(三)血细胞计数 1.制备红细胞悬液 取1m1血液,用0.9%NaCl溶液稀释适当倍数制成细胞悬液。 2.加样 取一付擦拭干净的血球计数槽,将盖玻片盖在计数槽上(光洁透亮的 区域)。用吸管将制备好的红细胞悬液泥匀,吸管头紧挨盖玻片边缘。滴1 滴悬液于血球计数板的斜坡和盖玻片之间的缝隙中,使之自然渗入到计数槽 内。细胞悬液不可滴得过多,如果溢出槽外或计数槽内有气泡则需擦干血球 计数板重新再做。 钟
(三) 血细胞计数 1.制备红细胞悬液 取1m1血液,用0.9%NaCl溶液稀释适当倍数制成细胞悬液。 2.加样 取一付擦拭干净的血球计数槽,将盖玻片盖在计数槽上(光洁透亮的 区域)。用吸管将制备好的红细胞悬液泥匀,吸管头紧挨盖玻片边缘。滴1 滴悬液于血球计数板的斜坡和盖玻片之间的缝隙中,使之自然渗入到计数槽 内。细胞悬液不可滴得过多,如果溢出槽外或计数槽内有气泡则需擦干血球 计数板重新再做
3.计数 在低倍镜下调暗光线,观察血球计数槽上的格纹,共由9个大格组成, 计数4个角上的4大格内的细胞数。每个大格分别由16小格组成,注意顺小格 依次计数。压线的细胞遵循“数上不数下,数左不数右”的原则,以免重复 计数或漏数。 4.计算按以下公式可计算出每毫升红细胞悬液中所含细胞数: 四大格中细胞总数 ×10000=细胞数/毫升细胞悬液
3.计数 在低倍镜下调暗光线,观察血球计数槽上的格纹,共由9个大格组成, 计数4个角上的4大格内的细胞数。每个大格分别由16小格组成,注意顺小格 依次计数。压线的细胞遵循“数上不数下,数左不数右”的原则,以免重复 计数或漏数。 4. 计算 按以下公式可计算出每毫升红细胞悬液中所含细胞数: 四大格中细胞总数 4 × 10000 = 细胞数/毫升细胞悬液
三、作业 绘制血细胞图。 四、思考题 1.光镜下,如何鉴别三种有粒白细胞及两种无粒白细胞? 2.进行血细胞计数要注意什么?
三、作业 绘制血细胞图。 四、思考题 1.光镜下,如何鉴别三种有粒白细胞及两种无粒白细胞? 2.进行血细胞计数要注意什么?
第三节血液检查 一、血红蛋白测定 血红蛋白测定的方法较多,常用的有比色法、比重法、测铁法、电 子测定法。目前,我国应用国际血液学标准化委员会推荐的氰化高铁血 红蛋白测定法为血红蛋白的参考方法。部分基层单位仍用酸化血红素比 色法。 (一)氰化高铁血红蛋白测定法 1.原理血红蛋白被高铁氰化钾氯化为高铁血红蛋白,再与氰结合成 稳定的棕红色氮化高铁血红蛋白,在规定的波长相液层厚度的条件下, 具有一定的吸光系数,根据吸光度,即可求得血红蛋白浓度。正常值: ●男:120~160g/L;●女:110~150g/L:●新生儿:180190g/L
第三节 血液检查 一、血红蛋白测定 血红蛋白测定的方法较多,常用的有比色法、比重法、测铁法、电 子测定法。目前,我国应用国际血液学标准化委员会推荐的氰化高铁血 红蛋白测定法为血红蛋白的参考方法。部分基层单位仍用酸化血红素比 色法。 (一)氰化高铁血红蛋白测定法 1.原理 血红蛋白被高铁氰化钾氯化为高铁血红蛋白,再与氰结合成 稳定的棕红色氮化高铁血红蛋白,在规定的波长相液层厚度的条件下, 具有一定的吸光系数,根据吸光度,即可求得血红蛋白浓度。正常值: ●男:120~160g/L;●女:110~150g/L;●新生儿:180~190g/L
2.方法 取转化液(氰化钾0.05g,高铁氰化钾0.2g,无水磷酸二氢钾0.14g, Triton X-1001ml,蒸馏水加至1000ml)5ml,置于试管内。加末捎血20ul, 混匀后静置5min。以校正过波长和灵敏度的分光光度计,波长540nm,光 径1.00cm比色杯,转化液为空白,测定吸光度(A)。 计算: 血红蛋白g/L=A×367.7
2.方法 取转化液(氰化钾0.05g,高铁氰化钾0.2g,无水磷酸二氢钾0.14g, Triton X-100 1ml,蒸馏水加至1000ml)5m1,置于试管内。加末捎血20ul, 混匀后静置5min。以校正过波长和灵敏度的分光光度计,波长540nm,光 径1.00cm比色杯,转化液为空白,测定吸光度(A)。 计算: 血红蛋白g/L=A×367.7