(2)差异显示技术 在转录水平上研究基因表达差异的方法。它通过一系列的 锚定引物与随机引物组合,把不同种细胞(如正常和转化细胞) 的mRNA进行分组反转录,用PCR方法扩增cDNA,用序列凝胶 电泳法显示出扩增结果,比较正常的和异常的cDNA带,从而找 出差异表达的基因。 该技术最大的优点表现在能使细胞的每一条mRNA均有扩 增的机会,故可同时检测并展示所有基因的差异表达;并能同
（2）差异显示技术 在转录水平上研究基因表达差异的方法。它通过一系列的 锚定引物与随机引物组合，把不同种细胞（如正常和转化细胞） 的mRNA进行分组反转录，用PCR方法扩增cDNA，用序列凝胶 电泳法显示出扩增结果，比较正常的和异常的cDNA带，从而找 出差异表达的基因。 该技术最大的优点表现在能使细胞的每一条mRNA均有扩 增的机会，故可同时检测并展示所有基因的差异表达；并能同
时进行多组间样本的分析比较,这是差异杂交和差减杂交所无 法比拟的。其它环境污染物,如粉尘诱导的肺纤维化及癌变的 基因差异显示的研究取得了重大进展。 (3)单细胞凝胶电泳技术 单细胞凝胶电泳又称彗星电泳,是一种有核单细胞DNA损 伤的快速检测方法。该技术基于有核细胞的DNA分子量很大 DNA詔超螺旋结构附着在核基质中,用琼脂糖凝胶将细胞包埋在 载瓌片上,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜及其它生物膜
时进行多组间样本的分析比较，这是差异杂交和差减杂交所无 法比拟的。其它环境污染物，如粉尘诱导的肺纤维化及癌变的 基因差异显示的研究取得了重大进展。 （3）单细胞凝胶电泳技术 单细胞凝胶电泳又称彗星电泳，是一种有核单细胞DNA损 伤的快速检测方法。该技术基于有核细胞的DNA分子量很大， DNA超螺旋结构附着在核基质中，用琼脂糖凝胶将细胞包埋在 载玻片上，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜及其它生物膜
破坏,使细胞內的RNA、蛋白质及其它成分进入凝胶,继而扩 散到裂解液中,惟独核DNA仍保持缠绕的环区附着在剩余的核 骨架上,并留在原位。如果细胞未受损伤,电泳中核DNA因其 分子量大而停留在核基质中,经荧光染色后呈现圆形的荧光团 无拖尾现象。若细胞受损,在碱性电泳液(pH>13)中,先 是DNA双链解螺旋且碱变性为单链,单链断裂的碎片分子量小 即可进入凝胶中,在电泳时断链或碎片离开核DNA向阳极迁移 形成拖尾
破坏，使细胞内的RNA、蛋白质及其它成分进入凝胶，继而扩 散到裂解液中，惟独核DNA仍保持缠绕的环区附着在剩余的核 骨架上，并留在原位。如果细胞未受损伤，电泳中核DNA因其 分子量大而停留在核基质中，经荧光染色后呈现圆形的荧光团， 无拖尾现象。若细胞受损，在碱性电泳液（pH > 13）中，先 是DNA双链解螺旋且碱变性为单链，单链断裂的碎片分子量小 即可进入凝胶中，在电泳时断链或碎片离开核DNA向阳极迁移， 形成拖尾
细胞核DNA受损愈重,产生的断链或碱易变性断片就愈多, 其断链或断片也就愈小,在电场作用下迁移的DNA量多,迂移 的距离长,表现为尾长增加和尾部荧光强度增强。因此,通过 测定DNA迁移部分的光密度或迁移长度就可定量测定单个细胞 DNA损伤程度。该方法快速、灵敏、简便、低耗和重复性好, 已被广泛用于体内或体外各种有核细胞经受试物诱导的DNA损 伤和修复的研究
细胞核DNA受损愈重，产生的断链或碱易变性断片就愈多， 其断链或断片也就愈小，在电场作用下迁移的DNA量多，迁移 的距离长，表现为尾长增加和尾部荧光强度增强。因此，通过 测定DNA迁移部分的光密度或迁移长度就可定量测定单个细胞 DNA损伤程度。该方法快速、灵敏、简便、低耗和重复性好， 已被广泛用于体内或体外各种有核细胞经受试物诱导的DNA损 伤和修复的研究
(4)荧光原位杂交技术 在1980s发展起来的一种高灵敏高特异性、高分辨率的 染色体和基因分析技术。它将DNA探针用生物素、毛地黄毒苷 等荧光染料标记,然后将标记的探针直接原位杂交到染色体或 DNA纤维切片上,再用与荧光素分子耦联的单克隆抗体与探针 分子特异结合检测DNA序列在染色体或DNA纤维上的定位 该方法实验周期短,检测灵敏度高,并且由于它可以用不 同修饰核苷酸分孑标记不同的DNA探针,再用不同的荧光素分
（4）荧光原位杂交技术 在1980s’发展起来的一种高灵敏、高特异性、高分辨率的 染色体和基因分析技术。它将DNA探针用生物素、毛地黄毒苷 等荧光染料标记，然后将标记的探针直接原位杂交到染色体或 DNA纤维切片上，再用与荧光素分子耦联的单克隆抗体与探针 分子特异结合检测DNA序列在染色体或 DNA纤维上的定位。 该方法实验周期短，检测灵敏度高，并且由于它可以用不 同修饰核苷酸分子标记不同的DNA探针，再用不同的荧光素分