共价修饰 口用可溶性大分子,如聚乙二醇、右旋糖苷、肝素等,通过共价键 连接于酶分子的表面,形成一层覆盖层。 口例如:用聚乙二醇修饰超氧物歧化酶,不仅可以降低或消除酶的 抗原性,而且提高了抗蛋白酶的能力,延长了酶在体内的半衰期 从而提高了酶药效。 」口每分子核糖核酸酶与6.5分子的右旋糖酐结合,可以使酶活力提高 到原有酶活力的2.25倍; 口每分子胰凝乳蛋白酶与11分子右旋糖酐结合,酶活力达到原有酶 活力的5.1倍
o 用可溶性大分子，如聚乙二醇、右旋糖苷、肝素等，通过共价键 连接于酶分子的表面，形成一层覆盖层。 o 例如：用聚乙二醇修饰超氧物歧化酶 ，不仅可以降低或消除酶的 抗原性，而且提高了抗蛋白酶的能力，延长了酶在体内的半衰期 从而提高了酶药效。 o 每分子核糖核酸酶与6.5分子的右旋糖酐结合，可以使酶活力提高 到原有酶活力的2.25倍； o 每分子胰凝乳蛋白酶与11分子右旋糖酐结合，酶活力达到原有酶 活力的5.1倍 共价修饰
大分子修饰(共价)的过程 口修饰剂的选择:大分子结合修饰采用的修饰剂是水溶性大分子。例如, 聚乙二醇(PEG)、右旋糖酐、蔗糖聚合物(Fico‖!)、葡聚糖、环状 糊精、肝素、羧甲基纤维素、聚氨基酸等。要根据酶分子的结构和修饰 剂的特性选择适宜的水溶性大分子。 口修饰剂的活化:作为修饰剂中含有的基团往往不能直接与酶分子的基团 进行反应而结合在一起。在使用之前一般需要经过活化,然后才可以与 酶分子的某侧链基团进行反应 口修饰:将带有活化基团的大分子修饰剂与经过分离纯化的酶液,以一定 的比例混合,在一定的温度、pH值等条件下反应一段时间,使修饰剂的 活化基团与酶分子的某侧链基团以共价键结合,对酶分子进行修饰 ]分离:需要通过凝胶层析等方法进行分离,将具有不同修饰度的酶分子 分开,从中获得具有较好修饰效果的修饰酶
大分子修饰(共价)的过程 o 修饰剂的选择：大分子结合修饰采用的修饰剂是水溶性大分子。例如， 聚乙二醇（PEG）、右旋糖酐、蔗糖聚合物（Ficoll）、葡聚糖、环状 糊精、肝素、羧甲基纤维素、聚氨基酸等。要根据酶分子的结构和修饰 剂的特性选择适宜的水溶性大分子。 o 修饰剂的活化：作为修饰剂中含有的基团往往不能直接与酶分子的基团 进行反应而结合在一起。在使用之前一般需要经过活化，然后才可以与 酶分子的某侧链基团进行反应。 o 修饰：将带有活化基团的大分子修饰剂与经过分离纯化的酶液，以一定 的比例混合，在一定的温度、pH值等条件下反应一段时间，使修饰剂的 活化基团与酶分子的某侧链基团以共价键结合，对酶分子进行修饰。 o 分离：需要通过凝胶层析等方法进行分离，将具有不同修饰度的酶分子 分开，从中获得具有较好修饰效果的修饰酶
口聚乙二醇是线性分子具有良好的生物相容性和水溶性, 在体内无毒性、无残留、无免疫原性,并可消除酶的 抗原性,使其末端活化后可以与酶产生交联,因而, 它被广泛用于酶的修饰。 酶 半衰期相对稳定性 天然SOD 0min 右旋糖酐-SOD 7 h 70 Fico11(低分子量)-SOD 14h 140 Ficoll(高分子量)-SOD 24h 240 聚乙二醇-SOD 35h 350
o 聚乙二醇是线性分子具有良好的生物相容性和水溶性， 在体内无毒性、无残留、无免疫原性，并可消除酶的 抗原性，使其末端活化后可以与酶产生交联，因而， 它被广泛用于酶的修饰。 酶 半衰期 相对稳定性 天然SOD 6 min 1 右旋糖酐-SOD 7 h 70 Ficoll(低分子量)–SOD 14 h 140 Ficoll(高分子量)–SOD 24 h 240 聚乙二醇-SOD 35 h 350