丹酰氨基酸对映体分离实例 薄层板制备 RPC18F254TCL板(5cm×20cm)和RPC18F25 HPTCL (10αm×10αm),置于0.3moL醋酸钠/乙腈(70/30)溶液中 醋酸调节PH=7,展开后,吹去溶液,。再浸渍于含醋酸铜(0.3 mmo/L)和聚合L—苯丙酸酰胺(mmo/L)的水/乙腈(10:90) 溶液中至少1小时,取出、晾干备用 流动相:水/乙腈 点样:1mmoL浓度。 ■检出:UV360nm 结果:L—异构体的R值较小,与吸附剂作用较大。 聚合手性配体的制备和鉴定:乙二醇一二(2,3环氧丙烷)醚 (或乙二醇二缩水甘油醚 ether glycol diglycidyl ether)2mL (12.8mmo)和L—苯丙酸酰胺1.5g(9.1mmo)溶于3m.L甲醇中, 室温搅拌可以完成反应。油状产物溶解于甲醇,作为样品进行分 析
丹酰氨基酸对映体分离实例 ◼ 薄层板制备RPC18 F254TCL板（5cm × 20cm)和RPC18 F25HPTCL （10cm × 10cm)，置于0.3mol/L醋酸钠/乙腈（70/30）溶液中， 醋酸调节PH=7，展开后，吹去溶液，。再浸渍于含醋酸铜（0.3 m mol/L）和聚合L—苯丙酸酰胺（m mol/L）的水/乙腈（10：90） 溶液中至少1小时，取出、晾干备用。 ◼ 流动相：水/乙腈。 ◼ 点样：1mmoL/L浓度。 ◼ 检出：UV360nm ◼ 结果：L—异构体的Rf值较小，与吸附剂作用较大。 ◼ 聚合手性配体的制备和鉴定：乙二醇—二（2，3—环氧丙烷）醚 （或乙二醇二缩水甘油醚 ether glycol diglycidyl ether) 2 m.L. (12.8mmol)和 L—苯丙酸酰胺1.5g(9.1mmol)溶于3m.L甲醇中， 室温搅拌可以完成反应。油状产物溶解于甲醇，作为样品进行分 析
色谱柱为So- Sil TSK柱(300mm×75mm),简称额波长254nm, 流动相为0.1mo/L磷酸缓冲溶液,(PH3.5)和甲醇(9:1); 流速:1mL/min H2N H3C CH HO
◼ 色谱柱为Sio-Sil TSK柱(300mm ×75mm)，简称额波长254nm， 流动相为 0.1mol/L磷酸缓冲溶液，（PH 3.5）和甲醇（9：1）； ◼ 流速： 1mL /min。 H2 N O NH2 O O O O N O NH2 H3C O HO O HO O OH O CH3 OH
酸、碱手性试剂浸渍型手性固定相 薄层板简单的用一光活性的酸、碱或其它手性试剂浸渍,亦可制成手性 固定相。对映异构体分子在色谱过程中与薄层板上的手性试剂形成非对 映体而分离。 应用实例:L—精氨酸浸渍硅胶薄层分离布洛芬。 薄层板制备:硅胶G50g加入0.5%—精氨酸溶液100mL,匀浆铺于玻璃 板(20cm×20cm×0.5mm)上。L—精氨酸pI为8,加几滴醋酸维持PH 低于等电点。使氨基酸处于阳离子型,60度干燥过夜,备用。 样品溶液的制备:π0%乙醇为溶剂,配制1mmoL的布洛芬对映体溶液, 点样量为10uL。 维和二维展开:一维展开,对映体布洛芬和(+)布洛芬点在同一块 板上:二维展开,首先将对映体溶液点在L—精氨酸浸渍过的板上,第 次展开后(+)将布洛芬溶液点在前原斑点处。也可以将两种溶液点在 两块板上,在同样的条件下二维展开
酸、碱手性试剂浸渍型手性固定相 ◼ 薄层板简单的用一光活性的酸、碱或其它手性试剂浸渍，亦可制成手性 固定相。对映异构体分子在色谱过程中与薄层板上的手性试剂形成非对 映体而分离。 ◼ 应用实例：L—精氨酸浸渍硅胶薄层分离布洛芬。 ◼ 薄层板制备：硅胶G 50g加入0.5%L—精氨酸溶液100mL，匀浆铺于玻璃 板（20cm× 20cm× 0.5mm)上。L—精氨酸pI为8，加几滴醋酸维持PH 低于等电点。使氨基酸处于阳离子型，60度干燥过夜，备用。 ◼ 样品溶液的制备：70%乙醇为溶剂，配制1mmol/L的布洛芬对映体溶液， 点样量为10uL。 ◼ 一维和二维展开：一维展开，对映体布洛芬和（+）布洛芬点在同一块 板上；二维展开，首先将对映体溶液点在L—精氨酸浸渍过的板上，第一 次展开后（+）将布洛芬溶液点在前原斑点处。也可以将两种溶液点在 两块板上，在同样的条件下二维展开
展开剂:乙醇/甲醇/水(5/1/1)。玻璃缸温度32度(正负2度)。 展开时间30min,溶剂蒸汽预饱和15min 显色:展开结束,薄层板与60度干燥5min,置于碘蒸汽中,取出, 挥发碘。用稀盐酸喷洒,加热15min,放冷,用0.2%茚三酮显色。 维展开时间15min,二维展开时间20min 碘的作用是定位(有两个展开点) 茚三酮指示两个点均有精氨酸存在
◼ 展开剂：乙醇/甲醇/水（5/1/1）。玻璃缸温度32 度（正负2度）。 ◼ 展开时间30min,溶剂蒸汽预饱和15min。 ◼ 显色：展开结束，薄层板与60度干燥5min，置于碘蒸汽中，取出， 挥发碘。用稀盐酸喷洒，加热15min,放冷，用0.2%茚三酮显色。 ◼ 一维展开时间15min，二维展开时间20min。 ◼ 碘的作用是定位（有两个展开点）。 ◼ 茚三酮指示两个点均有精氨酸存在
手性流动相拆分法 在非手性薄层板上用含有手性试剂的流动相(CMA)的TLC法进 行对映异构体的拆分更方便。 添加手性离子对试剂利用对映体可与流动相中的手性离子对试 剂结合,形成非对映体的离子对,即可实现在非手性薄层板上分 拆对映体。 DIOLE2s4 HPTCL法拆分β—肾上腺素受体阻滞剂普萘洛尔和烯丙 洛尔的正相TCL法 色谱条件 薄层板: Lichrosorb diole24 HPTCL10m×10cm 流动相:二氯甲烷中有5mmol/LN苄氧基羰基甘氨酰基_L 脯氨酸(N- carbobenzoxy glycyl- L-proline zgp)和0.4mmol/L 的乙醇胺
手性流动相拆分法 ◼ 在非手性薄层板上用含有手性试剂的流动相（CMA）的TLC法进 行对映异构体的拆分更方便。 ◼ 添加手性离子对试剂 利用对映体可与流动相中的手性离子对试 剂结合，形成非对映体的离子对，即可实现在非手性薄层板上分 拆对映体。 ◼ DIOLF254 HPTCL法拆分β —肾上腺素受体阻滞剂普萘洛尔和烯丙 洛尔的正相TCL法。 ◼ 色谱条件 ◼ 薄层板：Lichrosorb DIOLF254 HPTCL 10cm× 10cm. ◼ 流动相：二氯甲烷中有5m mol/LN—苄氧基羰基—甘氨酰基—L— 脯氨酸（N-carbobenzoxy glycyl—L-proline ZGP)和0.4m mol/L 的乙醇胺