导航 五、DNA片段的扩增及电泳鉴定 1原理。 (1)PCR利用了DNA的 原理，通过调节温度来控 制DNA双链的 。 PCR仪实质上就是一台能 够自动 的仪器。一次PCR一般要经历 次循环
导航 五、DNA片段的扩增及电泳鉴定 1.原理。 (1)PCR利用了DNA的 热变性 原理,通过调节温度来控 制DNA双链的 解聚与结合 。PCR仪实质上就是一台能 够自动 调控温度 的仪器。一次PCR一般要经历 30 次循环
导航 (2)DNA分子具有 ,在一定的pH下，这些基 团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分 子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。 (3)PCR的产物一般通过 来鉴定。在凝 胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的 和构象等有关。凝胶中的DNA分子通过 ,可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来
导航 (2)DNA分子具有 可解离的基团 ,在一定的pH下,这些基 团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这些带电分 子会向着与它所带电荷相反的电极移动,这个过程就是电泳。 (3)PCR的产物一般通过 琼脂糖凝胶电泳 来鉴定。在凝 胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的 浓度 、 DNA分子 的大小 和构象等有关。凝胶中的DNA分子通过 染色 ,可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来
2.方法步骤。 用 按照配方或PCR试剂盒的说 液 导航 明书，在 中依次加入各组分 离 盖严离心管的盖子， 将微量离心管放入离心 机里，离心约10s,使反应液集中在 反应 设置好PCR仪的 将装有反应液 的微量离心管放入 中进行反应 用 配制质量分数为0.8% 1.2%的 溶液，加热至琼脂糖熔化。 制 稍冷却后，加入适量的 染料混匀，迅 速倒入模具，并插入合适大小的梳子，以形 。 待凝胶溶液完全凝固，小心 拔出梳子，取出凝胶放人 内 将 加人电泳槽中 将扩增得到的 与 (内含指示剂)混合，再用微量移液 器将混合液缓慢注人凝胶的 内。留 个加样孔加人指示分子大小的 接通电源，设定电压， 般为1~5V1cm,待 指示剂前沿迁移接近 时，停止 电泳 取出凝胶置于 观察和照相
导航 2.方法步骤
导航 课堂·重难突破 目的基因的筛选与获取 重难归纳 1.目的基因的筛选是根据基因的有关信息，包括基因的核苷 酸序列、基因的位置、基因的表达产物等，借助测序技术、 序列对比工具以及序列数据库的辅助进行筛选
导航 一 目的基因的筛选与获取 重难归纳 1.目的基因的筛选是根据基因的有关信息,包括基因的核苷 酸序列、基因的位置、基因的表达产物等,借助测序技术、 序列对比工具以及序列数据库的辅助进行筛选。 课堂·重难突破
导航 2PCR反应过程。 过程说明 图解 温度超过 90℃，双链 变性 DNA解聚为单 35'5m3' 链
导航 2.PCR反应过程 。 过程 说明 图解 变性 温度超过 90 ℃,双链 DNA 解聚为单 链