确定细胞凋亡而不是坏死 通过如下方法: 2.DAP|荧光染色 3 TUNEL原位杂交 4. Annex in v-GFP/P|标记 5.Sub-G流式细胞仪定量分析 6. DNA adder
确定细胞凋亡而不是坏死 通过如下方法: 1.形态学观察 2.DAPI荧光染色 3.TUNEL原位杂交 4.Annexin V-GFP/PI标记 5.Sub-Gl流式细胞仪定量分析 6.DNA ladder
(1)经相差显微镜观察,细胞经·0H处理后,逐渐变圆, 失去与周围细胞的联系,而最终从瓶壁脱落下来;而对 照组显示正常的细胞形态。
(1) 经相差显微镜观察,细胞经·OH处理后,逐渐变圆, 失去与周围细胞的联系,而最终从瓶壁脱落下来;而对 照组显示正常的细胞形态
(2)DAP荧光染色显示,细胞核皱缩,染色质凝 聚碎裂,形成凋亡小体;对照细胞核呈现均匀, 明亮的荧光。 a b
(2) DAPI荧光染色显示,细胞核皱缩,染色质凝 聚碎裂,形成凋亡小体;对照细胞核呈现均匀, 明亮的荧光
(3)用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUP切口 末端标记( TUNEL)原位杂交能够检测到DNA的片 段化。 a b
(3) 用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP切口 末端标记(TUNEL)原位杂交能够检测到DNA的片 段化
(4)凋亡早期细胞,细胞膜由于磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻被 Annexin V-GFP标记在荧光显微镜 下观察呈现绿色荧光;凋亡晚期细胞呈现红色荧 光,是由于细胞膜与核膜破损,P进入核区与 DNA结合。而对照组正常细胞不显示任何荧光。 a b
(4)凋亡早期细胞,细胞膜由于磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻被Annexin V-GFP标记在荧光显微镜 下观察呈现绿色荧光;凋亡晚期细胞呈现红色荧 光,是由于细胞膜与核膜破损,PI进入核区与 DNA结合。而对照组正常细胞不显示任何荧光