CloningVector-pUc1gECOR1Muttiple Clone Site(MCS)AmpRHind3Lacz'pUCI9LaclAmp=AmpicillinResistancegeneOrivLacz'=Geneforalpha-peptideofβ-Promotorgalacsidase.(SpecialisedE.coliusedcontainsremainingportion)puC19多克隆位点(ultipleCloneSite)图谱452396+lacz5'-GCCAAGCTTGCATGCCTGCAGGTCGACTCTAGAGGATCCCCGGGTACCGAGCTCGAATTC-3Hind IIIPstIBamHiECORIKpnXbalSmalSaciSph1SallSse83871XmalAcclHinc Il
(GUS gene)葡萄糖苷酸酶基因β-葡萄糖苷酸酶可将X-Gluc(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)降解为兰色产物。适用范围十分广泛因为许多生物中没有这种基因Sspl(7715)1NhelSeal595Spel1/Pst(986)Aatl‘PstI (994)LTR/PstI (1170)01(1482)SoflBsotpolyAHRSp-GUSNotl (1815)7813bpsin LTRNhel(S441)11CialGUSpuroXbal BuNecol(8725MarlEucalyptusoccidentalis(按树)fcnNool(4447)tI(3736)KpnEcoRInelBgllSall
β-葡萄糖苷酸酶可将X-Gluc(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)降解为兰 色产物。 适用范围十分广泛,因为许多生物中没有这种基因 Eucalyptus occidentalis (桉树)
荧光素酶基因(luciferase Gene)荧光素酶或由萤火虫产生,可催化荧光素氧化,并产生荧光或由发光细菌(Photobacteriumfischeri)产生。发光是胞内荧光酶催化氧化反应(m11.1115sd110.05LBHRKXhi9.15,6TRKPs2.5tPPCV6NFIuXFPcaRYBE1141R发光拇SN8.0E00R3.4Pa17.7887441ORS.8PELS4Dnte5Ttobacco
• 荧光素酶或由萤火虫产生,可催化荧光素氧化,并产生荧光。 或由发光细菌(Photobacterium fischeri)产生。 发光是胞内荧光酶催化氧化反应。 tobacco
绿色荧光蛋白基因(GFP)GFP是由水母产生的一种可发光的蛋白质,追踪蛋白质的活动情况,了解蛋白质在什么时候产生,不同蛋白质在细胞里的互动形态等。2008年,科学家下村修、马丁·查尔菲、钱永健因为发现和研究绿色荧光蛋白(GFP)的贡献而获得诺贝尔化学奖,该蛋白现已成为当代生物科学最重要的工具。/MCSPCMVIEpUCoriHSVTKCopGFPpolyApCop-Green-Nvector,4.7kbSv40KanfINeorpolyAf1oriPsvAOeSV40
GFP是由水母产生的一种可发光的蛋白质,追踪蛋白质的活动情况,了解蛋白质在 什么时候产生,不同蛋白质在细胞里的互动形态等。 2008年,科学家下村修、马丁·查尔菲、钱永健因为发现和研究绿色荧光蛋白(GFP) 的贡献而获得诺贝尔化学奖,该蛋白现已成为当代生物科学最重要的工具
二质粒载体质粒(plasmid)(1~500kb)是染色体以外能自主复制的双链闭合环状DNA分子,广泛存在于细菌细胞中。在霉菌、蓝藻、酵母和动植物细胞中也有分布。目前对细菌质粒研究的较为深入,多使用大肠杆菌质粒为载体。(一)质粒一般特性上样孔新族腾十1.质粒形状OCDNALDNA质粒:环状质粒、线性质粒CCCDNADNA质粒、RNA质粒拖扑异构Commonplasmidvectorscancarryupto15kbforeignDNACCCDNAOCDNA质粒构型观察示意图
二 质粒载体 质粒(plasmid) (1~500kb)是染色体以外能自主复制的双链闭合环状DNA 分子,广泛存在于细菌细胞中。在霉菌、蓝藻、酵母和动植物细胞中也有分 布。目前对细菌质粒研究的较为深入,多使用大肠杆菌质粒为载体。 (一)质粒一般特性 1. 质粒形状 质粒:环状质粒、线性质粒 DNA质粒、RNA质粒 Common plasmid vectors can carry up to 15kb foreign DNA