量相当稳定，成年男子日排出量约1.01.8g,女性为0.7~1.0g,不受食物蛋 白质含量和尿量的影响。24h每千克体重排出的尿肌酐毫克数称为尿肌酐系数。 正常人尿肌肝系数为：男子1832mg/kg体重，10^25mg/kg体重。运动员尿肌 酐系数高于常人，一般为2540mg/kg体重。不同项目的运动员尿肌酐系数也不 同，力量和速度项目运动员，肌肉发达，其尿肌酐系数也高，且尿肌酐的日排出 量与运动成绩高度相关。 尿肌酐日排出与肌肉中磷酸肌酸和肌酸的含量有关。因此，测定尿肌酐含量 可以间接了解骨骼肌中磷酸肌酸的含量。运动员经过一个阶段训练后，尿肌酐系 数可能增加，这反映肌肉的磷酸肌酸浓度或肌肉发达程度提高。尿肌酐系数可作 为运动员力量索质与速度素质的评定、运动选材、训练效果的指标。 、实验目的 (一）学习尿肌酐的测定方法
國鞋 课程负责人刘海斌 (二)学握尿肌酐系数指标的计算及在运动实践中的作用。 二、实验原理（碱性苦味酸法） 尿中的肌酐在碱性溶液中与苦味酸作用，生成橙红色的苫味酸肌酐复合物， 其生成量与肌府含量成正比，通过比色可以测定尿中肌肝含量。 三、实验器材 (一)饱和苦味酸溶液：取苦味酸15g,置于大烧杯中，加蒸馏水1000ml, 温热助溶，冷后如有结晶析出，表示已达饱和，取上清液备用。 (二)10%的氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠100g,加蒸馏水溶解，冷却用蒸 馏水稀释至1000m1 (三)碱性苦味酸溶液：取饱和苦味酸溶液5份，加10%氢氧化钠1份，临 用前20min新鲜配制！ (四)肌酐标淮贮行液(1mg/1m):精确称取纯肌酐0.1g,置于100ml 容量瓶内，以10%盐酸溶解稀释至刻度。保春于冰箱中。 (五)肌酐标准应用液(0.1mg/ml)：精确吸取肌酐标准贮存液10ml,置 于100ml容量瓶中，加10%盐酸10ml,再加蒸馏水稀释至刻度。加甲苯或氯仿 数滴防腐。此液可存一周以上。 (六)试管、移液管、721分光光度计等。 四、实验步骤 (一)制备稀释尿液(1：100)：收集受试者24h尿液，混匀后取0.1ml 尿液置于大试管中，加9.9m1蒸馏水，摇匀。 (二)取3支大试管，标明“空白管”、“标淮管”、“测定管”，按表 7-7操作。 表7-7尿肌肝的定 空白 杯准格 测定管 肌所标准应用液(m) 0.5 稀释尿液(1：100)(m) 5 10%0溶液() 0.2 0.2 0.2 蒸馏水(m1) 5.0 4.5 碱性苦味酸试剂(a1) 充分摇匀后，放置10min,以空白斧调零，在520m波长处比色，读取测定斧及标准管光密度00值 对实验结果进行计算，并分析讨论