第一节 大肠杆菌表达载体 原核生物的基因结构与表达特点 1 原核生物染色体DNA是裸露的环形DNA,其转 录和翻译是偶联的连续进行。 2. 原核生物形成多顺反子mRNA:mRNA在合成 过程中和多个核糖体结合,翻译形成多条肽链。 3、一般不含内含子(intron),没有转录及翻译后 加工系统
第一节 大肠杆菌表达载体 原核生物的基因结构与表达特点 1. 原核生物染色体DNA是裸露的环形DNA,其转 录和翻译是偶联的连续进行。 2. 原核生物形成多顺反子mRNA:mRNA在合成 过程中和多个核糖体结合,翻译形成多条肽链。 3、一般不含内含子(intron),没有转录及翻译后 加工系统
氨基酸 RNA 氨基酸○ 1肽链 vF8S86-c0888006E8 mRNA 核糖体
4、原核生物中功能相关的基因串联在一起,形成操纵 子;操纵子(operon):是一组功能上相关,受 同一调控区控制的基因组成的一个遗传单位。 5、原核生物中参与转录的基因结构:启动子、终止子、 核糖体结合位点 南十(p 结构阳 E理益丙】 做基因
4、原核生物中功能相关的基因串联在一起,形成操纵 子;操纵子(operon):是一组功能上相关,受 同一调控区控制的基因组成的一个遗传单位。 5、原核生物中参与转录的基因结构:启动子、终止子、 核糖体结合位点
启动子(promoter,P) 指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA 序列。 一般长40-60bp,两段彼此分开且又高度保守的核苷酸序列 组成 -10区(pribnow box):起始点上游5-10bp处,由6-8个 碱基TATAAT -35区:10bp组成 -35区与RNA聚合酶δ亚基结合,-10区与RNA聚合酶的核心 酶结合
指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA 序列。 一般长40-60 bp,两段彼此分开且又高度保守的核苷酸序列 组成 -10区(pribnow box):起始点上游5-10 bp处,由6-8个 碱基 TATAAT -35区:10 bp 组成 -35区与RNA聚合酶δ亚基结合,-10区与RNA聚合酶的核心 酶结合 启动子(promoter, P)
Operon -35 region Pribnow box Initiation (-10 region) site(+1) lac ACCCCAGGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGG lael CCATCGAATGGCGCAAAACCTTTCGCGGTATGGCATGATAGCGCCCGGAAGAGAGTC galP2 ATTTATTCCATGTCACACTTTTCGCATCTTTGTTATGCTATGGTTATTTCATACCAT araBAD GGATCCTACCTGACGCTTTTTATCGCAACTCTCTACTGTTTCTCCATACCCGTTTTT araC GCCGTGATTATAGACACTTTTGTTACGCGTTTTTGTCATGGCTTTGGTCCCGCTTTG trp AAATGAGCTGTTGACAATTAATCATCGAACTAGTTAACTAGTACGCAAGTTCACGTA bioA TTCCAAAACGTGTTTTTTGTTGTTAATTCGGTGTAGACTTGTAAACCTAAATCTTTT bioB CATAATCGACTTGTAAACCAAATTGAAAAGATTTAGGTTTACAAGTCTACACCGAAT tRNATYr CAACGTAACACTTTACAGCGGCGCGTCATTTGATATGATGCGCCCCGCTTCCCGATA rrnD1 CAAAAAAATACTTGTGCAAAAAATTGGGATCCCTATAATGCGCCTCCGTTGAGACGA rrnE1 CAATTTTTCTATTGCGGCCTGCGGAGAACTCCCTATAATGCGCCTCCATCGACACGG rrnAl AAAATAAATGCTTGACTCTGTAGCGGGAAGGCGTATTATGCACACCCCGCGCCGCTG Initiation -35 region Pribnow box site Concensus T C TT G A C A T.11-15bp.T A T AA T.5-8bp. A sequence: 423882847964534541 799544595196 6 T 55 G 48 42 RNA聚合酶6亚基识别-35区,接着核心酶结合在TATA框
consensus sequences RNA聚合酶δ亚基识别-35区,接着核心酶结合在TATA框