导期 3.利用PCR获取和扩增目的基因。 ()原理：根据 的原理，在体外提供参与 DNA复制的 ,对目的基因的核 苷酸序列进行大量复制。 (2)组分和条件：缓冲溶液、 、2种 4种 耐高温的 酶，同时控制温 度
导航 3.利用PCR获取和扩增目的基因。 (1)原理:根据 DNA半保留复制 的原理,在体外提供参与 DNA复制的 各种组分与反应条件 ,对目的基因的核 苷酸序列进行大量复制。 (2)组分和条件:缓冲溶液、 DNA模板 、2种 引物 、 4种 脱氧核苷酸 、耐高温的 DNA聚合 酶,同时控制温 度
(3)过程。 ① :当温度超过90C时，双链DNA解聚为 2 :当温度下降到50℃左右时，两种 通过 碱基互补配对与两条单链DNA结合。 ③ :当温度上升到72℃左右时，溶液中的4种脱氧核 苷酸在耐高温的 的作用下，根据碱基互补配 对原则合成新的DNA链。 如此重复循环多次。 (4)特点：成 形式扩增
导航 (3)过程。 ① 变性 :当温度超过90 ℃时,双链DNA解聚为 单链 。 ② 复性 :当温度下降到50 ℃左右时,两种 引物 通过 碱基互补配对与两条单链DNA结合。 ③ 延伸 :当温度上升到72 ℃左右时,溶液中的4种脱氧核 苷酸在耐高温的 DNA聚合酶 的作用下,根据碱基互补配 对原则合成新的DNA链。 如此重复循环多次。 (4)特点:成 指数 形式扩增
导航 4.在获得转基因产品的过程中，还可以通过构建基因 来获取目的基因。 微点拨用PCR技术扩增DNA不需要解旋酶；PCR技术需要 的DNA聚合酶能耐高温，具有热稳定性
导航 4.在获得转基因产品的过程中,还可以通过构建基因 文库 来获取目的基因。 微点拨用PCR技术扩增DNA不需要解旋酶;PCR技术需要 的DNA聚合酶能耐高温,具有热稳定性
导航 二、基因表达载体的构建 1.构建基因表达载体的目的。 (1)让目的基因在受体细胞中 ,并且遗传给下 一代。 (2)使目的基因能够 和发挥作用
导航 二、基因表达载体的构建 1.构建基因表达载体的目的。 (1)让目的基因在受体细胞中 稳定存在 ,并且遗传给下 一代。 (2)使目的基因能够 表达 和发挥作用
2.基因表达载体的组成。 导航 是一段有特殊序列结构的DNA 片段，位于基因的 ，它 是 识别和结合的 部位，驱动基因转录出mRNA 目的基因 表达载体 ：位于基因的 ,使 在所需要的地方停下来 复制原点
导航 2.基因表达载体的组成