纸色谱分离手性化合物 1951年 Kotake以纸色谱分离了谷氨酸和酪氨酸的消旋体; 1952年, Dalgliesh用纸色谱拆分了芳香氨基酸,并且提出了三 点接触的理论概念:一对对映体被固定相手性试剂识别,至少要 受到对映体和手性试剂3个位点的作用。这些作用是氢键、偶 极—偶极、π——π、静电、疏水或空间作用,也称为三点识别 模式。 纸色谱载体是纤维素,结构中不对称空腔对于两个对映体具有选 择性识别能力。不是单纯的分配技术,而是与对称的纤维素光活 性有关。用该理论知道分离氨基酸取得极大成功。 缺点:展开时间过长 Contractor改进:将纤维素作薄层,分离D—色氨酸,展开时间 由纸色谱的16小时缩短为1小时。三乙酰纤维素与纤维素有类似 的拆分机理。 目前纤维素薄层用与分离肽类及某些对映体药物
•纸色谱分离手性化合物 ◼ 1951年Kotake 以纸色谱分离了谷氨酸和酪氨酸的消旋体； ◼ 1952年， Dalgliesh用纸色谱拆分了芳香氨基酸，并且提出了三 点接触的理论概念：一对对映体被固定相手性试剂识别，至少要 受到对映体和手性试剂3个位点的作用。这些作用是氢键、偶 极—偶极、π——π、静电、疏水或空间作用，也称为三点识别 模式。 ◼ 纸色谱载体是纤维素，结构中不对称空腔对于两个对映体具有选 择性识别能力。不是单纯的分配技术，而是与对称的纤维素光活 性有关。用该理论知道分离氨基酸取得极大成功。 ◼ 缺点：展开时间过长。 ◼ Contractor改进：将纤维素作薄层，分离DL—色氨酸，展开时间 由纸色谱的16小时缩短为1小时。三乙酰纤维素与纤维素有类似 的拆分机理。 ◼ 目前纤维素薄层用与分离肽类及某些对映体药物
薄层色谱分离氟比洛芬对映体 微晶三乙酰纤维素( microcrystalline cellulose triacetate MCTA) 分离药物氟比洛芬 TCL规格;20cm×20cm( acetyl cellulose AC)(30010/AC 20和300-10/AC_40)或(MCTA粒度∠10微米),层厚250微 米 粘合剂为羧甲基纤维素钠 sodium carboxymethylcellulose CMC)或硅胶60GF24(粒度15微米)的乙酰化物水溶液 乙酰纤维素CMC薄层:取CMC1克与水10毫 升 H3C co0搅拌5分钟,再加入手性吸附剂9克和乙醇 35毫升,搅拌5分钟,匀浆后立刻铺板。 乙酰纤维素硅胶60F254薄层板:硅胶 60GF2543克与水15毫升,搅拌5分钟,加 入手性吸附剂9克和乙醇35毫升,振摇5分 钟铺板
薄层色谱分离氟比洛芬对映体 ◼ 微晶三乙酰纤维素（microcrystalline cellulose triacetate MCTA) 分离药物氟比洛芬。 ◼ TCL规格；20cm×20cm (acetyl cellulose AC) （300—10/AC— 20和300—10/AC—40）或（MCTA 粒度∠10微米），层厚250微 米。 ◼ 粘合剂为羧甲基纤维素钠（sodium carboxymethylcvellulose, CMC)或硅胶60GF254 （粒度15微米）的乙酰化物水溶液 。 ◼ 乙酰纤维素CMC薄层：取CMC1克与水10毫 升 ◼ 搅拌5分钟，再加入手性吸附剂9克和乙醇 ◼ 35毫升，搅拌5分钟，匀浆后立刻铺板。 ◼ 乙酰纤维素硅胶60GF254薄层板：硅胶 ◼ 60GF254 3克与水15毫升，搅拌5分钟，加 ◼ 入手性吸附剂9克和乙醇35毫升，振摇5分 钟铺板。 F H3C COOH
室温干燥,25小时内使用,勿于空气中久置 流动相:乙醇:水=40:60 HaC 展开时间:150分钟; 检测:UV254nm; 薄层中有CMC粘合剂时,拆分效能增加 三乙酰纤维素—硅胶60GF254薄层板展开时间1小时亦有好的效果 上述条件不能拆分苯氧布洛芬对映体(见右上图)。可能是两者所喊手 性中心在分支中位置不同所致一立体效能和疏水作用的重要作用。 卡洛芬(见右下图)对映体的分离:MCTA硅胶60GF254 流动相:异丙醇:水=40:60 H3C 展开时间6小时 NH 水和异丙醇有反响洗脱作用
◼ 室温干燥，2—5小时内使用，勿于空气中久置。 ◼ 流动相：乙醇：水 = 40：60； ◼ 展开时间：150分钟; ◼ 检测：UV254nm; ◼ 薄层中有CMC粘合剂时，拆分效能增加。 ◼ 三乙酰纤维素—硅胶60GF254薄层板展开时间1小时亦有好的效果。 ◼ 上述条件不能拆分苯氧布洛芬对映体（见右上图）。可能是两者所喊手 性中心在分支中位置不同所致—立体效能和疏水作用的重要作用。 ◼ 卡洛芬（见右下图）对映体的分离：MCTA—硅胶60GF254 ◼ 流动相：异丙醇：水 = 40：60 ◼ 展开时间6小时 ◼ 水和异丙醇有反响洗脱作用。 O H3C COOH NH H3C COOH Cl
β—环糊精(β- cyclodextrinsβ_CD)键合相 βa-Φ是℃修是_吡葡擿樹糖址苷雒瑳键而成 该分羯和有悱館卾釣方式 的方蜊映纲映俠铧复郃从而Ro-c2 在色雄禅到留差刹分目的。。00 Alk次将ΦD以噢轿镭秭鞬和于 硅胶藷表服丹鸭师酰、氟機氨1-<、°s 萘磺釅酸處騻ν爕轁茂铁类化合物。α 薄层的备制备: 取β-CD键合硅胶1.5克加入50%甲醇水溶液 CH 15毫升(含粘合剂002克)匀浆,铺3mm薄板 (5cm20cm),空气晾干,使用时75度活化15min 流动相:甲醇/三乙基醋酸铵(1:1,PH41) 荧光检出
β —环糊精（ β —cyclodextrins β —CD)键合相 ◼ β —CD是7个α—D—吡喃葡萄糖以1，4—苷键环和而成。 ◼ 该分子的缓和空腔具有手性识别能力，能以包结的方式 的方式与对映体分子形成非对映体主客复合物，从而 在色谱过程中造成滞留差异，达到分离目的。 Alak首次将β —CD以7个原子的桥键和于 硅胶表面，成功用于分离丹酰、萘取代氨 基酸及二茂铁类化合物。 薄层板的制备： O O CH2 O R O R O O H2C O R O R O O CH2 O R O R O O CH2 O R O R O O CH2 O R O R O O CH2 O R R O O O R O CH2 O R O O CH2 O R O R • β —CD是7个α—D—吡喃葡萄糖以1，4—苷键环合而成。 • 该分子的缓和空腔具有手性识别能力，能以包结的方式 的方式与对映体分子形成非对映体主客复合物，从而 在色谱过程中造成滞留差异，达到分离目的。 Alak首次将β —CD以7个原子的桥键和于 硅胶表面，成功用于分离丹酰（5—二甲氨基—1— 萘磺酰）、萘取代氨基酸及二茂铁类化合物。 薄层板的制备： 取β —CD键合硅胶1.5克加入50%甲醇水溶液 15毫升（含粘合剂0.02克）匀浆，铺3mm薄板 (5cm 20cm) ，空气晾干，使用时75度活化15min。 流动相：甲醇/三乙基醋酸铵（1：1，PH 4.1） 荧光检出
手性配体交换色谱固定相 该拆分法是利用手性配体与对映异构体之间形成具有不同稳定性铜 复合物进行色谱分离。当手性配体为羟基取代脯氨酸衍生物,待 拆分对映体为氨基酸时复合物以离子键吸附于硅胶疏水表面。手 性配体一般以氨基酸衍生物制成。如将RPC1薄层板用N,N 二正丙基L—丙氨酸铜复合物的缓冲溶液处理,制成的手性薄层板 成功分离了丹酰氨基酸各对对映体。 以多聚L—丙氨酸酰胺铜复合物的反相手性薄层板成功分离类似氨基 酸异构体 市售手性薄层板:具有浓缩区的RPC1s薄层板,硅胶平均直径5微米 所用手性配体为羟脯氨酸衍生物的铜复合物。浓缩区有孔径很大 比表面很小的惰性二氧化硅组成。惰性二氧化硅无分离作用,样 品点于浓缩区展开至两相之间时可以浓缩成很窄的点或带,经高 效薄层色谱可以达到有效分离
手性配体交换色谱固定相 该拆分法是利用手性配体与对映异构体之间形成具有不同稳定性铜 复合物进行色谱分离。当手性配体为羟基取代脯氨酸衍生物，待 拆分对映体为氨基酸时复合物以离子键吸附于硅胶疏水表面。手 性配体一般以氨基酸衍生物制成。如将RPC18薄层板用N，N— 二正丙基—L—丙氨酸铜复合物的缓冲溶液处理，制成的手性薄层板 成功分离了丹酰氨基酸各对对映体。 以多聚L—丙氨酸酰胺铜复合物的反相手性薄层板成功分离类似氨基 酸异构体。 市售手性薄层板： 具有浓缩区的RPC18薄层板，硅胶平均直径5微米， 所用手性配体为羟脯氨酸衍生物的铜复合物。浓缩区有孔径很大， 比表面很小的惰性二氧化硅组成。惰性二氧化硅无分离作用，样 品点于浓缩区展开至两相之间时可以浓缩成很窄的点或带，经高 效薄层色谱可以达到有效分离