●●● ●●●● 氨基酸分析仪洗脱过程 ●●●●● ●●●● ●●●●● ●●●● 1.氨基酸在pH2的条件下都带正电荷,在阳离子交换树脂上均被吸附, 但结合强度各不相同。 2.随着缓冲液在离子交换柱上流动,氨基酸不断的被吸附、解吸附。由于 氨基酸性质的差异(酸碱性、极性、分子大小),吸附强度有差异。 3.不同氨基酸与离子交换树脂的亲和力不同:碱性氨基酸>芳香族氨基酸 >中性氨基酸>酸性氨基酸及羟基氨基酸。 4提高流动相pH值,氨基酸正电荷减少,吸附力减弱,最后从离子交换柱 上洗脱下来,洗脱顺序是酸性和带羟基氨基酸、中性氨基酸、碱性氨基酸。 ●5氨基酸标准溶液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺序一定, 标准液各种氨基酸的浓度一定,洗脱峰的面积一定,由此可计算出样品中 各种氨基酸的含量
⚫ 1. 氨基酸在pH 2.2的条件下都带正电荷，在阳离子交换树脂上均被吸附， 但结合强度各不相同。 ⚫ 2. 随着缓冲液在离子交换柱上流动，氨基酸不断的被吸附、解吸附。由于 氨基酸性质的差异（酸碱性、极性、分子大小），吸附强度有差异。 ⚫ 3. 不同氨基酸与离子交换树脂的亲和力不同：碱性氨基酸＞芳香族氨基酸 ＞中性氨基酸＞酸性氨基酸及羟基氨基酸。 ⚫ 4.提高流动相pH值，氨基酸正电荷减少，吸附力减弱，最后从离子交换柱 上洗脱下来，洗脱顺序是酸性和带羟基氨基酸、中性氨基酸、碱性氨基酸。 ⚫ 5.氨基酸标准溶液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺序一定， 标准液各种氨基酸的浓度一定，洗脱峰的面积一定，由此可计算出样品中 各种氨基酸的含量。 氨基酸分析仪洗脱过程
●●● ●●●● ●●●●● ●●●● ●●●●● ●●●● 通常细分为两种系统:蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸 分析系统(锂盐系统),利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸 锂进行梯度洗脱。其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸,速度较 快,基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸,速度较慢, 基线一般不如钠盐系统好
⚫ 通常细分为两种系统：蛋白水解分析系统（钠盐系统）和游离氨基酸 分析系统（锂盐系统），利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸 锂进行梯度洗脱。其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸，速度较 快，基线平直度好；锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸，速度较慢， 基线一般不如钠盐系统好
●●● ●●●● ●●●●● ●●●● 离子交换树脂 ●●●●● ●●●● 专用氨基酸分析仪的色谱柱主要是以磺酸型强酸性阳离子交换 树脂为柱填料。强酸型阳离子交换树脂,它是由苯乙烯和二乙 烯苯聚合而成的。该树脂是由苯乙烯和二乙烯基本聚合后磺化 而成,球状树脂的粒度一般在5-1μm之间,交联度多为8% 12%。 交联度大,树脂的网状结构紧密,孔隙度小,对外界离子进入 树脂有阻碍作用,较大的离子根本不能进入树脂内部,这样就 可以提高树脂对离子的选择性。交联度大的适合用于分子量较 小的氨基酸分离;交联度小,树脂结构疏松,孔隙度大,适合 用于蛋白质、肽类的分离
离子交换树脂 ⚫ 专用氨基酸分析仪的色谱柱主要是以磺酸型强酸性阳离子交换 树脂为柱填料。强酸型阳离子交换树脂，它是由苯乙烯和二乙 烯苯聚合而成的。该树脂是由苯乙烯和二乙烯基本聚合后磺化 而成，球状树脂的粒度一般在5-10μm之间，交联度多为8%- 12%。 ⚫ 交联度大，树脂的网状结构紧密，孔隙度小，对外界离子进入 树脂有阻碍作用，较大的离子根本不能进入树脂内部，这样就 可以提高树脂对离子的选择性。交联度大的适合用于分子量较 小的氨基酸分离；交联度小，树脂结构疏松，孔隙度大，适合 用于蛋白质、肽类的分离
●●● ●●●● ●●●●● L-8900氨基酸分析仪内部结构 ●●●● ●●●●● ●●●● ●●●● 新型自动进样 柱温箱 器 最高温度80%) 1/2 检测单元 新型脱气 反应单元 装置 (最高温度140°) 试剂与清洗液 (6 Buffer 新型漏夜传 感器
L-8900氨基酸分析仪内部结构
●●● ●●●● ●●●●● ●●●● ●●●●● 日立L-8900氨基酸分析仪的组成 ●●●● 组件名称参数 缓冲液 6种(试剂与清洗液) 色谱柱 4.6 mm id x60mn,阳离子树脂填充(标配) 泵 0.001-0.9901/min,0-20MPa,2 自动进样器101;2001(200:0100 柱温箱 20-85℃(1℃C),电子加热/制冷的温控装置。 反应单元50℃-140℃,电子加热的温控系统 检测单元可见分光光度计(570,440nm) 控制系统 EZChrom Elite分析软件 CPU: 32bits OS, Windows xp
日立L-8900氨基酸分析仪的组成