调查研究并充分查阅资料 设计试验方案 确定采样的生态环境 确定特定的增殖条件 橙道培养 确定定性或半定量的快速检测方法 种分离 典型的微生物新种分离筛选过程 原种斜面 确定发酵的基本条件 初筛(快速检测或一菌株1摇瓶培养测定) 复筛(一菌株3^5摇瓶) ↓结合初步的工艺条件 再复筛 较优菌株斜面(3ˆ5菌株 分离微生物新种的具体过程大体 生产性能试验 可分为采样、增殖、纯化和性能 性能鉴定 毒性试验 测定 菌种鉴定 菌种保藏及作为进一步育种的岀发菌株
典型的微生物新种分离筛选过程 分离微生物新种的具体过程大体 可分为采样、增殖、纯化和性能 测定
第三章菌株选育 理想的工业发酵菌种应符合以下要求 (1)遗传性状稳定; (2)生长速度快,不易被噬菌体等污染; (3)目标产物的产量尽可能接近理论转化率; (4)目标产物最好能分泌到胞外,以降低产物抑制并利 于产物分离; (5)尽可能减少产物类似物的产量,以提高目标产物的 产量及利于产物分离; (6)培养基成分简单、来源广、价格低廉; ⑦7)对温度、pH、离子强度、剪切力等环境因素不敏感; (8)对溶氧的要求低,便于培养及降低能耗
第三章 菌株选育 理想的工业发酵菌种应符合以下要求: (1)遗传性状稳定; (2)生长速度快,不易被噬菌体等污染; (3)目标产物的产量尽可能接近理论转化率; (4)目标产物最好能分泌到胞外,以降低产物抑制并利 于产物分离; (5)尽可能减少产物类似物的产量,以提高目标产物的 产量及利于产物分离; (6)培养基成分简单、来源广、价格低廉; (7)对温度、pH、离子强度、剪切力等环境因素不敏感; (8)对溶氧的要求低,便于培养及降低能耗
菌株选育典型流程 出发菌株(砂士管或冷冻管) 小试 ↓原种特性考擦 斜面 或摇瓶培养24h 培养基优化 单孢子悬液 菌悬液 挑出高产菌株 诱变处理 摇瓶复筛 处理前后计数 稀释涂平板 传种斜面 ↓观察单菌落形态 挑选单菌落转种斜面 保藏菌株 对照组比较 摇瓶初筛 挑出高产斜面
菌株选育典型流程 出发菌株(砂土管或冷冻管) 小试 原种特性考擦 斜面 或摇瓶培养24h 培养基优化 单孢子悬液 菌悬液 挑出高产菌株 诱变处理 摇瓶复筛 处理前后计数 稀释涂平板 传种斜面 观察单菌落形态 挑选单菌落转种斜面 保藏菌株 对照组比较 摇瓶初筛 挑出高产斜面
31自然选育 自然选育是指在特定环境下长期处理某一微生物 培养物,同时不断地移种传代,以达到积累和选择合 适的自发突变( spontaneous mutation)体的古老的 育种方法。 自发突变的频率较低,变异程度不大,所以,用 该法培育新菌种的过程十分缓慢。后来发展了诱变育 种、杂交育种、尤其是基因工程等育种技术。 自然选育最为成功的例子是目前被广泛使用的卡 介苗( BCG vaccine)。法国的卡尔密脱( Calmette)和介 林( Guerin)把牛型的结核分枝杆菌接种在牛胆汁、甘 油、马铃薯培养基上,连续传代培养230代,前后经 历13年时间,终于在1923年获得显著减毒的结核杆菌 卡介苗
3.1 自然选育 自然选育是指在特定环境下长期处理某一微生物 培养物,同时不断地移种传代,以达到积累和选择合 适的自发突变(spontaneous mutation)体的古老的 育种方法。 自发突变的频率较低,变异程度不大,所以,用 该法培育新菌种的过程十分缓慢。后来发展了诱变育 种、杂交育种、尤其是基因工程等育种技术。 自然选育最为成功的例子是目前被广泛使用的卡 介苗(BCG vaccine)。法国的卡尔密脱(Calmette)和介 林(Guerin)把牛型的结核分枝杆菌接种在牛胆汁、甘 油、马铃薯培养基上,连续传代培养230代,前后经 历13年时间,终于在1923年获得显著减毒的结核杆菌 ----卡介苗
自然选育的作用: 自然选育在工业生产中可以达 到纯化菌种,防止菌种衰退,稳定 生产,提高产量的目的
自然选育的作用: 自然选育在工业生产中可以达 到纯化菌种,防止菌种衰退,稳定 生产,提高产量的目的