厦门大学：《现代生物实验学》课程教学课件（PPT讲稿）实验九 质粒DNA的制备

实验九 碱变性法小量制备质粒 DNA

实验九 碱变性法小量制备质粒 DNA

一．实验目的及背景  质粒是染色体外的DNA分子，大小可为 1kb到200kb。  大多数来自细菌的质粒是双链、共价闭合 环状的分子，以超螺旋形式存在。它是细 菌内的共生型遗传因子。  其复制和遗传独立于细菌染色体，但复制 和转录依赖于宿主编码的蛋白和酶

一．实验目的及背景  质粒是染色体外的DNA分子，大小可为 1kb到200kb。  大多数来自细菌的质粒是双链、共价闭合 环状的分子，以超螺旋形式存在。它是细 菌内的共生型遗传因子。  其复制和遗传独立于细菌染色体，但复制 和转录依赖于宿主编码的蛋白和酶

质粒特点  质粒能在细菌中垂直遗传并且赋予宿主细胞 一些表型，是比病毒更简单的原始生命。  质粒通过细菌的结合作用，从雄性体转移到 雌性体， 是细菌有性繁殖的性因子.  １９５２年由Lederburg正式命名为质粒

质粒特点  质粒能在细菌中垂直遗传并且赋予宿主细胞 一些表型，是比病毒更简单的原始生命。  质粒通过细菌的结合作用，从雄性体转移到 雌性体， 是细菌有性繁殖的性因子.  １９５２年由Lederburg正式命名为质粒

质粒类型  质粒按复制方式分为两种类型： 松弛型质粒 和 严紧型质粒  1.松弛型质粒 松弛型质粒的复制不需要质粒编码的功 能蛋白，完全依赖于宿主提供的半衰期较长 的酶。即使蛋白质合成受抑制，质粒的复制 依然进行。当抑制蛋白质合成并阻断细菌染 色体复制的氯霉素等抗生素存在时，质粒的 拷贝数可达2000-3000拷贝

质粒类型  质粒按复制方式分为两种类型： 松弛型质粒 和 严紧型质粒  1.松弛型质粒 松弛型质粒的复制不需要质粒编码的功 能蛋白，完全依赖于宿主提供的半衰期较长 的酶。即使蛋白质合成受抑制，质粒的复制 依然进行。当抑制蛋白质合成并阻断细菌染 色体复制的氯霉素等抗生素存在时，质粒的 拷贝数可达2000-3000拷贝

2.严紧型质粒  严紧型质粒复制需要一个质粒编码的蛋白， 质粒的拷贝数不能通过用氯霉素等蛋白合成 抑制剂来增加

2.严紧型质粒  严紧型质粒复制需要一个质粒编码的蛋白， 质粒的拷贝数不能通过用氯霉素等蛋白合成 抑制剂来增加