互补末端连接 AAT工 ATAT工 AT工 TA工 annealing AAT 工： TAAT工 会TAT 工 TTAA工
11 互补末端连接
EcoRI 2 閨 Dti2四ea1oin 2KXXX a的B四 Sticky end Recombinant DNA Restriction Enzyme Action of EcoRI
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产生相同序列的突出末端的不同片段 可有三种方式： ·1)用同一种限制酶切割； ·2)用识别相同靶序列的不同限制酶切割； ·3)用识别不同靶序列但可产生一致的粘 性末端的限制酶切割
13 产生相同序列的突出末端的不同片段 可有三种方式： ⚫ 1)用同一种限制酶切割； ⚫ 2)用识别相同靶序列的不同限制酶切割； ⚫ 3)用识别不同靶序列但可产生一致的粘 性末端的限制酶切割
3、特点： 根据上述限制酶的特点，在基因工程和基因诊断 中的重要用途： ·不论DNA的来源如何，同一种限制酶切割后产生 的粘性末端容易重新连接。因此可将不同种属的 DNA重组。如人和质粒DNA等。 ·用于人类基因组的DNA分析，具特定的酶切位点。 ·Gene突变改变酶切位点的消失或新产生将改变酶 切片段长度。应用于限制性片段多态性分析
14 3、特点： 根据上述限制酶的特点，在基因工程和基因诊断 中的重要用途： ⚫ 不论DNA的来源如何，同一种限制酶切割后产生 的粘性末端容易重新连接。因此可将不同种属的 DNA重组。如人和质粒DNA等。 ⚫ 用于人类基因组的DNA分析，具特定的酶切位点。 ⚫ Gene突变改变酶切位点的消失或新产生将改变酶 切片段长度。应用于限制性片段多态性分析
二、基因运载体及其选择 ●载体(Vector):将外源目的DNA导入受体细 胞，并能自我复制和增殖的工具。 CT1idG EcoRl
15 二、基因运载体及其选择 ⚫ 载体（Vector）:将外源目的DNA导入受体细 胞，并能自我复制和增殖的工具