点样:0.5微升或1微升 展开方式:连续展开将薄层板置于SB/CD( short bed continuous development)室中展开。TCL板展开前先用二氯甲烷洗涤。 检出方式: shimadzu cs930双波长扫描仪。 下面是普萘洛尔和烯丙洛尔及其ZGP的结构 C CH NH OH CH3 H N
◼ 点样: 0.5微升或1微升. ◼ 展开方式: 连续展开.将薄层板置于SB/CD(short bed continuous development)室中展开。TCL板展开前先用二氯甲烷洗涤。 ◼ 检出方式：shimadzu CS—930双波长扫描仪。 ◼ 下面是普萘洛尔和烯丙洛尔及其ZGP的结构。 NH CH3 OH CH3 CH3 O NH CH3 OH CH3 O O NH N O O HOOC
添加β_CD(B- cyclodextrins) β~CD作为展开系统中手性添加剂用于拆分对映体的原理与作为手性固定相原理 相同。β—CD在甲醇或乙腈展开剂中分离丹酰氨基酸、二茂铁、烟碱及冠醚类 对映体 加入尿素可以克服β_CD在有机或水溶剂中溶解度小的不足。或制备亲水性的 β-CD:部分取代的羟乙基和羟丙基β_CD,水溶性明显增大 应用实例:分离非对映体辛可宁( Cinchonine)和辛可尼丁 Cinchonidine) 色谱条件:聚酰胺薄膜(7.5cm×2.5cm) 流动相最佳组成:饱和β_CD的乙腈溶液/1.啁molL的醋酸/二乙胺(4:1:1) PH7.8。 检测:展开后晾干薄膜,喷稀硫酸,荧光灯下被检测无现蓝色荧光
添加β —CD （β —cyclodextrins ） ◼ β —CD作为展开系统中手性添加剂用于拆分对映体的原理与作为手性固定相原理 相同。 β —CD在甲醇或乙腈展开剂中分离丹酰氨基酸、二茂铁、烟碱及冠醚类 对映体。 ◼ 加入尿素可以克服β —CD在有机或水溶剂中溶解度小的不足。或制备亲水性的 β —CD：部分取代的羟乙基和羟丙基β —CD，水溶性明显增大。 ◼ 应用实例：分离非对映体辛可宁（Cinchonine )和辛可尼丁(Cinchonidine)。 ◼ 色谱条件：聚酰胺薄膜（7.5cm×2.5cm)； ◼ 流动相最佳组成：饱和β —CD的乙腈溶液/1.2mol/L的醋酸/二乙胺（4：1：1）， PH 7.8。 ◼ 检测：展开后晾干薄膜，喷稀硫酸 ， 荧光灯下被检测无现蓝色荧光
手性药物高效液相色谱拆分 间接法:手性试剂与对映体在柱前形成非对映体,然后按常规固相分离 (手性衍生化试剂法 chiral derivatization reagent,CDR)。 直接法:直接使用手性固定相(CSP)或手性流动相(CMP)分离对映体 共同点:以现代HPLC技术为基础,并引入不对称中心。 ■手性衍生(CDR)法原理:如某些胺类不宜直接拆分,CSP上呈弱的色谱 性质衍生化转变成酰胺或氨基甲酸酯后可以显著改变色谱性质;或添加 某些基团,提高对映体的选择性,或提高检测效果。 CDR法满足的条件 手性试剂应是光学纯,贮存稳定,衍生化时不产生消旋化。 手性试剂及其衍生物在色谱条件下稳定,反应温和和定量完成 溶质分子至少有一个官能团供衍生 n产物在色谱分离时显高的柱效
手性药物高效液相色谱拆分 ◼ 间接法：手性试剂与对映体在柱前形成非对映体，然后按常规固相分离 （手性衍生化试剂法 chiral derivatization reagent, CDR)。 ◼ 直接法：直接使用手性固定相（CSP）或手性流动相（CMP）分离对映体。 ◼ 共同点：以现代HPLC技术为基础，并引入不对称中心。 ◼ 手性衍生（CDR）法原理：如某些胺类不宜直接拆分，CSP上呈弱的色谱 性质衍生化转变成酰胺或氨基甲酸酯后可以显著改变色谱性质；或添加 某些基团，提高对映体的选择性，或提高检测效果。 ◼ CDR法满足的条件： ◼ 手性试剂应是光学纯，贮存稳定，衍生化时不产生消旋化。 ◼ 手性试剂及其衍生物在色谱条件下稳定，反应温和和定量完成； ◼ 溶质分子至少有一个官能团供衍生 ◼ 产物在色谱分离时显高的柱效
手性衍生化试剂的种类 酰氯、磺酰氯、酸酐、氯甲酸酯。这些试剂可以与胺类、醇类药 物反应生成非对映体 酰氯、磺酰氯反应性强,但是欠稳定,放置时易消旋化。 醇和叔胺在合适的氢受体,在有机溶剂中反应;常用试剂有:氯 甲酸薄荷醇酯,和1—(9—芴基)乙基氯甲酸酯(FLEC),主要 用于分离羟基酸,胺类和氨基酸。 血浆中芳丙酸类消炎止痛药的分析实例 用亚硫酰氯与2—苯丙酸(2PPA)、酮洛芬( Ketoprofen)和非诺洛 芬( fenoprofen)的血浆样品提取物反应,然后再与R_2—苯乙胺 生成酰胺,进行色谱分离
手性衍生化试剂的种类 ◼ 酰氯、磺酰氯、酸酐、氯甲酸酯。这些试剂可以与胺类、醇类药 物反应生成非对映体。 ◼ 酰氯、磺酰氯反应性强，但是欠稳定，放置时易消旋化。 ◼ 醇和叔胺在合适的氢受体，在有机溶剂中反应；常用试剂有：氯 甲酸薄荷醇酯，和1—（9—芴基）乙基氯甲酸酯（FLEC），主要 用于分离羟基酸，胺类和氨基酸。 ◼ 血浆中芳丙酸类消炎止痛药的分析实例 用亚硫酰氯与2—苯丙酸（2—PPA）、酮洛芬(Ketoprofen)和 非诺洛 芬 (fenoprofen)的血浆样品提取物反应，然后再与R—2—苯乙胺 生成酰胺，进行色谱分离
酒石酸为天然光学纯手性化合物,对烷基醇胺类化合物具有立体 选择性。O,O—二取代酒石酸酐在强酸(三氯乙酸)作用下与 烷基醇胺药物反应获得其单衍生物。 用(+)—FLEC手性试剂自动柱前衍生HPLC法分离麻黄碱 OH 胺类手性试剂衍生化羧酸类、N保护氨基酸类、 CH3 醇类药物。 异硫氰酸酯(IC)、异氰酸酯(IC)与大多数醇类 R 胺类、氨基酸类生成衍生物。°=c=NcH CH3 OH
◼ 酒石酸为天然光学纯手性化合物，对烷基醇胺类化合物具有立体 选择性。O，O’—二取代酒石酸酐在强酸（三氯乙酸）作用下与 烷基醇胺药物反应获得其单衍生物。 ◼ 用（+）—FLEC手性试剂自动柱前衍生HPLC法分离麻黄碱 ◼ 胺类手性试剂衍生化羧酸类、N—保护氨基酸类、 醇类药物。 异硫氰酸酯（ITC）、异氰酸酯（IC）与大多数醇类、 胺类、氨基酸类生成衍生物。 CH3 HN R OH O O NH CH3 OH C N O CH3 O O N CH3 HO C O NH CH3