快速平衡假说: E+S ES K3>P+E K4 ①在反应的初始阶段,底物浓度远远大于酶浓度,因此,底物浓度{S}可以认为不变。 ②游离的酶与底物形成ES的速度极快,E+S FS,而ES形成产物的速度极慢,ES分 解成产物P对于[S浓度的动态平衡没有影响,不予考虑 Kl、K2》K3 ③因为研究的是初速度,P的量很小,由P_ES可以忽略不记 ES的生成速度:K1([E]-[ES][S] ES的分解速度:K2ES K1(旧E]-[S])[S]=K2[ES] LEST KIEILS K2+KILS 反应速度 V=K,LEST K, EISI K 2+[S] K Ks现在称为底物常数 2、 briggs和 Haldane的“稳态平衡假说”及其对米式方程的发展: 稳态平衡假说: e+s P+E ES]的的生成与分解处于动态平衡(稳态),有时必须考虑S分解成产物P对于ES]动态平衡 的影响([ES]分解速度)。或者说,[S]的动态平衡(分解速度)不仅与ES——→E+S有关,还 与ES一P+E有关 稳态平衡假说的贡献在于第②点。 用稳态假说推导米式方程 ES生成速度
１１ 快速平衡假说： ① 在反应的初始阶段，底物浓度远远大于酶浓度，因此，底物浓度{S}可以认为不变。 ② 游离的酶与底物形成 ES 的速度极快，E + S ES，而 ES 形成产物的速度极慢，ES 分 解成产物 P 对于[ES]浓度的动态平衡没有影响，不予考虑。 K1、K2》K3 ③ 因为研究的是初速度，P 的量很小，由 P ES 可以忽略不记。 ES 的生成速度：K1（[E] - [ES]）[S] ES 的分解速度：K2[ES] K1（[E] - [ES]）[S] = K2[ES] 反应速度： KS 现在称为底物常数 2、 Briggs 和 Haldane 的“稳态平衡假说”及其对米式方程的发展： 稳态平衡假说： [ES]的的生成与分解处于动态平衡（稳态），有时必须考虑[ES]分解成产物 P 对于[ES]动态平衡 的影响（[ES]分解速度）。或者说，[ES]的动态平衡（分解速度）不仅与 ES E+S 有关，还 与 ES P + E 有关。 稳态平衡假说的贡献在于第②点。 用稳态假说推导米式方程： ES 生成速度： [ ] [ ][ ] [ ] 2 1 1 K K S K E S ES + = [ ] [ ] [ ] [ ][ ] [ ] max 1 2 3 3 K S V S S K K K E S V K ES S + = + = = + ⎯⎯⎯⎯→ ⎯⎯⎯→⎯ + 2 4 1 3 K K K K E S ES P E + ⎯⎯⎯⎯→ ⎯⎯⎯⎯→ + 3 4 1 3 K K P E K ES K E S
k1([E]-[ES])[S] ES分解速度 k2[ES]+k3ES 以上两个速度相等。 k1([E]-[ES])[S]=k2[ES]+k3ES] [ES]= K2+K3 KI+[S] Km+[S 反应速度: =K3[ES]= K3 eIS Vmax sT Km+[s Km+[sI Km 2+K3 K Vmax=k3 EI Km称米氏常数,当Km及Vm已知时,即可确定酶反应速度与底物浓度的关系 (三)米式方程讨论 快速平衡假说与稳态平衡假说的实质区别 e+s P+e 当K1、K2>>K3时,即ES→P是整个反应平衡中极慢的一步,那么 K2+K3K2 Km- KI KI V mux v max s Km+[s Ks+[s 这就是早年提出的米式方程 因此说,稳态平衡=快速平衡+慢速平衡, K2+K3 K2 K K KI KI 当ES-P(即K3K1)极慢时,稳态平衡基本等于快速平衡
１２ k1（[E] - [ES]）[S] ES 分解速度： k2[ES]+k3[ES] 以上两个速度相等。 k1（[E] - [ES]）[S] = k2[ES]+k3[ES] 反应速度： Vmax=k3 [E] Km 称米氏常数，当 Km及 Vmax已知时，即可确定酶反应速度与底物浓度的关系。 （三） 米式方程讨论 1、 快速平衡假说与稳态平衡假说的实质区别 当 K1、K2＞＞K3时，即 ES P 是整个反应平衡中极慢的一步，那么 这就是早年提出的米式方程 因此说，稳态平衡 = 快速平衡 + 慢速平衡， 当 ES P（即 K3/K1）极慢时，稳态平衡基本等于快速平衡 [ ] [ ][ ] [ ] [ ][ ] [ ] 1 2 3 Km S E S S K K K E S ES + = + + = [ ] [ ] [ ] [ ][ ] [ ] 3 max 3 K S V S Km S K E S V K ES m + = + = = 1 2 3 K K K Km + = + ⎯⎯⎯⎯→ ⎯⎯⎯→⎯ + 2 4 1 3 K K K K E S ES P E KS K K K K K Km + = 1 2 1 2 3 [ ] [ ] [ ] max [ ] max K S V S K S V S V m + S + = 1 3 1 2 1 2 3 K K K K K K K = + +