(二)克隆载体的运梓和构建 质粒DNA 克隆载体 噬菌体DNA 病毒DNA
(二)克隆载体的选择和构建 • 质粒DNA • • 克隆载体 噬菌体DNA • 病毒DNA
(三)外源基因与载体的连接 连接策略 1, 粘端DNA间的连接 (1)同一限制性内切酶切割位点连接 (2)不同限制性内切酶切割位点连接 2.平端DNA间的连接 3.同聚物加尾连接 4.人工接头连接
(三) 外源基因与载体的连接 连接策略 1. 粘端DNA间的连接 (1) 同一限制性内切酶切割位点连接 (2) 不同限制性内切酶切割位点连接 2. 平端DNA间的连接 3. 同聚物加尾连接 4. 人工接头连接
Plasmid EcoRl EcoRly ⊙ AATICR DNA to be inserted CITAA.G CTTAA EcoRI EcoRl EcoRI DNA is cut with EcoRl at arrows. CTTAA AATTC EcoRL Sticky ends DNA recombination+ DNA ligase MOUIE A Mismatch Recombinant Mismatch DNA Inserting a DNA Sample into a Plasmid
载体DNA 日的DNA dGTP dCTP 未确脱氧楼查酸转移隔一】 3 PolyG PolyG PolyC PolyC PolyG PolyC