6、根据蛋白质疏水基团与相应的载体基团结合来 纯化蛋白质 蛋白质分子上有疏水区,它们主要由酪氨酸、亮 氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸等非极性的侧 链密集在一起形成,并暴露于分子表面。这些疏水 区,能够与吸附剂上的疏水基团结合,再通过降低 介质的离子强度和极性,或用含有去垢剂的溶剂, 增髙洗脱剂的pH值等方法将蛋白质洗脱下来 用含酚基疏水基团的琼脂糖纯化重组人表皮生长 因子( rhEgF),纯度可达94%,回收率达82%
6、根据蛋白质疏水基团与相应的载体基团结合来 纯化蛋白质 蛋白质分子上有疏水区，它们主要由酪氨酸、亮 氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸等非极性的侧 链密集在一起形成，并暴露于分子表面。这些疏水 区，能够与吸附剂上的疏水基团结合，再通过降低 介质的离子强度和极性，或用含有去垢剂的溶剂， 增高洗脱剂的pH值等方法将蛋白质洗脱下来。 用含酚基疏水基团的琼脂糖纯化重组人表皮生长 因子（rhEGF），纯度可达94%，回收率达82%
7、根据蛋白质在溶剂系统中分配的不同来纯化蛋白 质 这是一种以化合物在两个不相溶的液相之间进行分 配为基础的分离过程,称之为逆流分溶。利用逆流分 溶技术分离垂体激素、氨基酸、DNA是很有效的。 8.根据蛋白质受物理、化学等作用因素的影响来纯 化蛋白质 蛋白质易受pH、温度、酸、碱、金属离子、蛋白 沉淀剂、络合剂等的影响,由于各种蛋白质都存在着 差异,可利用这种差异来纯化蛋白质。 白蛋白在弱酸性条件下加辛酸钠可耐受67℃的温 度,而其他蛋白质将变性
7、根据蛋白质在溶剂系统中分配的不同来纯化蛋白 质 这是一种以化合物在两个不相溶的液相之间进行分 配为基础的分离过程，称之为逆流分溶。利用逆流分 溶技术分离垂体激素、氨基酸、DNA是很有效的。 8．根据蛋白质受物理、化学等作用因素的影响来纯 化蛋白质 蛋白质易受pH、温度、酸、碱、金属离子、蛋白 沉淀剂、络合剂等的影响，由于各种蛋白质都存在着 差异，可利用这种差异来纯化蛋白质。 白蛋白在弱酸性条件下加辛酸钠可耐受67℃的温 度，而其他蛋白质将变性
球蛋白或白蛋白在碱性条件下,可以和利凡诺作 用,形成络合物而与其他蛋白质分离。细胞色素C 和胰岛素可用一定浓度的蛋白沉淀剂如三氯醋酸沉 淀,而保存其活力。 9、根据蛋白质的选择性吸附性质来纯化蛋白质 在蛋白质分离中,最广泛使用的吸附剂有结晶磷 酸钙(羟灰石)、磷酸钙凝胶、硅胶、皂士沸石 硅藻土、活性白土、氧化铝以及活性炭等。诸如催 产素、胰岛素、HCG、HMG、细胞包素C等都可以 通过吸附层析技术进行纯化
球蛋白或白蛋白在碱性条件下，可以和利凡诺作 用，形成络合物而与其他蛋白质分离。细胞色素C 和胰岛素可用一定浓度的蛋白沉淀剂如三氯醋酸沉 淀，而保存其活力。 9、根据蛋白质的选择性吸附性质来纯化蛋白质 在蛋白质分离中，最广泛使用的吸附剂有结晶磷 酸钙（羟灰石）、磷酸钙凝胶、硅胶、皂土沸石、 硅藻土、活性白土、氧化铝以及活性炭等。诸如催 产素、胰岛素、HCG、HMG、细胞包素C等都可以 通过吸附层析技术进行纯化
10、根据酶对蛋白质的作用来纯化蛋白质 对于酶蛋白——超氧化物歧化酶(SOD)的提取, 因sOD能抵抗蛋白酶的水解,可用蛋白水解酶降解其 他蛋白质,以便于SOD进一步的纯化。 球蛋白、ACTH在分子中有活性中心,可用蛋白 酶水解切去与生物活性无关的分子部分,保留活性分 子片断,使产品纯化。 对于无胰岛素生物活性的胰岛素原,用蛋白水解 酶可切去胰岛素原分子中的C-肽,使胰岛素激活 些活性多肽常与其他蛋白质分子结合而不呈现活 性或不能够被提取,用蛋白水解酶可以使其与其它蛋 白质解离,恢复其生物活性和在溶液中的正常性质
10、根据酶对蛋白质的作用来纯化蛋白质 对于酶蛋白——超氧化物歧化酶（SOD）的提取， 因SOD能抵抗蛋白酶的水解，可用蛋白水解酶降解其 他蛋白质，以便于SOD进一步的纯化。 γ—球蛋白、ACTH在分子中有活性中心，可用蛋白 酶水解切去与生物活性无关的分子部分，保留活性分 子片断，使产品纯化。 对于无胰岛素生物活性的胰岛素原，用蛋白水解 酶可切去胰岛素原分子中的C-肽，使胰岛素激活。 一些活性多肽常与其他蛋白质分子结合而不呈现活 性或不能够被提取，用蛋白水解酶可以使其与其它蛋 白质解离，恢复其生物活性和在溶液中的正常性质
(三〕蛋白质的分离和纯化 1.时间因素 在蛋白质分离和纯化过程中,共同的问题是蛋白 质反应达到平衡所需要的时间,而且为避免蛋白质 的变性、微生物的污染等,操作常在低温环境中进 为更快达到反应平衡,应该考虑到这些因素。通 常在25℃时,化学反应的速率是低温5℃时的3~4倍 这与物质的扩散系数有关,而扩散系数受物质的粘 度和温度的影响。蛋白质生物大分子反应与小分子 化合物不同,后者是以分、秒和毫秒计时的,而前 者要10分钟以上
（三〕蛋白质的分离和纯化 1．时间因素 在蛋白质分离和纯化过程中，共同的问题是蛋白 质反应达到平衡所需要的时间，而且为避免蛋白质 的变性、微生物的污染等，操作常在低温环境中进 行。 为更快达到反应平衡，应该考虑到这些因素。通 常在25℃时，化学反应的速率是低温5℃时的3～4倍。 这与物质的扩散系数有关，而扩散系数受物质的粘 度和温度的影响。蛋白质生物大分子反应与小分子 化合物不同，后者是以分、秒和毫秒计时的，而前 者要10分钟以上