2.DNA连接酶—“分子缝合针”。 (1)作用：将切下来的双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制 酶切开的 键 。 (2)结果：拼接成新的 分子。 (3)种类。 ①E.coli DNA连接酶：从大肠杆菌中分离得到，只能连接具 有互补 末端的DNA片段。 ②T4DNA连接酶：从T4噬菌体中分离出来，既可以“缝合”双 链DNA片段互补的 末端，又可以“缝合”双链DNA片 段的 末端，但连接平末端的效率相对较
导航 2.DNA连接酶——“分子缝合针” 。 (1)作用:将切下来的双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制 酶切开的 磷酸二酯 键。 (2)结果:拼接成新的 DNA 分子。 (3)种类。 ①E.coli DNA连接酶:从大肠杆菌中分离得到,只能连接具 有互补 黏性 末端的DNA片段。 ②T4 DNA连接酶:从T4噬菌体中分离出来,既可以“缝合”双 链DNA片段互补的 黏性 末端,又可以“缝合”双链DNA片 段的 平 末端,但连接平末端的效率相对较 低
导航 3,基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”。 )作用：将外源基因 受体细胞。 (2)常用载体一质粒。 ①本质：一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或 原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的
导航 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 。 (1)作用:将外源基因 送入 受体细胞。 (2)常用载体——质粒。 ①本质:一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或 原核细胞拟核DNA之外,并具有自我复制能力的 环状双链 DNA分子
导航 ②作为载体的条件：a.有一个至多个 供 外源DNA片段（基因）插入其中；b.进入受体细胞后，能在细胞 中进行自我 ,或整合到受体DNA上，随受体DNA c.常有特殊的 基因，便于重组DNA分 子的筛选。 3)其他载体：噬菌体、动植物病毒等。 微点拨相同的黏性末端不一定来自同一种限制酶的切割，可 能来自不同限制酶的切割
导航 ②作为载体的条件:a.有一个至多个 限制酶切割位点 ,供 外源DNA片段(基因)插入其中;b.进入受体细胞后,能在细胞 中进行自我 复制 ,或整合到受体DNA上,随受体DNA 同步复制 ;c.常有特殊的 标记 基因,便于重组DNA分 子的筛选。 (3)其他载体:噬菌体、动植物病毒等。 微点拨相同的黏性末端不一定来自同一种限制酶的切割,可 能来自不同限制酶的切割
微思考2 1.DNA连接酶和DNA聚合酶的作用部位相同吗？ 提示：相同。两种酶的作用部位都是磷酸二酯键，只是DNA 连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合 酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的DNA片段上，且需要以 一条DNA链为模板。 2.基因工程中需要几种工具，几种工具酶？ 提示：基因工程中需要三种工具，即限制酶、DNA连接酶和 载体。但工具酶只有两种，即限制酶和DNA连接酶
导航 微思考2 1.DNA连接酶和DNA聚合酶的作用部位相同吗? 提示:相同。两种酶的作用部位都是磷酸二酯键,只是DNA 连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,而DNA聚合 酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的DNA片段上,且需要以 一条DNA链为模板。 2.基因工程中需要几种工具,几种工具酶? 提示:基因工程中需要三种工具,即限制酶、DNA连接酶和 载体。但工具酶只有两种,即限制酶和DNA连接酶
导期 微判断 1.限制酶和DNA解旋酶的作用部位相同。(×) 2.DNA连接酶能将两个碱基通过氢键连接起来。(× ) 微训练基因工程中用来修饰、改造生物基因的工具是( A.限制酶和水解酶 B.限制酶和DNA连接酶 C.限制酶和载体 D.DNA连接酶和载体 答案：B
导航 微判断 1.限制酶和DNA解旋酶的作用部位相同。( ) 2.DNA连接酶能将两个碱基通过氢键连接起来。( ) 微训练基因工程中用来修饰、改造生物基因的工具是( ) A.限制酶和水解酶 B.限制酶和DNA连接酶 C.限制酶和载体 D.DNA连接酶和载体 答案:B × ×