第三章 第一节 一、（四）操作步骤 2、样品的测定（单向展开法） （1） 薄层板的制备 称取约3g硅胶G，加入相当于硅胶量2－ 3倍左右的水，用力研磨1－2min至成糊状后 立即倒入涂布器内，推成5×20cm，厚度约 0.25mm的簿层板三块。在空气中干燥大约 15min后，放入100℃烘箱内活化2h，取出在 干燥器中保存。一般可保存2－3d，若放置时 间较长，可再进行干燥活化后使用
第三章 第一节 一、（四）操作步骤 2、样品的测定（单向展开法） （1） 薄层板的制备 称取约3g硅胶G，加入相当于硅胶量2－ 3倍左右的水，用力研磨1－2min至成糊状后 立即倒入涂布器内，推成5×20cm，厚度约 0.25mm的簿层板三块。在空气中干燥大约 15min后，放入100℃烘箱内活化2h，取出在 干燥器中保存。一般可保存2－3d，若放置时 间较长，可再进行干燥活化后使用
第三章 第一节 一、（四）操作步骤 2、样品的测定（单向展开法） （2）点 样 将簿层板边缘附着的吸附剂刮净，在距薄层板下端3cm处 做一个基线，然后在基线上用微量注射器滴加样液。一块板可 滴加4个点，点距边缘和点间距约为1cm，点直径约为3mm。要 求在同一块板上滴加点的大小应一致，可用吹风机冷风边吹边 加。滴加的样点如下： 第一点：10μl、0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第二点：20μl样品溶液。 第三点：20μl样液＋10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第四点：20μl样液＋10μl 0.2μg/mlAFTB1标准使用液
第三章 第一节 一、（四）操作步骤 2、样品的测定（单向展开法） （2）点 样 将簿层板边缘附着的吸附剂刮净，在距薄层板下端3cm处 做一个基线，然后在基线上用微量注射器滴加样液。一块板可 滴加4个点，点距边缘和点间距约为1cm，点直径约为3mm。要 求在同一块板上滴加点的大小应一致，可用吹风机冷风边吹边 加。滴加的样点如下： 第一点：10μl、0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第二点：20μl样品溶液。 第三点：20μl样液＋10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第四点：20μl样液＋10μl 0.2μg/mlAFTB1标准使用液
第三章 第一节 一、（四）操作步骤 2、样品的测定（单向展开法） （3）展开与观察 加入10ml无水乙醚于展开槽内，预展12cm，取出挥干。 再于另一展开槽内加入10ml丙酮：三氯甲烷（8：92）溶剂， 展开10－12cm，取出在紫外光下观察结果，方法如下： ①第一点滴加10μlAFTB1标准使用液，其中含 AFTB10.04μg/ml（最低检出量5μg/kg）。可作为检验薄层 板好坏及色谱是否合适，能检出最低检出量。如果展开后此 点无荧光，则说明薄层板或色谱条件存在问题
第三章 第一节 一、（四）操作步骤 2、样品的测定（单向展开法） （3）展开与观察 加入10ml无水乙醚于展开槽内，预展12cm，取出挥干。 再于另一展开槽内加入10ml丙酮：三氯甲烷（8：92）溶剂， 展开10－12cm，取出在紫外光下观察结果，方法如下： ①第一点滴加10μlAFTB1标准使用液，其中含 AFTB10.04μg/ml（最低检出量5μg/kg）。可作为检验薄层 板好坏及色谱是否合适，能检出最低检出量。如果展开后此 点无荧光，则说明薄层板或色谱条件存在问题
第三章 第一节 一、（四）操作步骤 2．样品的测定（单向展开法） （3）展开与观察 ②第三点和第四点上滴加了样液和AFTB1标准液，可 使样液中的AFTB1荧光点和标液AFTB1荧光点重叠。加 以认证。 第三点是用来检验最低检出量在样液中是否能正常呈 现，如果第一点呈阳性，第三点呈阴性则说明样品的提取 存在问题，可能存在荧光猝灭剂，应重新提取。 第四点主要是起定位作用。AFTB1的Rf值约0.6。 ③第二点起判断作用。如果第二点（样液）在AFTB1 标准点的相应位置（Rf≈0.6）处呈阴性，而其它各点均呈 阳性，则说明样品中AFBT1的含量在5μg/kg（最低检出量） 以下，如果第二点在其相应位置上呈阳性，则需进行确证 试验
第三章 第一节 一、（四）操作步骤 2．样品的测定（单向展开法） （3）展开与观察 ②第三点和第四点上滴加了样液和AFTB1标准液，可 使样液中的AFTB1荧光点和标液AFTB1荧光点重叠。加 以认证。 第三点是用来检验最低检出量在样液中是否能正常呈 现，如果第一点呈阳性，第三点呈阴性则说明样品的提取 存在问题，可能存在荧光猝灭剂，应重新提取。 第四点主要是起定位作用。AFTB1的Rf值约0.6。 ③第二点起判断作用。如果第二点（样液）在AFTB1 标准点的相应位置（Rf≈0.6）处呈阴性，而其它各点均呈 阳性，则说明样品中AFBT1的含量在5μg/kg（最低检出量） 以下，如果第二点在其相应位置上呈阳性，则需进行确证 试验
第三章 第一节 一、（四）操作步骤 2、样品的测定（单向展开法） （4）确证试验 为了证明在薄层板上样液呈现的荧光确系由AFTB1产生的，则在样 点上滴加三氟乙酸，产生AFTB1的衍生物，继续展开后，此衍生物的Rf 值约为0.1左右。方法如下： 依次在薄层板左边滴加两个点： 第一点：10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第二点：20μl样液。 在以上两点处各加一小滴三氟乙酸盖于其上，经反应5min后，用电 吹风机吹热风2min，热风吹到薄层板上的温度不得高于40℃，再于薄板 右边滴加以下两点。 第三点：10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第四点：20μl样液。 同前展开后，在紫外光下观察样液是否产生与AFTB1标准点相同的 衍生物。第三点和第四点，可作为样液与标准衍生物的空白对照
第三章 第一节 一、（四）操作步骤 2、样品的测定（单向展开法） （4）确证试验 为了证明在薄层板上样液呈现的荧光确系由AFTB1产生的，则在样 点上滴加三氟乙酸，产生AFTB1的衍生物，继续展开后，此衍生物的Rf 值约为0.1左右。方法如下： 依次在薄层板左边滴加两个点： 第一点：10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第二点：20μl样液。 在以上两点处各加一小滴三氟乙酸盖于其上，经反应5min后，用电 吹风机吹热风2min，热风吹到薄层板上的温度不得高于40℃，再于薄板 右边滴加以下两点。 第三点：10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第四点：20μl样液。 同前展开后，在紫外光下观察样液是否产生与AFTB1标准点相同的 衍生物。第三点和第四点，可作为样液与标准衍生物的空白对照