(二)探针技术 用放射性核素、生物素或荧光染料标记其 末端或全链的已知序列的多聚核苷酸链被称为 探针”,探针可以与固定在NC膜上的核苷 酸结合,判断是否有同源的核酸分子存在
目录 用放射性核素、生物素或荧光染料标记其 末端或全链的已知序列的多聚核苷酸链被称为 “探针”,探针可以与固定在NC膜上的核苷 酸结合,判断是否有同源的核酸分子存在。 (二)探针技术
二、印迹技术的类别及应用 (-)DNA印迹( Southern blotting) 用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的分析 (二)RNA印迹( Northern blotting) 用于RNA的定性定量分析。 (三)蛋白质的印迹( Western blotting) 用于蛋白质定性定量及相互作用研究
目录 二、印迹技术的类别及应用 (一)DNA印迹 (Southern blotting) (二)RNA印迹 (Northern blotting) (三)蛋白质的印迹 (Western blotting) 用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的分析。 用于RNA的定性定量分析。 用于蛋白质定性定量及相互作用研究
■其他: 斑点印迹( dot blotting) 原位杂交( in situ hybridization) DNA点阵 NA array) DNA芯片技术( DNA chip)
目录 其他: 斑点印迹 (dot blotting) 原位杂交 (in situ hybridization) DNA点阵 (DNA array) DNA芯片技术 (DNA chip)
限制性内切酶 RNA样品 酶切DNA溶液 蛋白样品 电泳↓转移↓杂交 转移到NC膜后与 转移到NC膜或尼龙膜 转移到NC膜或FDF 标记探针杂交 后与标记探针杂交 膜后与抗体反应 种印迹技术的比较 放或 射化 自学 显显 影色 DNA印迹 RNA印迹 蛋白印迹
目录 三 种 印 迹 技 术 的 比 较
DNA 转移至酸 千维滤膜上 限制酶消化( HindI) 加重量 吸潮纸 滤纸 转移缓神液 硝酸纤维滤 琼脂糖胶电脉 3PDNA探针 硝酸纤维滤膜 放射自显影 分子杂交实验
分子杂交实验 ① ② ③