附录:果蝇实验参考资料一、果蝇的生活史果蝇属于昆虫纲,双翅目,与家蝇是不同的种。黑腹果蝇(D.melanogaster)是最广泛用于遗传学研究的昆虫,这种果蝇容易饲养,生命周期短,在25℃条件下,从卵到成虫约10天:25℃时成虫约活15天。在21℃的新鲜培养基上两周就可产生新成虫。卵和幼虫阶段为8天,蛹阶段为6天,果蝇成虫可以活上几个星期。一只雌蝇在10天中可以产500多个卵。因为果蝇很小,故饲养所占的空间也小,但对于迅速标出突变特征来说,果蝇是足够大了。果蝇的一生分四个明显的阶段:卵、幼虫、蛹和成虫(图1-1、图1-2)。卵蛹成虫幼虫图1-1果蝇的一生图1-2黑腹果蝇的生活周期黑腹果蝇的生活周期长短与温度关系很密切,30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡,低温则使它生活周期延长,同时生活力也减低,果蝇培养的最适宜温度20~25℃果蝇的生活周期长短与温度关系很密切(表3-1),30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡,低温则使它生活周期延长,同时生活力也减低,果蝇培养的最适合温度20~25℃
附 录:果蝇实验参考资料 一、果蝇的生活史 果蝇属于昆虫纲,双翅目,与家蝇是不同的种。黑腹果蝇(D. melanogaster)是最广泛 用于遗传学研究的昆虫,这种果蝇容易饲养,生命周期短,在 25℃条件下,从卵到成虫约 10 天;25℃时成虫约活 15 天。在 21℃的新鲜培养基上两周就可产生新成虫。卵和幼虫阶段 为 8 天,蛹阶段为 6 天,果蝇成虫可以活上几个星期。一只雌蝇在 10 天中可以产 500 多个 卵。因为果蝇很小,故饲养所占的空间也小,但对于迅速标出突变特征来说,果蝇是足够大 了。 果蝇的一生分四个明显的阶段:卵、幼虫、蛹和成虫(图 1-1、图 1-2)。 卵 幼虫 蛹 成虫 图 1-1 果蝇的一生 图 1-2 黑腹果蝇的生活周期 黑腹果蝇的生活周期长短与温度关系很密切,30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡,低 温则使它生活周期延长,同时生活力也减低,果蝇培养的最适宜温度 20~25℃ 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切(表 3-1),30℃以上的温度能使果蝇不育和死 亡, 低温则使它生活周期延长,同时生活力也减低,果蝇培养的最适合温度 20~25℃
表1-3果蝇发育与温度的关系10℃15℃20℃25℃卵一幼虫8天5天57天18天6.3天4.2天幼虫→成虫二、果蝇的饲料配制果蝇在水果摊和果园中经常见到,但它并不是以水果为生而是食水果上的酵母菌,因此实验室内凡是能发酵的基质,均可作为果蝇饲料。果蝇饲料的主要成分是:玉米粉、红糖、琼脂、酵母粉、苯甲酸。培养管使用前应刷洗干净,高温消毒,以防霉菌生长。中国农业大学果蝇实验室的配方如下(按总体积100ml计算):玉米粉10%,红糖10%,琼脂1.2~1.5%,酵母1.2~1.5%,苯甲酸0.15%。将各种原料加热成糊状后(注意在玉米糊离开火源后再加入酵母液)即可分装到培养管中。三、果蝇的雌雄鉴别由于雌蝇生殖器官中有贮精囊,一次交配可保留大量精子,供多次排卵受精用,因此做杂交实验前必须收集未交配过的处女蝇。由于孵化出的幼蝇在12小时内(更可靠是8小时)不交配,因此必须在这段时间内把雌、雄蝇分开培养,所得的雌蝇即为处女蝇。同一株系的果蝇雄蝇一般比雌蝇个体小(图1-3),雄性的腹面有4个腹片(图1-4),腹部有两条黑细纹,尾端钝而圆呈一片黑色。第一对脚的节前端表面有一撮黑色鬃毛,称性梳(图1-5)。雌性腹部6个腹片,腹部有5条排列均匀的黑色横纹,尾端尖,颜色浅,节上无性梳。棕果锅唯果鲜图1-3雌雄黑腹果蝇d第4放标第4版板5#S1图1-4黑腹果蝇的腹部腹板图
表 1-3 果蝇发育与温度的关系 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 卵 →幼虫 幼虫→成虫 57 天 18 天 8 天 6.3 天 5天 4.2 天 二、果蝇的饲料配制 果蝇在水果摊和果园中经常见到,但它并不是以水果为生而是食水果上的酵母菌,因此 实验室内凡是能发酵的基质,均可作为果蝇饲料。果蝇饲料的主要成分是:玉米粉、红糖、 琼脂、酵母粉、苯甲酸。培养管使用前应刷洗干净,高温消毒,以防霉菌生长。 中国农业大学果蝇实验室的配方如下(按总体积 100ml 计算):玉米粉 10%,红糖 10%, 琼脂 1.2~1.5%,酵母 1.2~1.5%,苯甲酸 0.15%。将各种原料加热成糊状后(注意在玉米糊 离开火源后再加入酵母液)即可分装到培养管中。 三、果蝇的雌雄鉴别 由于雌蝇生殖器官中有贮精囊,一次交配可保留大量精子,供多次排卵受精用,因此做 杂交实验前必须收集未交配过的处女蝇。由于孵化出的幼蝇在 12 小时内(更可靠是 8 小时) 不交配,因此必须在这段时间内把雌、雄蝇分开培养,所得的雌蝇即为处女蝇。 同一株系的果蝇雄蝇一般比雌蝇个体小(图 1-3),雄性的腹面有 4 个腹片(图 1-4), 腹部有两条黑细纹,尾端钝而圆呈一片黑色。第一对脚的跗节前端表面有一撮黑色鬃毛,称 性梳(图 1-5)。雌性腹部 6 个腹片,腹部有 5 条排列均匀的黑色横纹,尾端尖,颜色浅, 跗节上无性梳。 图 1-3 雌雄黑腹果蝇 图 1-4 黑腹果蝇的腹部腹板图
?1图1-5雄果蝇的性梳果蝇幼虫期区别较难,成虫区别雌雄容易(表1-4)。雄性的腹部末端钝而圆,颜色深。第一对脚的节前端表面有黑色繁毛流苏,称性梳。雌性腹部末端尖,颜色浅,节前端无黑色鬃毛。表1-4果蝇雄鉴别标准雌雄方法观察项目雌蝇雄蝇较大较小腹部膨大呈椭圆形,尾端较尖圆筒形,尾端较钝肉眼鉴别有黑色横纹3-5条,粗有黑色横纹5一7条,米末端一条特别粗,尾腹背侧细均匀端呈黑色腹部6个腹片4个腹片无性梳解剖镜下观察第一对节有性梳附:果蝇麻醉方法在做果蝇杂交实验前必须首先麻醉果蝇,通常的做法是将麻醉瓶的棉花塞用3~5滴乙醚浸湿,待乙醚气体充满麻醉瓶时将将培养管中的果蝇拍落在麻醉瓶中,塞紧棉塞,数秒钟后,果蝇将被麻醉,待全部果蝇昏迷后,将它们倒在白瓷板上在放大镜下,用毛刷进行雌雄果蝇的挑选。注意如果被麻醉的果蝇是要进行杂交实验用的亲本一定要采取轻麻醉,如果被麻醉的果蝇观察统计后不再利用,可以深度麻醉致死(果蝇翅膀外展45℃角,说明果蝇已死亡)。然后倒入户体瓶中处理
图 1-5 雄果蝇的性梳 果蝇幼虫期区别较难,成虫区别雌雄容易(表 1-4)。雄性的腹部末端钝而圆,颜 色深。第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏,称性梳。雌性腹部末端尖,颜色浅, 跗节前端无黑色鬃毛。 表 1-4 果蝇雌雄鉴别标准 雌雄方法 观察项目 雌蝇 雄蝇 肉眼鉴别 腹部 较大 较小 膨大呈椭圆形,尾端较尖 圆筒形,尾端较钝 腹背侧 有黑色横纹 5-7 条,粗 细均匀 有黑色横纹 3-5 条, 末端一条特别粗,尾 端呈黑色 腹部 6 个腹片 4 个腹片 解剖镜下观察 性梳 无 第一对跗节有性梳 附:果蝇麻醉方法 在做果蝇杂交实验前必须首先麻醉果蝇,通常的做法是将麻醉瓶的棉花塞用 3~5 滴乙 醚浸湿,待乙醚气体充满麻醉瓶时将将培养管中的果蝇拍落在麻醉瓶中,塞紧棉塞,数秒钟 后,果蝇将被麻醉,待全部果蝇昏迷后,将它们倒在白瓷板上在放大镜下,用毛刷进行雌雄 果蝇的挑选。注意如果被麻醉的果蝇是要进行杂交实验用的亲本一定要采取轻麻醉,如果被 麻醉的果蝇观察统计后不再利用,可以深度麻醉致死(果蝇翅膀外展 45℃角,说明果蝇已 死亡)。然后倒入尸体瓶中处理