Chromosome (part Chromatin Histone DNA around proten Nucleosomes SuperColed DNA DNA Ftom DNA to Chromosome and beck
DNA是染色体的核心部分。DNA和RNA统称核酸。核酸的理化特性包括: 稳定性、酸效应、碱效应、化学变性、热变性、紫外线吸收性、减色性复性、 黏性、浮力梯度等。 1) DNA的变性和复性 变性(Denaturation) DNA双链的氢键断裂,最后完全变成单链的过程称为变性。 增色效应(Hyperchromatic effect) 在变性过程中,260nm紫外线吸收值先缓慢上升,当达到某一温度时骤然上 升,称为增色效应。 融解温度(Melting temperature,Tm ) 变性过程紫外线吸收值增加的中点称为融解温度。生理条件下为85~95OC影 响因素:G+C含量,pH值,离子强度,尿素,甲酰胺等 2.1.2.2. DNA
DNA是染色体的核心部分。DNA和RNA统称核酸。核酸的理化特性包括: 稳定性、酸效应、碱效应、化学变性、热变性、紫外线吸收性、减色性复性、 黏性、浮力梯度等。 1) DNA的变性和复性 变性(Denaturation) DNA双链的氢键断裂,最后完全变成单链的过程称为变性。 增色效应(Hyperchromatic effect) 在变性过程中,260nm紫外线吸收值先缓慢上升,当达到某一温度时骤然上 升,称为增色效应。 融解温度(Melting temperature,Tm ) 变性过程紫外线吸收值增加的中点称为融解温度。生理条件下为85~95OC影 响因素:G+C含量,pH值,离子强度,尿素,甲酰胺等 2.1.2.2. DNA
10 包含较少的(G+C) 2609冒处的吸光率 两种不同 G-C含量的 包含较多的(G+C) DNA分子加 温时吸光率 变化的对比 Tm =77C To-83C 0 70 75 80 8590 温度
复性(Renaturation) 热变性的DNA缓慢冷却,单链恢复成双链。复性出现减色效应 (Hypochromatic effect)。复性的速率与DNA的浓度和序列的 复杂性有关。 Cot1/2 变性和复性是可逆的。以Co代表完全变性的DNA单链的起始 浓度,在时间t时的浓度变化是: dC/dt = kCo2 积分后 C/Co = 1/(1+kCot) k为复性的速度常数。 以C/Co 对Cot作图,得Cot曲线。当C/Co = 0.5, Cot值称为 Cot1/2 。 Cot1/2与k 的关系为 k = 1/ Cot1/2
复性(Renaturation) 热变性的DNA缓慢冷却,单链恢复成双链。复性出现减色效应 (Hypochromatic effect)。复性的速率与DNA的浓度和序列的 复杂性有关。 Cot1/2 变性和复性是可逆的。以Co代表完全变性的DNA单链的起始 浓度,在时间t时的浓度变化是: dC/dt = kCo2 积分后 C/Co = 1/(1+kCot) k为复性的速度常数。 以C/Co 对Cot作图,得Cot曲线。当C/Co = 0.5, Cot值称为 Cot1/2 。 Cot1/2与k 的关系为 k = 1/ Cot1/2
三类不同来源 DNA复性率的 比较,三个基因 组由左至右依 次增大 复性百分率的对数 50 T4 S2噬菌体 噬菌体 大肠杆萄 100 104 102 110102103104 Cot(摩尔*秒)/升