pBV220质粒图1-3pBV220的物理图谱EcoRI,SmalBamHl,Sall,Hinell,PatHindm·图中Clts857编码一个温Xmml+度敏感阻遏蛋白。BgllPL+·37℃，CI结合PR和PL，IInBT1T2PR-SsplXmnl插入的外源基因不表达。HindillpBV220-HincllScalHindllCIts857Amp.·42℃，CI失活，插入的Hincll-Pvul3666bp外源基因表达。Bgllori
pBV220质粒 • 图中CIts857编码一个温 度敏感阻遏蛋白。 • 37℃，CI结合PR和PL， 插入的外源基因不表达。 • 42℃，CI失活，插入的 外源基因表达
卡那霉素（Kan）、新霉素（Neor）、G418抗性基因（G418r）杀菌剂，Kanamycin，Neomycin和G418均属脱氧链霉胺氨基葡萄糖苷类抗生素，可结合在核糖体上，导致mRNA发生错读。来自转座子Tn5和Tn903的Kanr抗性基因均可使这类抗生素磷酸化，使之不能进入细胞内
杀菌剂，Kanamycin，Neomycin和G418均属脱氧链霉胺氨基葡萄糖苷类 抗生素，可结合在核糖体上，导致mRNA发生错读。 来自转座子Tn5和Tn903的Kanr抗性基因均可使这类抗生素磷酸化，使 之不能进入细胞内
96)BmrlBbs1 (t)(5379) Amill-PcilAset (7))ANnPE525263t883220Nder24)SnaBI(140)2RBSpEI(430)CMVF819-S15BsrD1 (453)(216) AR1INhet (591)BpmT (S56)C21mtl：1595)Afel(s140) BseYIgw(ogNcot (7S5)PaeR71-Xhol (613)(496s) Spel-CMVethey-(s07)ScaT (851)Ahd(Bte)(6559) Eco0109)Bae-Sne1S8ot (905)Pstl-Son(979)(6450) BsalTSpHE-C01mcherry (10173056)Rur1eAr(IS-43AL TE-LASall (si00)BbvCI (142)BsFI:NgoNIV (1249)二aeBantt (caps)Accest (34s)(4143) 8stB1Dralm (13s7)Y-EGFPpmChepK03-Km5437tp xmal (1360)O9940160.BioVector NTCC InC.1362(3977)Rsrl)BamHt (1364)ECPFN(1428J4138cVI(1660BtuAl-BseM (is99)EXFRR.deas.i7o(3694) BsrDI(3579)PHFE-Tth1111(563)FsplBstz171 (2000)EGEPC(20312057)(3624)Bsu3618fOn(13834060te0)SacR(301) BsgO1 -, Clat(3462) ind12000(03236)SmSV40pA-8(2262_2281)(0211230) 5V40pm-EBVfo2E2Sts1* (2370)自A340(3050) Sexlu +(249a)(29642984) DBA8E 3BsgT (2694)BioVectorNTCCIncDralmi(2577)(2sig)AcutBsrGT (2809)Flen27022722)
β-半乳糖苷酶基因（lacz和lacZα）>β-半乳糖苷酶基因编码1021个氨基酸，氨基未端称为α链，羧基未端称为β链α链负责将β链装配为四聚体一一α-互单独的β链不具酶活性，只有在α链的帮助下组装成β4才具有酶活性补作用为α链编码的基因称之为lacZα，β链基因为laczβLacZα和β链基因的分别表达通常以LacZα作为载体的遗传标记基因，而由宿主细胞表达β链
◇ β-半乳糖苷酶基因编码1021个氨基酸，氨基末端称为α链，羧基末端称为β链 ◇ α链负责将β链装配为四聚体 ◇ 单独的β链不具酶活性，只有在α链的帮助下组装成β4才具有酶活性—— ◇ 为α链编码的基因称之为lacZα，β链基因为lacZβ。 ◇LacZα和β链基因的分别表达
β-半乳糖苷酶基因的优点?菌细胞含有纯质粒，就能在细胞内合成β-半乳糖苷酶。酶催化X-Gal水解为兰色产物，检测直观。5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactoside5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖昔分解成半乳糖和一个深蓝色的物质5-溴-4-氯靛蓝含有纯质粒的菌落呈蓝色，含有外源基因的菌落呈白色
◇菌细胞含有纯质粒，就能在细胞内合成 ◇酶催化X-Gal水解为兰色产物，检测直观。 ◇含有纯质粒的菌落呈蓝色，含有外源基因的菌落呈白色。 16