般微生物细胞内都具有光复活酶, 所以,微生物紫外线诱变育种应在避光 或红光条件下操作。但因为在高剂量紫 外线诱变处理后,细胞的光复活主要是 致死效应的回复,突变效应不回复,所 以,有时也可以采用紫外线和可见光交 替处理,以增加菌体的突变率;光复活 的程度与可见光照射时间、强度和温度 (45-50℃温度下光复活作用最强)等因素 有关
一般微生物细胞内都具有光复活酶, 所以,微生物紫外线诱变育种应在避光 或红光条件下操作。但因为在高剂量紫 外线诱变处理后,细胞的光复活主要是 致死效应的回复,突变效应不回复,所 以,有时也可以采用紫外线和可见光交 替处理,以增加菌体的突变率;光复活 的程度与可见光照射时间、强度和温度 (45-50℃温度下光复活作用最强)等因素 有关
细胞内还存在另一种修复体系,它不需要光激活,所以称为 暗修复( dark repair)或切除修复作用( excision repair)。它可修 复由紫外线、γ射线和烷化剂等对DNA造成的损伤。 外线 暗修复体系有四种酶参与反 T三 应。首先由核酸内切酶切开 核酸内切酶 聚体的5末端,形成3OH和5P A-A 3 的单链缺口,然后,核酸外切 T= TP OH-5' 酶从5-P到3’-OH方向切除二聚 核酸外切酶 3 体,并扩大缺口,接着,DNA 5 聚合酶以另一条互补链为模板, T=T“!DNA聚合酶 从原有链上暴露的3’OH端起合 成缺失片段,最后,由连接酶 二T一 将新合成链的3OH与原链的5 DNA连接酶 P相连接 5 正常DNA
细胞内还存在另一种修复体系,它不需要光激活,所以称为 暗修复(dark repair)或切除修复作用(excision repair)。它可修 复由紫外线、γ射线和烷化剂等对DNA造成的损伤。 暗修复体系有四种酶参与反 应。首先由核酸内切酶切开二 聚体的5’末端,形成3’-OH和5’-P 的单链缺口,然后,核酸外切 酶从5’-P到3’-OH方向切除二聚 体,并扩大缺口,接着,DNA 聚合酶以另一条互补链为模板, 从原有链上暴露的3’-OH 端起合 成缺失片段,最后,由连接酶 将新合成链的3’-OH与原链的5’- P相连接
光复活作用使胸腺嘧啶二聚体复原 成两个胸腺嘧啶,暗修复则是将胸腺嘧 啶二聚体切除。细胞中还存在另一种在 并不改变胸腺嘧啶二聚体的情况下的修 复系统,即重组修复( recombination repair)。重组修复必须在DNA进行复制 的情况下进行,所以又称为复制后修复 (postreplication repair)
光复活作用使胸腺嘧啶二聚体复原 成两个胸腺嘧啶,暗修复则是将胸腺嘧 啶二聚体切除。细胞中还存在另一种在 并不改变胸腺嘧啶二聚体的情况下的修 复系统,即重组修复(recombination repair)。重组修复必须在DNA进行复制 的情况下进行,所以又称为复制后修复 (postreplication repair)
紫外 二聚体 重组修复中DNA损伤并没 复制 有除去,当进行下一轮复制 35353 时,留在母链上的损伤仍会 (新合成不连缝DNA单链) 给复制带来困难,还需要重 重组 5 组修复来弥补,直到损伤被 切除修复消除。但是,随着 DNA合成酶 复制的进行,若干代后,即 和连接酶修复 使损伤未从母链中除去,而 3535 在后代的细胞群中也已被稀 释,事实上消除了损伤的影 ↓再复制 二聚体仍然 响 图3重组修复过程
重组修复中DNA损伤并没 有除去,当进行下一轮复制 时,留在母链上的损伤仍会 给复制带来困难,还需要重 组修复来弥补,直到损伤被 切除修复消除。但是,随着 复制的进行,若干代后,即 使损伤未从母链中除去,而 在后代的细胞群中也已被稀 释,事实上消除了损伤的影 响。 图3 重组修复过程
2.化学诱变剂 化学诱变剂的种类有许多,但具有高 效诱变作用的并不多,常用的化学诱变剂 根据其作用方式不同分为三种类型。 (1)与核酸碱基化学反应的诱变剂 此类型主要有烷化剂、亚硝酸和羟胺等
2. 化学诱变剂 化学诱变剂的种类有许多,但具有高 效诱变作用的并不多,常用的化学诱变剂 根据其作用方式不同分为三种类型。 (1)与核酸碱基化学反应的诱变剂 此类型主要有烷化剂、亚硝酸和羟胺等