2.基因置换/基因替代( gene rep l acement) 将特定的目的基因导入特定的细胞,通过 同源重组或基因打靶技术,将正常基因定点整合 到靶细胞基因组内,以原位替换原有的缺陷基因。 不涉及基因组整体改变的情况下对缺陷基因进行精确 的原位修复,是最理想的治疗方式 12
12 2.基因置换/基因替代(gene replacement) 将特定的目的基因导入特定的细胞，通过 同源重组或基因打靶技术，将正常基因定点整合 到靶细胞基因组内,以原位替换原有的缺陷基因。 不涉及基因组整体改变的情况下对缺陷基因进行精确 的原位修复，是最理想的治疗方式
3.基因添加/基因增补( gene augmentation) 通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不 表达的基因。 )缺陷基因的补充 针对特定的缺陷基因导入其相应的正常基 因,但缺陷基因并未除去 2)全新基因导入 向靶细胞中导入靶细胞本来不表达的基因
13 3. 基因添加/基因增补(gene augmentation) 通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不 表达的基因。 1) 缺陷基因的补充 针对特定的缺陷基因导入其相应的正常基 因，但缺陷基因并未除去 2) 全新基因导入 向靶细胞中导入靶细胞本来不表达的基因
4.基因失活/基因抑制( gene inactivation) /基因干预( gene interference) 采用特定的方式抑制某个基因的表达,或 者通过破坏某个基因而使之不能表达,以达到 治疗疾病的目的。 靶基因往往是过度表达的癌基因或病毒的基因 14
14 4. 基因失活/基因抑制（gene inactivation) /基因干预(gene interference) 采用特定的方式抑制某个基因的表达，或 者通过破坏某个基因而使之不能表达，以达到 治疗疾病的目的。 靶基因往往是过度表达的癌基因或病毒的基因
/·反义核酸技术 1)反义RNA 与相应的mRNA形成双链,阻止mRNA的翻译 2)脱氧寡核苷酸( oligodeoxyribonucleotide,oDN) TFO( triplex-forming oligo):与DNA双链的特定部位结合形成三聚体), 阻止转录因子的结合,使转录过程不能启动; 与序列互补的mRNA杂交,发挥与反义RNA相似的抑制作用。 3)核醯( ribozyme) 具有核酸内切酶活性的RNA分子,与相应的mRNA结合后能发 挥酶活性,将mRNA降解 4)小干扰RNA( SIRNA) 21~23nt小分子双链RNA,识别特异mRNA,形成RNA诱导的沉默复合 物(RSC,从而导致特异的转录后基因沉默 5)CR|SPR干扰
• 反义核酸技术 15 1）反义RNA 与相应的mRNA形成双链，阻止mRNA的翻译 2）脱氧寡核苷酸（oligodeoxyribonucleotide, ODN） –TFO（triplex-forming oligo): 与DNA双链的特定部位结合形成三聚体）， 阻止转录因子的结合，使转录过程不能启动; –与序列互补的mRNA杂交，发挥与反义RNA相似的抑制作用。 3）核酶（ribozyme） 具有核酸内切酶活性的RNA分子，与相应的mRNA结合后能发 挥酶活性，将mRNA降解 4) 小干扰RNA（siRNA） 21～23 nt小分子双链RNA，识别特异mRNA，形成RNA诱导的沉默复合 物（RISC)，从而导致特异的转录后基因沉默 5) CRISPR干扰
Add TFO GENE TFO nVn plate (antisense) strand Sense DNA strand mRNA Add antisense 5′ AAAAAA 3 5 AAAA 3 oligodeoxynucleotide or an antisense gene which is transcribed to give a (a) Inhibition of translation specific antisense RNA or (b)( If a ribozyme, direct cleavage a ribozyme of mRNA ( b)(i) If an oligodeoxynucleotide the mRNA of the RNA-DNA hybrid is cleaved by RNase H
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