色谱技术 色谱法的分类 按照固定相与流动相物态分 相色谱:GC(GSC;GLC) 令液相色谱:(LSC;LLC) 超临界流体色谱:(SFC) 按照固定相使用形式分 柱色谱 平面色谱:在平面介质上进行组分分离的技术 薄层色谱:(TIC)薄层板和薄层棒 纸上色谱:(PC)圆形纸上色谱
色谱技术 v 色谱法的分类 v 一、按照固定相与流动相物态分 v 气相色谱: GC (GSC;GLC) v 液相色谱:(LSC;LLC) v 超临界流体色谱:(SFC) v 二、按照固定相使用形式分 v 柱色谱 v 平面色谱 :在平面介质上进行组分分离的技术 薄层色谱:(TLC)薄层板和薄层棒 纸上色谱:(PC)圆形纸上色谱
三、按照分离机理分类 吸附色谱 2、分配色谱 3、离子交换色谱:(IC) 利用离子交换树脂作固定相分离离子型化合物的色谱 法。用高效掖相色谱技术和离子交换树脂柱,用含 有某种特定例子的水溶液作流动相,在降低流动相 背景信号的前提下进行离子分离;或通过调节流动 相的pH值以抑制试样作粉的电离,从而分离离子化 合物:(离子抑制色谱)
v 三、按照分离机理分类 v 1、吸附色谱 v 2、分配色谱 v 3、离子交换色谱:(IC) 利用离子交换树脂作固定相分离离子型化合物的色谱 法。用高效掖相色谱技术和离子交换树脂柱,用含 有某种特定例子的水溶液作流动相,在降低流动相 背景信号的前提下进行离子分离;或通过调节流动 相的pH值以抑制试样作粉的电离,从而分离离子化 合物:(离子抑制色谱)
4、离子排除色谱:(IEC)利用离子交换树脂对电 解质与非电解质的斥力不同而达到分离的色谱法 最常用的是粒径=15μm高效凝胶型磺化苯乙烯/二乙 烯苯离子交换树脂(强酸型)。树脂溶涨后在小球 中溪流的水是稳定的水相,小球间是流动的水相 离子交换树脂在两个水相间起半透膜作用。试样中 与离子交换树脂的离子带相同电荷的离子被排斥在 固定水相之外,弱酸一分子存在被固定水相滞留; 非离子组分不被滞留,在两相间进行分配,按照祖 坟与树脂官能团作用力大小不同分开
v 4、离子排除色谱:(IEC)利用离子交换树脂对电 解质与非电解质的斥力不同而达到分离的色谱法。 最常用的是粒径=15μm 高效凝胶型磺化苯乙烯/二乙 烯苯离子交换树脂(强酸型)。树脂溶涨后在小球 中溪流的水是稳定的水相,小球间是流动的水相。 离子交换树脂在两个水相间起半透膜作用。试样中 与离子交换树脂的离子带相同电荷的离子被排斥在 固定水相之外,弱酸一分子存在被固定水相滞留; 非离子组分不被滞留,在两相间进行分配,按照祖 坟与树脂官能团作用力大小不同分开
令5、离子对色谱法:(IPC)在流动相中加入与所要 分离的组分相反电荷的离子(称为离子对,即离子 试剂),与组分形成离子对,从而改变组分的保留 值和分离度。 6、凝胶色谱:空间排除色谱、分子排除色谱、分子 筛色谱、液体排除色谱、体积排除色谱等(GPC) 用于大分子分离,生化中水嘴流动相成为凝胶过滤 色谱;合成高聚物中用有机物作流动性成为凝胶渗 透色谱
v 5、离子对色谱法:(IPC)在流动相中加入与所要 分离的组分相反电荷的离子(称为离子对,即离子 试剂),与组分形成离子对,从而改变组分的保留 值和分离度。 v 6、凝胶色谱:空间排除色谱、分子排除色谱、分子 筛色谱、液体排除色谱、体积排除色谱等(GPC)。 用于大分子分离,生化中水嘴流动相成为凝胶过滤 色谱;合成高聚物中用有机物作流动性成为凝胶渗 透色谱
亲和色谱生物体内生物分子之间都具有亲和力, 能形成可逆络合物,利用这种可逆络和与解离原理 进行色谱分离,即把配基键和在不溶于水的惰性载 体上成为亲和物从而进行提纯的技术 如酶与基质、抑制剂、变构效应剂或辅酶;激素与细 胞受体;维生素与结合蛋白;基团与核酸;抗体与 抗原;外源凝集素与红细胞表面的抗原等都具有亲 和力
v 亲和色谱 生物体内生物分子之间都具有亲和力, 能形成可逆络合物,利用这种可逆络和与解离原理 进行色谱分离,即把配基键和在不溶于水的惰性载 体上成为亲和物从而进行提纯的技术。 如酶与基质、抑制剂、变构效应剂或辅酶;激素与细 胞受体;维生素与结合蛋白;基团与核酸;抗体与 抗原;外源凝集素与红细胞表面的抗原等都具有亲 和力