网泰山医学院 省级精整鞋程申报 生药学实验方法与技术 生药学是一门专门研究商品生药的科学,也是一门综合性的应用学科。最初,生药学的主 要任务是甄别商品生药的真伪优劣,随着社会的发展和科学技术的不断进步,赋予生药学的内 容和任务不断翻新和增加。现在,随着全球性的推崇天然物质的热潮的迭起,天然药物的开发 应用,无论是何种形式的都是以生药学为基础的。作为药学专业的学习,如果不掌握这门学科 的基础知识和基本技能,要开展相关的工作是比较困难的,因此很有必要使药学生在掌握本学 科的基本理论知识的同时还要掌握一些支撑这些基本理论知识的技能,这样,才能使我们所掌 握的生药学知识比较全血面,工作起来才能够胜任基本的要求。 一、药用植物学部分 1,标本的采集:为什么要进行标本采集?这是植物学或药用植物学工作者在从事科研、教学 等工作时必须要进行的野外调查工作的重要内容之一。采集标本,首先是专业工作人员对自然 资源进行的一项调查工作,做到心中有数,另外,标本也是自然资源的重要凭证,也是今后进 行研究时作为重要的资料之一。因此,各地专业单位都建立有标本馆室供人们研究之用。各单 位也可在馆际之间进行标本的交流,甚至可以和国外进行标本的交流。之前首先要进行选点、 选路线、并做好野外工作的一切准备。然后进行实地调查、采集、并做好野外工作记录、还要 注重环境与资源保护等。如何真正做好这项工作?也不是一件简单的事情,要充分考虑到各方 面的情况,做好足够的准备,如:调查采集的内容、掌握有关的信息资料、工作方面的准备、 生活方面的准备、出行的时节(时间、季节等)、出行的路线、乘车的考虑、经费的问题等等 都要考虑的十分具体细致并十分可行。 工作中首先要求采集者在采集时充分考虑到下一步制做标本的具体要求,再下手进行采集, 特别要针对当前实物的具体情况选留标本的大小,如木本植物类,由于体积比较大,在下手剪 下标本时,既要考虑到剪哪一支的问题还要考虑到将来台纸的大小的问题:草本类植物也有大 小的问题,特别是体积比较大时,不同部位有时还要分别压制,如果能在一起压制,还要注意 尽量减少分枝、叶子、花序等部位的重叠:压制时要将标本修剪(较小的标本不需要)到理想 的状态,平铺于干燥的草纸上,摆放自然得体,叶子要翻过米一两片压上:较大的地下部分要 及时切开压上:糖分多或多汁的标本要先用开水烫一下再压制:容易脱落的植物器官要及时收 集等:及时做好工作记录,按照记录本的格式要求一一记录(内容尽量详细、野外观察要仔细、 调查要充分周到):及时挂好号牌,并要规范书写,切忌敷衍了事或偷懒误事。 2标本的制做:标本的制做是专业工作人员、管理人员必须要学握的一项技术,这是一项
@泰山医学院 dical Universit 省级精美程申报 长期的、连续不断的工作,也是一项技术性很强的技术工作,要求制作者要具备专业理论和专 业素质,还要有很好的敏业精神、吃苦耐劳的精神及奉献精神。在进行这项工作时,一般有标 本的选择整形、压制、号牌的书写、消毒、装订等工作程序,这个过程中间包含着许多专业的 知识、美学的知识等 将选择好的标本平铺于台纸上,再根据标本的大小摆放在合适的位置上(特别要注意在台 纸的左上角留出付签的位置,在右下角留出鉴定签的位置),然后用手术刀片在标本的适当位置 上切开切口,然后将准备好的白纸条(宽约3一4m)两端顺缝插下,待标本的所有位置的纸 条插完后,翻过来一一拉紧并用胶水粘紧即得(也可用细白线固定)。总的原则是装订出来的标 本既要有科学价值,也要得体美观。 3标本的鉴定:①鉴定签及副签的书写。鉴定签是标本的名片,它是标本的重要文字资料, 具有十分重要的应用价值,因此要求鉴定者具有十分坚实的专业知识,还要十分重视这项工作, 切忌盲目从事。鉴定签的书写要十分流利规范,不要涂改,不要撕去前人的签子,以视尊重。 鉴定签的内容通常有采集号、学名、鉴定者、鉴定日期等:副签的内容通常和野外记录本的 内容格式相同,仅尺寸小一些。其格式如下: 幸鉴定签格式: 采集号: 鉴定人: 鉴定日期 幸号牌格式: 。采集人: 采集号: 采集地: 采集日期: 幸副签及采集记录本格式: 采集人: 采集号: 采集地: 采集日期: 海拔: 生境: 习性 高度
@泰山医学院 省级精整鞋程申报 根: 茎 叶: 衣 果实 种子: 地方名: 药名: 植物名: 科属名: 拉丁学名: 用逸: 备注: ②标本的鉴定:这是一项艰苦细致科学性极强的工作,鉴定者首先要具备扎实的植物分类学 和植物形态学知识,并要具备雄厚的专业工作经验。工作中要克服浮躁和急于求成的心理以 及懒惰思想,科学认真地观察标本、认真细致地研究标本,还要充分地利用好资料,才有可 能做好它 二.生药鉴定部分 1生药的性状鉴定技术:就是通常利用人的感官通过看、摸、闻(嗅)、尝、水试、火试等 方法对生药的性状即大小、形状、粗细、表面特征、断面、质地、气、味等进行观察鉴定,以 达到确定其真伪优劣的目的。性状鉴定又称为经验鉴定,顾名思义,就是经验积崇的东西是十 分重要的,这种积累不是一朝一夕就能实现的,它是一个十分漫长的过程,这中间需要首先建 立浓厚的专业兴趣,刻苫努力、勤学好问、主动钻研,还要不断吸收相关学科的基础理论知识, 只有这样,才有可能做好这项工作。但也不能气馁,要有信心和决心,只要坚定不移地做下去 是一定会成功的。看:就是用眼睛看药材的大小、长短、粗细、形状、颜色、表面特征、断面 特征等。例如:甘草为“细长圆柱形,长30一120厘米,直径0.6一3厘米。外皮红棕色、暗棕 色或灰褐色,有明显的皱纹、沟纹等纹理,皮孔横长,断面纤维性,黄白色,有明显的环纹及 放射状纹理,有裂隙:根茎表面有节和节间,节上有芽痕,横断面中央有髓等,都是“看的内 容:“质坚实而重”,是“摸”的内容:气微是“闻”的内容;味甜而特殊”是“尝”的内容等。又如: 熊胆的水试法是,胆仁少许于水杯中,即在水面上转旋下沉扯黄线,到达杯底而不扩散者为真。 沉香燃烧时发浓烟及强烈香气,并有黑色油状物渗出者为真。 2.生药的显微鉴定技术:
@泰山医学院 省级精藁程申报 (一)制片方法:首先要根据显微观察的不同目的制作不同的制片,例如要: ①观察组织构造:通常使用的切片方法有: 徒手切片法:通常将选择好的材料两端切齐,以左手持材料,右手持刀片,从左前向右后水平 切割材料(切片时随时以水湿润刀口),将切片以毛笔扫入盛水的平皿中,然后从切片中挑选 较好者制片,以备显微观察。此法适合较幼嫩的地下器官、嫩茎、较粗的叶柄、较幼嫩的果实 种子等器官。也可用两片双面刀片并齐,在桌面上或硬的支撑物上下切,可获得薄厚理想的切 片(适合薄的材料,如叶片、花的各部等)。 滑走切片法:利用滑走切片机代替徒手切片的一种方法。适合较坚硬、较粗大的材料。通常将 选择好的材料固定于切片机上,调整好厚薄(0一50微米)就可以切片。同样将切片置于水中 挑选较薄的进行制片观察。 石蜡制片法(方法见附页): ②观察表面特征:有些幼嫩的器官其表面具有丰富的显微特征,由于横切片角度的关系,其表 面的特征观察不全血,因此,可以通过表血片进行观察,效果就比较理想。表面片的制法:将 选择好的材料平铺于桌面上,以尖镊子撕取表皮,将撕下的组织置于滴上水的载物片上封片观 察。也可将毛茸以刀片刮下直接装片观察。通常适合于幼嫩的果实、种子、茎、叶、花冠、花 尊等器官或部位。 ③组织解离法:为了观察植物组织中单个细胞的特征,通常使用组织解离(或叫细胞离体)法 进行处理,就可以达到目的。通常使用的方法有: 氢氧化钾(钠)法:材料(柔软)+5%KOH或NaOH一(水浴加热)轻压即散一封片。 硝铬酸法(常用):10%硝酸+10%铬酸等量混合→材料(浸泡)1-2天或更长。 浓硝酸氯酸钾法(较使的材料):材料+硝酸→沸水加热1mi→加氯酸钾一加热→材料成粉状一 冲洗一→制片一→观察。 ④粉末观察法:.水装片:观絮淀粉粒,油滴,油细胞等:b甘油装片:观察糊粉粒(可加稀碘 液使成黄棕色或棕色,如硝酸汞试液显砖红色)。C水合氯醛装片:方法:粉末+试剂→加热搅 动使颜色变浅一加甘油封藏观察。(不要加热迅速观察菊糖结晶。) (二)显微测量方法:为了客观描述显微特征的性状(长短、直径、厚薄等)须通过显微测量 的方法才能实现。 1.测微尺的介绍:①目镜量尺:是一直径约为2cm的圆形玻片,中央有一精细刻度尺,共有 100小格,总长1mm,是进行显微测量的重要标尺,但不能直接测量,(因为在标化前,每小格 微米数不定),使用前要用载台量尺(台尺)进行标化(校正),计算出目镜每一小格的微米数 然后才能测量
网泰山医学院 省级清款黄银申报 ②载台量尺(台尺):为一载玻片大小的长条形玻片,中央有一小圆形玻片,其下有一精细的刻 度尺(长为1毫米),等分为100小格,每格长为0.01毫米或10微米,共长1000微米。该尺 不能直接用来进行显微测量,仅用作标化目尺。 2.目尺的标化:通常选用单筒(直筒)、使用状况良好的显微镜,取下接目镜,旋开镜头,装 入目镜测微尺,镜台上安装载台量尺,先用低倍镜调焦,待视野中同时出现台尺的标尺和目尺 的标尺时,开始寻找两尺的最佳重合起始线(一定要完全重合),然后再寻找出远端的重合线(相 对较远者为好),精确计数两尺的刻度数,即目尺的多少小格与台尺的多少小格相当,然后以台 尺的格数乘以每小格的微米数,即得重合格数的微米数,再用重合格数的微米数除以目尺的重 合格数,即得目尺(低倍镜下)每小格的实际长度(微米数)。其它倍数的接目镜、接物镜在使 用中若需变换,则事先同样先标化,标化值须记录清楚。 3.显微测量:在进行实物测量时,取下载台量尺,换上标本制片,只需测其小格数,并做好记 录,然后乘以标化值,即为该物实际大小。示例:如何标化: 接目镜10倍,接物镜40倍。测得目尺的40小格与台尺的15小格相当(完全重合),则:10 微米×15小格(台尺)40小格(日尺)=3.75微米。 (三)叶显微常数及其测量: 1.气孔数(Stomatal Number):指每mm表皮上的气孔数。测量时,先用描绘器在白纸上画 下1mm的方框,将透化好的下表皮装片一定部位与方框重合,计算该框内气孔个数(用×表示), 一般连续测量10一30个单元,求其平均值。通常分别测上下表皮气孔数的比值有鉴别意义。 2.气孔指数(Stomatal Index):指单位面积(一个视野)表皮内气孔数与表皮细胞数(含气 孔数)的比值, 利用网格测微尺或计算一个视野里表皮细胞数和气孔数,带入下列公式计算: I=SS+E×100 =气孔指数S=每单位面积内气孔数E=每单位面积内表皮细胞数 例:颠茄叶气孔指数的计算:目镜15×,物镜40×。连续测得4个视野,其气孔数与表皮细 胞数如下:视野a.4个、8个,视野b.5个、9个,视野c.4个、11个,视野d.3个、9个。计 算:1-4/4+9.25×100=303 3.脉岛束(Vein islet)和脉岛数(Nein-islet Number):指叶脉末端游离的叶肉组织小块,叫脉 岛束(脉岛)。每mm面积内脉岛的数目叫脉岛数。 取叶中部(含主脉)叶片,透化或整体装片(以绿化碱漂白)。在准各好的白纸上画出显微 量尺4mm'(2×2mm'或1×4mmr)方框,用描绘器反射到显微镜下与叶片重合,计算在方框内的脉 岛数。(凡位于方框四周被边线切割成不完全的脉岛,只计算两个边的数目,另两边的不计。连