子检测不同的探针分子,因此可以在荧光显微镜下,在同一张 切片上同时观察几种DNA探针的定位,直接得到它们的相关位 置和顺序。 (5)穿梭质粒 类既可在哺乳动物细胞中复制,又可在细菌细胞內增殖 的特殊复合型质粒。它将携带 Supf tRNa基因的穿梭质粒PZl89 转染受致突变剂处理的哺乳细胞,复制后再转化宿主菌,于含 ga和IPTG的琼脂平板上进行筛选,含有突变靶基因的克隆受
子检测不同的探针分子,因此可以在荧光显微镜下,在同一张 切片上同时观察几种DNA探针的定位,直接得到它们的相关位 置和顺序。 (5)穿梭质粒 一类既可在哺乳动物细胞中复制,又可在细菌细胞内增殖 的特殊复合型质粒。它将携带SupF tRNA基因的穿梭质粒PZl 89 转染受致突变剂处理的哺乳细胞,复制后再转化宿主菌,于含 X-gal和IPTG的琼脂平板上进行筛选,含有突变靶基因的克隆受
诱变剂作用失活而呈白色,正常菌落为蓝色 穿梭质粒被广泛应用于硏究放射线、重金属、环境致癌物 环境诱变剂等引起的基因突变。另外,与pZ89属同一系列的 穿梭质粒pSl89也被广泛应用于突变及诱变的检测。 (6)转基因技术 包括转基因动物和转基因细胞。 转基因动物是用实验方法,把外源基因导入到动物体内, 这种外源基因与动物本身的染色体整合,外源基因就能随细胞
诱变剂作用失活而呈白色,正常菌落为蓝色。 穿梭质粒被广泛应用于研究放射线、重金属、环境致癌物、 环境诱变剂等引起的基因突变。另外,与pZl 89属同一系列的 穿梭质粒pSl 89也被广泛应用于突变及诱变的检测。 (6)转基因技术 包括转基因动物和转基因细胞。 转基因动物是用实验方法,把外源基因导入到动物体内, 这种外源基因与动物本身的染色体整合,外源基因就能随细胞
的分裂而增殖,在体內得到表达,并传给后代。运用转基因动 物研究毒物致突变和产生缺陷的机理,既可观察慢性低剂量接 触时的DNA损伤,又可从整体水平上把握不同器官突变的组织 特异性,并在同一动物体上实现多种突变终点的比较研究 转基因细胞的外源基因载体是细胞,其原理和过程类似转 基因动物。国外Muta小鼠、 Big blue大鼠和 Xenomouse小 鼠作为用于突变检测的转基因动物已投入商品化生产,转基因 小鼠的致突变试验有可能取代长达2年的动物致癌试验
的分裂而增殖,在体内得到表达,并传给后代。运用转基因动 物研究毒物致突变和产生缺陷的机理,既可观察慢性低剂量接 触时的DNA损伤,又可从整体水平上把握不同器官突变的组织 特异性,并在同一动物体上实现多种突变终点的比较研究。 转基因细胞的外源基因载体是细胞,其原理和过程类似转 基因动物。国外MutaTM小鼠、Big BlueTM大鼠和Xenomouse小 鼠作为用于突变检测的转基因动物已投入商品化生产,转基因 小鼠的致突变试验有可能取代长达2年的动物致癌试验
(7)流式细胞仪 在功能水平上对单细胞或其它生物粒子进行定量分析和分 选的检测手段。它将待测细胞染色后制成单细胞悬液,压入流 动室,使待测细胞在鞘液的包被下单行排列,依次通过检测区 城。经聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色 的细胞会激发荧光,荧光信号的强度代表细胞核内物质的浓度; 同时通过流动室喷口上的超高频电晶体实现细胞的分离。 该技术可高速分析上万个细胞,还具有多功能特点,可以 分析单个活细胞在细胞水平与分子水平的变化,同时从一个细 胞中测得多个参数
(7)流式细胞仪 在功能水平上对单细胞或其它生物粒子进行定量分析和分 选的检测手段。它将待测细胞染色后制成单细胞悬液,压入流 动室,使待测细胞在鞘液的包被下单行排列,依次通过检测区 域。经聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色 的细胞会激发荧光,荧光信号的强度代表细胞核内物质的浓度; 同时通过流动室喷口上的超高频电晶体实现细胞的分离。 该技术可高速分析上万个细胞,还具有多功能特点,可以 分析单个活细胞在细胞水平与分子水平的变化,同时从一个细 胞中测得多个参数
3.今后研究展望 借鉴毒理学研究的成果和进展,本着研究任务来源于实际、 研究成果又指导实际的原则,今后在环境化学领域的分子生态 毒理学研究,应加强以下几方面的科学攻关。 (1)毒物低剂量暴露的生态效应与分子机制 化学污染物的低水平、长期、慢性暴露是各种毒物对生态 系统影响的基本方式。因为时间长,剂量不明显,容易忽略, 且各种混杂因素大量存在,难以准确认定是何种效应,成为目 前研究的薄弱环节,今后应该加强有关硏究
3. 今后研究展望 借鉴毒理学研究的成果和进展,本着研究任务来源于实际、 研究成果又指导实际的原则,今后在环境化学领域的分子生态 毒理学研究,应加强以下几方面的科学攻关。 (1)毒物低剂量暴露的生态效应与分子机制 化学污染物的低水平、长期、慢性暴露是各种毒物对生态 系统影响的基本方式。因为时间长,剂量不明显,容易忽略, 且各种混杂因素大量存在,难以准确认定是何种效应,成为目 前研究的薄弱环节,今后应该加强有关研究