* (1)质粒(Plasmid),主要指人工构建(三)、载体的种类的质粒。* (2)噬菌体的衍生物,噬菌体DNA改·在基因工程中所用的造。载体,主要有: (3)柯斯质粒(cosmid),质粒与噬菌体DNA重组。Expression plasmids* (4)动物病毒,天然病毒染色体改造。transfectedintohumarellculture* (5)人工染色体,人工重组构建,用于基因组计划
(三)、载体的种类 • 在基因工程中所用的 载体,主要有: v (1) (Plasmid),主要指人工构建 的质粒。 v (2) 的衍生物,噬菌体DNA改 造。 v (3) 柯斯质粒(cosmid),质粒与噬菌 体DNA重组。 v (4) ,天然病毒染色体改造。 v (5) ,人工重组构建,用于 基因组计划
(四)、遗传标记基因·1.标记基因的作用:·指示外源DNA分子(载体或重组分子)是否进入宿主细胞;·指示外源DNA分子是否插入载体分子形成了重组子。·2.标记基因的种类:·抗性标记基因·营养标记基因·生化标记基因
(四)、遗传标记基因 • 1.标记基因的作用: • 指示外源DNA分子(载体或重组分子) 宿主细胞; • 指示外源DNA分子是否插入载体分子形成了 。 • 2.标记基因的种类: • 抗性标记基因 • 营养标记基因 • 生化标记基因
3.常用的遗传标记基因四环素抗性基因(Tet)抑菌剂,Tetracycline可结合在核糖体30s亚基中的一种蛋白质分子上,抑制核糖体的转位过程。抑制细胞蛋白质合成,细胞停止生长四环素抗性基因编码一种399AAs蛋白质,与细菌细胞膜结合,阻止四环素分子进入细菌细胞
(Tet r) 抑菌剂,Tetracycline可结合在核糖体30s亚基中的一种蛋白质分子上,抑 制核糖体的转位过程。抑制细胞蛋白质合成,细胞停止生长。 四环素抗性基因编码一种399 AAs蛋白质,与细菌细胞膜结合,阻止四环 素分子进入细菌细胞。 3.常用的遗传标记基因
EcoR14361Cla123Hindill29Aatll4286EcoRV185Sspl4170Nhe12294000BamH1375Sph/562Sca13846ECON1622Pvul3735Sa/l651PshA1712Pst13809Ap'Vsp13539TerXmalll939Bsa13435Nrul9721000Eam110513363pBR322BspM110634,363bpBsm113533000Styl1369Ava11425A/wN12886Msc11444oriBstAP11580Bsgl1650Kpn211664Mam11668AflllBspLU11|>2475Ndel2297BsaA122272000Bsf110712246/Esp312124Pvull2066Tth11112219面
的基因回路
氨芒青霉素抗性基因(Amp)杀菌剂,Ampicillin可抑制细菌细胞膜上参与细胞壁合成酶类的活性,干扰细胞分裂,杀死细胞。Ampr抗性基因编码一种分泌到细菌细胞周间质的酶,催化β-内酰胺环Smal的水解,使氨芒青霉素失活。EcoRBamHISallPtLHind illAAGGAGgaattcccggggatccgtcgacctgcagccaagcttSDMCSrrnBPRPLpBV2203666bpClts857Amprori
杀菌剂,Ampicillin可抑制细菌细胞膜上参与细胞壁合成酶类的活性, 干扰细胞分裂,杀死细胞。 Ampr抗性基因编码一种分泌到细菌细胞周间质的酶,催化β-内酰胺环 的水解,使氨苄青霉素失活