RNA的纯度A260/A230·A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、盐（胍盐）等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。·如果RNA样品的A260/280=1-1.5，A260/230=1-1.5，那么污染原因就应该考虑是酚残留。·如果RNA样品的A260/280>=2，A260/230<1，那么污染原因就应该考虑是胍盐残留
RNA的纯度 A260/A230 • A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、盐（胍 盐）等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 。 • 如果RNA样品的A260/280=1-1.5, A260/230=1-1.5，那 么污染原因就应该考虑是酚残留。 • 如果RNA样品的A260/280>=2，A260/230<1，那么污 染原因就应该考虑是胍盐残留
RNA的浓度测定1、测定：49.5ul+2.5ml双蒸水稀释后，紫外分光光度法测A260、A280、A230值2、计算并分析RNA浓度及纯度A=KLCC=A/KL（ds核酸K=0.02，ss核酸K=0.025,L为1cm）=A260/0.025×稀释倍数
RNA的浓度测定 1 、测定:49.5l+2.5ml双蒸水稀释后，紫外分光光度法测 A260、A280、A230值 2、计算并分析RNA浓度及纯度 A=KLC C=A/KL（ds核酸K=0.02，ss核酸K=0.025,L为1cm） =A260/0.025×稀释倍数
逆转录PCR二实验原理由一条RNA单链转录为互补DNA（cDNA）称作逆转录PCR（Reverse Transcription PCR，RT-PCR），由依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成复制复制转录翻译M逆转录DNARNA蛋白质
二、逆转录PCR——实验原理 由一条RNA单链转录为互补DNA（cDNA）称作逆转录 PCR（Reverse Transcription PCR，RT-PCR），由 依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成
逆转录过程RNA模板逆转录酶RNA指导的DNA聚合酶）杂化双链RNaseH（RNA酶H)CDNA单链DNA（DNA指导的DNA聚合酶）逆转录酶双链cDNA
RNA模板 逆转录酶 （RNA指导的DNA聚合酶） 逆转录酶 （DNA指导的DNA聚合酶） R Nase H （RNA酶 H) RNA 杂化双链 DNA 单链DNA cDNA 双链cDNA 逆转录过程
逆转录PCR的原理组织或细胞→RNA提取AAAAAAA(A)3AAAAAAA(A)22poly(A）尾的mRNAAAAAAAA(A))CDNA合成随机引物oligo(dT)赢特异性引物量AAAAAAA(A))AAAAAAA(A))AAAAAAA(A)-NNN2TTTTTTTTAAAAAAA(A)2AAAAAAA(A)2GSPAAAAAAA(A)N.NNTTTTTTTTAAAAAAA(A))AAAAAAA(A)IAAAAAAA(A)NA-NTNTTTTTTTTPCR扩增
逆转录PCR的原理