核酶 催化RNA切割和RNA剪接 XXXXXXXXXXX GUC XXXXXXXXXXXX aaaaaaaa 3 ●●··●●●·●●●●● ●●●●··●●·● 3 YYYYYYYYYYYCAYYYYYYYYYYYY5 AC CoG AllU Catalytic mpone Recognition GC sequences GU
核 酶 17 催化RNA切割和RNA剪接 Recognition sequences
第二节基因治疗的基本流程 克隆治疗基因 载体的选择与构建 选择合适的靶细胞 基因转移 五.基因转染细胞的筛选与鉴定 六.回输体内
18 第二节 基因治疗的基本流程 一．克隆治疗基因 二．载体的选择与构建 三．选择合适的靶细胞 四．基因转移 五．基因转染细胞的筛选与鉴定 六．回输体内
治疗基因 与缺陌基因相对应的特定的正常基因; 与缺陷基因无关但有治疗意义的基因(如细胞因子基因) (一)从基因组中分离目的基因:PCR (二)从mRNA合成CDNA: RT-PCR (三)人工合成 (四)从基因组文库中分离
19 一、 治疗基因 •与缺陷基因相对应的特定的正常基因； •与缺陷基因无关但有治疗意义的基因（如细胞因子基因） （一）从基因组中分离目的基因：PCR （二）从mRNA合成cDNA：RT-PCR （三）人工合成 （四）从基因组文库中分离
二、基因治疗的靶细胞 生殖细胞基因治疗( germ cell gene therapy) 将外源的正常基因转移到患者的生殖细胞中,使其后代 发育成正常个体并世代传递。从根本上解决后代的遗传缺 陷问题。存在伦理学障碍,在许多国家被禁止 体细胞基因治疗( somatic cell gene therapy) 影响只限于某个体的当代,只涉及患者本人体细胞的遗 传转变,不能从根本上解决向后代的传递问题。技术上易于 施行,无伦理学障碍
20 • 生殖细胞基因治疗 ( germ cell gene therapy ) 将外源的正常基因转移到患者的生殖细胞中，使其后代 发育成正常个体并世代传递。从根本上 解决后代的遗传缺 陷问题。存在伦理学障碍，在许多国家被禁止 • 体细胞基因治疗（somatic cell gene therapy ) 影响只限于某个体的当代，只涉及患者本人体细胞的遗 传转变，不能从根本上解决向后代的传递问题。技术上易于 施行，无伦理学障碍。 二、 基因治疗的靶细胞
选择靶细胞的条件 具有组织特异性,即外源基因仅在该系统组 织中表达,而在其他组织中不表达或表达水 平较低。 2.取材容易,细胞有增生优势且生命周期长。 3.易于受外源基因的转染。 21
选择靶细胞的条件 21 1. 具有组织特异性，即外源基因仅在该系统组 织中表达，而在其他组织中不表达或表达水 平较低。 2. 取材容易，细胞有增生优势且生命周期长。 3. 易于受外源基因的转染