实验二鸡染色体标本的制备和观察一、实验原理同小白鼠。二、实验材料、器具和试剂出雏3日龄之内的雏鸡（按羽色自别配套）、显微镜、2毫升注射器、10毫升离心管、吸管、试管架、载玻片、恒温水浴锅、离心机、剪刀、解剖刀、蜡盘、。2ml注射器、5号针头、10ml刻度离心管、吸管、试管、试管架、载玻片、盖片、离心机、显微镜、解剖器具（剪刀、镊子等）。试剂：秋水仙素溶液（0.02%）、0.075MKCI、冰醋酸、甲醇、Giemsa母液。四、方法步骤1.秋水仙素处理取材前2～3h，给维鸡腹腔注射秋水仙素溶液，剂量为2～4微克/克活重。2.杀鸡取髓用断颈椎方法处死维鸡，取出胫骨和股骨，剔净皮肉，用自来水将肌肉碎渣冲洗干净。用剪刀剪掉胫骨和股骨两端，用2毫升注射器吸取等渗液2%柠檬酸钠溶液通过5号针头注入骨髓腔反复4-5次将骨髓细胞冲入离心管。共收集细胞悬液5～6毫升。平衡，1000转/分离心8分钟，弃上清。3.低渗向试管内加预热的0.075MKCI溶液，置37℃恒温水浴锅内低渗20～21分钟。4.预固定低渗结束时，加入3-5滴新配甲醇-冰醋酸固定液，立即混匀，平衡，1000转/分离心8分钟，弃上清。5.第一次固定加入新配甲醇-冰醋酸固定液5-6毫升，用吸管轻轻吸打均匀，静置20分钟。1000转/分离心8分钟，弃上清。6.第二次固定加入新配甲醇-冰醋酸固定液5-6毫升，用吸管轻轻吸打均匀，静置20分钟。1000转/分离心8-10分钟，弃上清。7.滴片加入适量（4～6滴）固定液制成细胞悬液，滴两滴于冰冻的载玻片上，空气干燥。8.将染色体制片反扣于染色板上，用1：9Giemsa稀释液染色30分钟，自来水冲洗，干后，显微镜下观察(图3-1、图3-2)
实验二 鸡染色体标本的制备和观察 一、实验原理 同小白鼠。 二、实验材料、器具和试剂 出雏 3 日龄之内的雏鸡（按羽色自别配套）、显微镜、2 毫升注射器、10 毫升离心管、 吸管、试管架、载玻片、恒温水浴锅、离心机、剪刀、解剖刀、蜡盘、。2ml 注射器、5 号 针头、10ml 刻度离心管、吸管、试管、试管架、载玻片、盖片、离心机、显微镜、解剖器 具（剪刀、镊子等）。 试剂：秋水仙素溶液（0.02%）、0.075MKCl、冰醋酸、甲醇、Giemsa 母液。 四、方法步骤 1．秋水仙素处理 取材前 2～3h，给雏鸡腹腔注射秋水仙素溶液，剂量为 2～4 微克／ 克活重。 2．杀鸡取髓 用断颈椎方法处死雏鸡，取出胫骨和股骨，剔净皮肉，用自来水将肌肉碎 渣冲洗干净。用剪刀剪掉胫骨和股骨两端，用 2 毫升注射器吸取等渗液 2%柠檬酸钠溶液通 过 5 号针头注入骨髓腔反复 4-5 次将骨髓细胞冲入离心管。共收集细胞悬液 5～6 毫升。平 衡，1000 转/分离心 8 分钟，弃上清。 3．低渗 向试管内加预热的 0.075MKCl 溶液，置 37℃恒温水浴锅内低渗 20～21 分钟。 4．预固定 低渗结束时，加入 3-5 滴新配甲醇-冰醋酸固定液，立即混匀，平衡，1000 转/分离心 8 分钟，弃上清。 5．第一次固定 加入新配甲醇-冰醋酸固定液 5-6 毫升，用吸管轻轻吸打均匀，静置 20 分钟。1000 转/分离心 8 分钟，弃上清。 6．第二次固定 加入新配甲醇-冰醋酸固定液 5-6 毫升，用吸管轻轻吸打均匀，静置 20 分钟。1000 转/分离心 8-10 分钟，弃上清。 7．滴片 加入适量（4～6 滴）固定液制成细胞悬液，滴两滴于冰冻的载玻片上，空气 干燥。 8．将染色体制片反扣于染色板上，用 1：9Giemsa 稀释液染色 30 分钟，自来水冲洗， 干后，显微镜下观察(图 3-1、图 3-2)
图3-1在高倍显微镜下观察到的图3-2在低倍显微镜下观察到的雏鸡骨髓细胞染色体雏鸡骨髓细胞分裂相和间期细胞附：Gimsa原液的配制先将吉姆萨充分研细，取粉末1克溶于66毫升纯甘油内，置于60℃温箱2h，再加甲醇66毫升混合即可。配制的染液为浓染液
图 3-1 在高倍显微镜下观察到的 图 3-2 在低倍显微镜下观察到的 雏鸡骨髓细胞染色体 雏鸡骨髓细胞分裂相和间期细胞 附：Gimsa 原液的配制 先将吉姆萨充分研细，取粉末 1 克溶于 66 毫升纯甘油内，置于 60℃温箱 2h，再加甲醇 66 毫升混合即可。配制的染液为浓染液