第六章 食品安全现代生物检测技术 第一节 免疫学检测技术 第二节 PCR检测技术 第三节 转基因食品的检测技术
第六章 食品安全现代生物检测技术 第一节 免疫学检测技术 第二节 PCR检测技术 第三节 转基因食品的检测技术
• 第一节 免疫学检测技术 • 一、概述 • 抗原与抗体的结合反应是一切免疫测定技术的最基本原理。 在此基础上结合一些生化或理化方法作为信号显示或放大系统 即可建立免疫测定法，如放射免疫测定法、酶免疫测定法、荧 光免疫测定法等。一个成功的免疫测定法必须具备3个要素： 性能优良的抗体、灵敏和专一性的标记物和高效的分离手段。 按照是否使用标记物分为标记免疫测定法和非标记免疫测定法， 后者又称为经典免疫测定法；按反应介质分为均相或非均相(免 疫复合物需分离后检测)免疫测定法；按反应状态分为平衡态或 非平衡态免疫测定法。按照标记物种类，标记免疫测定法又分 为放射性标记测定法和非放射性标记测定法
• 第一节 免疫学检测技术 • 一、概述 • 抗原与抗体的结合反应是一切免疫测定技术的最基本原理。 在此基础上结合一些生化或理化方法作为信号显示或放大系统 即可建立免疫测定法，如放射免疫测定法、酶免疫测定法、荧 光免疫测定法等。一个成功的免疫测定法必须具备3个要素： 性能优良的抗体、灵敏和专一性的标记物和高效的分离手段。 按照是否使用标记物分为标记免疫测定法和非标记免疫测定法， 后者又称为经典免疫测定法；按反应介质分为均相或非均相(免 疫复合物需分离后检测)免疫测定法；按反应状态分为平衡态或 非平衡态免疫测定法。按照标记物种类，标记免疫测定法又分 为放射性标记测定法和非放射性标记测定法
• 目前最常用的免疫学检测技术如下： • （1）放射免疫测定技术 • （2）酶免疫测定技术 • （3）荧光免疫测定技术 • （4）发光免疫测定技术 • （5）胶体金免疫测定技术
• 目前最常用的免疫学检测技术如下： • （1）放射免疫测定技术 • （2）酶免疫测定技术 • （3）荧光免疫测定技术 • （4）发光免疫测定技术 • （5）胶体金免疫测定技术
• 二、酶联免疫吸附试验(ELISA) • （一）ELISA的基本原理 • ELISA(Enzyme-Linked immunosorbent assay)的基础是抗原 或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。这一方法的基本原理如 下。 • （1）使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，井保持其免 疫活性； • （2）使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种 酶标抗原或抗体既保留其免疫活性．又保留酶的活性。 • （二）ELISA的类型 • ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。用于临床检验 的ELISA主要有以下几种类型。 • 1 双抗体夹心法测抗原 • 2 双抗原夹心法测抗体 • 3 间接法测抗体 • 4 竞争法测抗体 • 5 竞争法测抗原
• 二、酶联免疫吸附试验(ELISA) • （一）ELISA的基本原理 • ELISA(Enzyme-Linked immunosorbent assay)的基础是抗原 或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。这一方法的基本原理如 下。 • （1）使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，井保持其免 疫活性； • （2）使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种 酶标抗原或抗体既保留其免疫活性．又保留酶的活性。 • （二）ELISA的类型 • ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。用于临床检验 的ELISA主要有以下几种类型。 • 1 双抗体夹心法测抗原 • 2 双抗原夹心法测抗体 • 3 间接法测抗体 • 4 竞争法测抗体 • 5 竞争法测抗原
• （三）ELISA的材料与试剂 • 完整的ELISA试剂盒包含以下各组分：已包被抗 原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；酶标记的抗原 或抗体（结合物）；酶的底物；阴性对照品和阳性对 照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量 测定中）；结合物及标本的稀释液；洗涤液；酶反应 终止液。 • 1 免疫吸附剂 • 2 结合物 • 3 酶的底物 • 4 洗涤液 • 5 酶反应终止液 • 6 阳性对照品和阴性对照品 • 7 参考标准品
• （三）ELISA的材料与试剂 • 完整的ELISA试剂盒包含以下各组分：已包被抗 原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；酶标记的抗原 或抗体（结合物）；酶的底物；阴性对照品和阳性对 照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量 测定中）；结合物及标本的稀释液；洗涤液；酶反应 终止液。 • 1 免疫吸附剂 • 2 结合物 • 3 酶的底物 • 4 洗涤液 • 5 酶反应终止液 • 6 阳性对照品和阴性对照品 • 7 参考标准品