电子显微镜与光学显微镜 的结构,从原理上来说是相似 的,但也有不同之处
电子显微镜与光学显微镜 的结构,从原理上来说是相似 的,但也有不同之处
首先不同的是用电子束(电子流)代替照明光 源 其次,电镜使用的是电子透镜,而不是光学透 镜,电子透镜不是肉眼可见的物质透镜,它是 由磁或电所形成的磁场或电场的局部空间来起 到透镜的作用 第三个区别是成像原理不同。其成像是由于标 本中不同结构中原子与电子发生碰撞后,造成 电子散射角度不同,使荧光屏上的电子强度也 相应不同
• 首先不同的是用电子束(电子流)代替照明光 源。 • 其次,电镜使用的是电子透镜,而不是光学透 镜,电子透镜不是肉眼可见的物质透镜,它是 由磁或电所形成的磁场或电场的局部空间来起 到透镜的作用。 • 第三个区别是成像原理不同。其成像是由于标 本中不同结构中原子与电子发生碰撞后,造成 电子散射角度不同,使荧光屏上的电子强度也 相应不同
电镜制样技术 由于电子束的穿透能力有限,为了获得较 髙分辨率,需要使用超薄切片机制成厚度一般 仅为40~50m的超薄切片。这就需要样品有 定的刚性和韧性,为此,样品需要包埋在特 殊的介质中。但包埋的过程会破坏样品的结构, 因此超薄切片样品制备的第一步就是固定,其 后依次是包埋、切片和染色
电镜制样技术 由于电子束的穿透能力有限,为了获得较 高分辨率,需要使用超薄切片机制成厚度一般 仅为40~50nm的超薄切片。这就需要样品有 一定的刚性和韧性,为此,样品需要包埋在特 殊的介质中。但包埋的过程会破坏样品的结构, 因此超薄切片样品制备的第一步就是固定,其 后依次是包埋、切片和染色
超薄切片的制备 1、固定:戊二醛和(OsO4)等,锇酸后固定。 2、包埋:环氧树脂和丙烯酸树脂等 3、切片:玻璃刀用超薄切片机切片, 厚度40~50nm,切片收集在 铜网或镍网上,在电镜下观察。 4、染色:常用的染色液是醋酸双氧铀(易 染核酸)和铅盐(易染蛋白质)
超薄切片的制备 1、固定:戊二醛和(OsO4)等, 锇酸后固定。 2、包埋:环氧树脂和丙烯酸树脂等。 3、切片:玻璃刀用超薄切片机切片, 厚度40~50nm,切片收集在 铜网或镍网上,在电镜下观察。 4、染色:常用的染色液是醋酸双氧铀(易 染核 酸)和铅盐(易染蛋白质)