薄层分析、酶抑制技术和荧光 技术 薄层分析、酶抑制技术和荧光技术都是 基于薄层展开后用不同的现色方法进行 显色分析的技术。其中薄层的制备、展 开和显色技术是该分析方法的基础
薄层分析、酶抑制技术和荧光 技术 v薄层分析、酶抑制技术和荧光技术都是 基于薄层展开后用不同的现色方法进行 显色分析的技术。其中薄层的制备、展 开和显色技术是该分析方法的基础
薄层技术 薄层色谱法是把固定相(活性吸附剂或键合 剂)均匀的铺在一块平整的板上,制成薄板 厚度约0.25mm。与纸上色谱法一样,点样经 展开剂展开。 令特点:操作简单、效果比纸上色谱法要好 显色后斑点集中并且可以定量分析(与薄层 扫描仪配套)。 令试样量少,几微克到几百微克 可以为高效液相色谱选择合适的固定相
薄层技术 v 薄层色谱法是把固定相(活性吸附剂或键合 剂)均匀的铺在一块平整的板上,制成薄板。 厚度约0.25mm。与纸上色谱法一样,点样经 展开剂展开。 v 特点:操作简单、效果比纸上色谱法要好。 v 显色后斑点集中并且可以定量分析(与薄层 扫描仪配套)。 v 试样量少,几微克到几百微克。 v 可以为高效液相色谱选择合适的固定相
近代薄层色谱发展的类别简介 令薄层板法(略) 令圆筒色谱(管状色谱)法将固定相涂渍在管 的外壁上,可以减少横向扩散,宜于制备色 谱用。 令如果为小孔径管就为色谱棒。 令锥形薄层色谱法将薄层板制作成 倒圆锥体。展开时可以使溶剂前沿 扩大,展开剂向前沿扩散时形成速度梯度,结 果抵消了谱带扩展,使试样再度浓缩
近代薄层色谱发展的类别简介 v 薄层板法(略) v 圆筒色谱(管状色谱)法 将固定相涂渍在管 的外壁上,可以减少横向扩散,宜于制备色 谱用。 v 如果为小孔径管就为色谱棒。 v 锥形薄层色谱法 将薄层板制作成 倒圆锥体。展开时可以使溶剂前沿 扩大,展开剂向前沿扩散时形成速度梯度,结 果抵消了谱带扩展,使试样再度浓缩
径向薄层色谱法 两种类型:一种与圆形纸上色谱方法相似,分离效 果可以提高1.5倍;另一种是将普通薄层板点样处固 定相刮去,使展开剂只能通过点样处狭窄部分向前 方弧形展开。 令连续展开法 令在密闭槽中进行上行展开, 展开剂移动一定距离后即终了 令顶板蒸发展开 令用盖带有槽孔的展开槽,使部分薄层板露出槽外 展开时,槽里的展开剂不能蒸发,当上升到槽外时 就蒸发。这种展开法能够缩短展开剂移动满的斑点 之间的距离,不能够提高分离效能
径向薄层色谱法 v 两种类型:一种与圆形纸上色谱方法相似,分离效 果可以提高1.5倍;另一种是将普通薄层板点样处固 定相刮去,使展开剂只能通过点样处狭窄部分向前 方弧形展开。 v 连续展开法 v 在密闭槽中进行上行展开, 展开剂移动一定距离后即终了。 v 顶板蒸发展开 v 用盖带有槽孔的展开槽,使部分薄层板露出槽外。 展开时,槽里的展开剂不能蒸发,当上升到槽外时 就蒸发。这种展开法能够缩短展开剂移动满的斑点 之间的距离,不能够提高分离效能
开口槽展开法 薄层板在没有上盖的展开槽中展开。展开 过程中展开剂随时可以蒸发。越往上蒸发 越快。当展开剂到达一定高度时,上行展 开剂与蒸发展开剂速率相等,此时形成了 负的速度梯度,提高了移动慢的组分的分 离度,而降低了移动快的组分的分离度
开口槽展开法 v 薄层板在没有上盖的展开槽中展开。展开 过程中展开剂随时可以蒸发。越往上蒸发 越快。当展开剂到达一定高度时,上行展 开剂与蒸发展开剂速率相等,此时形成了 负的速度梯度,提高了移动慢的组分的分 离度,而降低了移动快的组分的分离度