gene BcenechrotCFLAEEDREexomintronnomtiranscribedDNARESTRICTIONNUCLEASEDIGESTIONDwA fragmertsDNAOEIIESRE5ISNEFIIR#E#加装#馆克隆DNACLONIMHGSBRIIEB国BERENEgeramiDNAdenoe
6 DNA 克隆
gene BgeneAmpsomalFDeENEFEERENT#服业店DNATRANSCRIPTIONRNA2、 cDNAtranscriptsprobe:从已RNASPLICING构建的cDNAMRNAS文库中筛查和分离目的REVERSETRANSCRIPTIONAND!DNACLONING美+基因探针。SRSEEEEEoDNAalonoo
7 2 、cDNA probe :从已 构建的cDNA 文库中筛查 和分离目的 基因探针
3、寡核苷酸探针根据已知基因序列,人工合成一段互补的DNA片段一般长约15~50个bp。多数探针的制备都通过分子克隆的方法获得。克隆(clone):是指用无性繁殖的方法获得同一个体、细胞或分子的大量复制品
8 3、寡核苷酸探针 克隆(clone):是指用无性繁殖的方法获得同一个 体、细胞或分子的大量复制品。 根据已知基因序列,人工合成一段互补的DNA片段。 一般长约15~50个bp。多数探针的制备都通过分子 克隆的方法获得
二、探针的标记将探针标记上一种标识物以便杂交后检测常用于标记探针的标识物同位素:32P,35S,3H-dNTP等:非同位素:地高辛-dNTP,生物素-dNTP。常用的标记方法:
9 二、探针的标记 ⚫ 将探针标记上一种标识物以便杂交后检测。 ⚫ 常用于标记探针的标识物: ⚫ 同位素:32P , 35S , 3H-dNTP等; ⚫ 非同位素:地高辛-dNTP ,生物素-dNTP。 ⚫ 常用的标记方法: