3.转化细胞系通过某个转化过程形成的,常由于染色体断裂变成异倍体,失去正常细胞特点,而获得无限增殖能力。转化过程可以是自发的和人工的。由于转化细胞具有无限生命力,而且常常倍增时间较短,对培养条件和生长因子等要求较低,故更适于大规模工业化生产的需要
⒊ 转化细胞系 通过某个转化过程形成的,常由于染色体断裂 变成异倍体,失去正常细胞特点,而获得无限增殖 能力。转化过程可以是自发的和人工的。 由于转化细胞具有无限生命力,而且常常倍 增时间较短,对培养条件和生长因子等要求较低, 故更适于大规模工业化生产的需要
4.融合细胞系细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的过程,细胞融合的发生方式:自然融合、诱发融合
4. 融合细胞系 细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成 一个细胞的过程。 细胞融合的发生方式:自然融合、诱发融合
常见融合方法:生物学方法一病毒诱导细胞融合:仙台病毒介导。诱导融合过程:获得天活仙台病毒和细胞4℃下细胞与足够量仙台病毒孵育,使病毒颗粒吸附在细胞膜上的相应受体位点,促成细胞紧密靠近,粘附成团两细胞合并、变圆、融合37℃下粘结部位细胞膜的有序排列发生改变,形成通道细胞质互相渗透并融合
常见融合方法: 生物学方法-病毒诱导细胞融合:仙台病毒介导。 诱导融合过程: 获得灭活仙台病毒和细胞 4℃下细胞与足够量仙台病毒孵育,使病毒颗粒吸附在细 胞膜上的相应受体位点,促成细胞紧密靠近,粘附成团 两细胞合并、变圆、融合 37℃下粘结部位细胞膜的有序排列发生改变,形成通道 细胞质互相渗透并融合
化学方法一PEG诱导细胞融合ABPEG(聚乙二醇)是一种多聚化合PEG物,分子末端带有弱电性,易溶于水。实验室常用PEG分子量在200一20000。融合PEG诱导细胞融合是20世纪70年代发展起来的细胞融合技术,最初用于植物原生质体融合,后用于动物细胞融合。融合效率与分子量和浓度有关。O优点:是融合成本低,勿需特殊设备;融合子产生的异核率较高;融合过程不受物种限制。A、B杂交细胞缺点:PEG可能对细胞有毒害
化学方法-PEG诱导细胞融合 PEG(聚乙二醇)是一种多聚化合 物,分子末端带有弱电性,易溶于水。 实验室常用PEG分子量在200-20000。 PEG诱导细胞融合是20世纪70年代 发展起来的细胞融合技术,最初用于植 物原生质体融合,后用于动物细胞融合。 融合效率与分子量和浓度有关。 优点:是融合成本低,勿需特殊设备; 融合子产生的异核率较高;融合过程不 受物种限制。 缺点:PEG可能对细胞有毒害。 PEG A B 融合 A、B杂 交细胞
物理学方法一电诱导细胞融合:利用电诱导细胞融合,是20世纪80年代发展起来的细胞融合技术。原理:在脉冲电场作用下,细胞间紧接区域同时形成可逆电击穿(即形成细胞膜电穿孔),紧密接触部位的细胞膜形成膜桥和质桥连接,继而发生细胞融合,在一定条件下电穿孔自行修复,细胞膜恢复正常结构。优点:融合率高、重复性强、对细胞伤害小;装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察融合过程;免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控性强。缺点:仪器较贵重
物理学方法-电诱导细胞融合: 利用电诱导细胞融合,是20世纪80年代发展起来的细 胞融合技术。 原理:在脉冲电场作用下,细胞间紧接区域同时形成 可逆电击穿(即形成细胞膜电穿孔),紧密接触部位的细 胞膜形成膜桥和质桥连接,继而发生细胞融合,在一定条 件下电穿孔自行修复,细胞膜恢复正常结构。 优点: 融合率高、重复性强、对细胞伤害小; 装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察 融合过程; 免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控性强。 缺点:仪器较贵重