(3)选择性变性法 利用蛋白质稳定性的不同,除去杂蛋白。 甚至可用25%三氯乙酸处理 (4)核酸沉淀剂法 用核酸酶,将核酸降解成核苷酸,使粘度下降便 于离心分离。 用核酸沉淀剂如三甲基十六烷基溴化铵、硫酸链 霉素、聚乙烯亚胺、鱼精蛋白和二氯化锰等。 (5)将酶与底物结合 酶和底物结合或竞争性抑制剂结合后,热稳定性 大大提高,这样就可用加热法除去杂蛋白
(3)选择性变性法 利用蛋白质稳定性的不同,除去杂蛋白。 甚至可用2.5%三氯乙酸处理。 (4)核酸沉淀剂法 用核酸酶,将核酸降解成核苷酸,使粘度下降便 于离心分离。 用核酸沉淀剂如三甲基十六烷基溴化铵、硫酸链 霉素、聚乙烯亚胺、鱼精蛋白和二氯化锰等。 (5)将酶与底物结合 酶和底物结合或竞争性抑制剂结合后,热稳定性 大大提高,这样就可用加热法除去杂蛋白
(二)脱盐和浓缩 1、脱盐 脱盐方法是透析和凝胶过滤。 2、浓缩 酶的浓缩方法很多,有冷冻干燥、离子交换、超滤 凝胶吸水、聚乙二醇吸水等 (三)酶的结晶 把酶提纯到一定纯度以后(通常纯度应达50%以 上),可使其结晶,酶的纯度经常有一定程度的提高 为研究蛋白质空间结构提供X射线衍射样品
(二)脱盐和浓缩 1、脱盐 脱盐方法是透析和凝胶过滤。 2、浓缩 酶的浓缩方法很多,有冷冻干燥、离子交换、超滤、 凝胶吸水、聚乙二醇吸水等。 (三)酶的结晶 把酶提纯到一定纯度以后(通常纯度应达50%以 上),可使其结晶,酶的纯度经常有一定程度的提高。 为研究蛋白质空间结构提供X射线衍射样品