4、乳酚配制法 石炭酸(结晶)20克,纯乳酸20毫升,甘油40毫升,蒸馏水20毫升。依 次混合。 5、水合氯醛剂配制法 水合氯醛57克,冰醋酸6毫升,蒸馏水加至100毫升。将水合氯醛剂溶于适 量的蒸馏水中,然后加冰醋酸与蒸馏水至100毫升。 6、乳酸水合氯醛配制法水合氯醛0、5克,蒸馏水1毫升,甘油1毫升,纯 乳酸2毫升,冰醋酸2—4滴,40%甲醛0、5毫升。将水合氯醛溶于水后,再依 次加入其他成份。 7、寄生蜂直接封片封固剂 水合氯醛50克,树胶30克,冰醋酸5毫升,甘油1毫升,蒸馏水20—30 毫升。 8、胶片液 取Ⅹ光片或变通照相胶片,用碱水或氢氧化钾溶液浸泡数小时后,将片上 感光膜洗去。后用水冲洗干净晾干,即成透明胶板。胶板可用以制作微小昆虫的 针插标本,又可将胶板切成小块置入瓶内,加工业用香蕉水使溶解成胶片溶液, 可用以封固盖片边缘 9、酒精稀释方法 稀释酒精等溶液,常常直接利用量筒。例如用95%酒精配成浓度达70%的酒 精,其方法如下 将酒精倒入100毫升量筒内,容量达到与需要稀释的百分率数值相等的刻度, 稀释到70%,即倒至70毫升处,再加水到与酒精浓度原有百分率相等的数值处, 如原有浓度为95%即倒至95毫升处。其他浓度的稀释法可依此类推。 2、几种昆虫的制片法 (1)黑尾叶蝉口器玻片标本制作法刺吸式口器的昆虫种类很多,以黑尾叶 蝉为材料,具体步骤如下 ①固定取黑尾叶蝉活虫,用70%酒精杀死,固定。置双筒解剖镜下观察, 用小镊子及解剖针轻轻将头部取下,放入10%氢氧化钾溶液内,浸一天左右,以 使头部透明为限,或加热煮5—10分钟使头部透明,这样可缩短浸渍时间,使虫 体内部软组织溶解,头部几丁质减退。 ②脱水头部透明后,移入玻皿内,用蒸馏水清洗2一3次,然后依次50% 70%、80%、95%、100%酒精中脱水5-10分钟 ③透明经脱水后的标本,用滤纸吸干水分后,用二甲苯透明,如材料在二 甲苯中有混浊现象,说明脱水不好,须再移入无水酒精中脱水5-10分钟,再用 甲苯透明。 ④整姿封盖封盖前应将材料放在玻片中央,然后小心挑出口针,不能挑断, 整理好姿式,再滴上一滴中性树胶,盖上盖玻片封固,作好的玻片,贴上标签。 以上操作的注意事项 ①操作过程应在同一个有盖的小玻璃皿内进行,在更换液体时,用吸管将皿 内液体吸出,再另用吸管吸取其他液体放入皿内,切勿将虫体从一皿移入另一皿 中,以免损坏标本
16 4、乳酚配制法 石炭酸(结晶)20 克,纯乳酸 20 毫升,甘油 40 毫升,蒸馏水 20 毫升。依 次混合。 5、水合氯醛剂配制法 水合氯醛 57 克,冰醋酸 6 毫升,蒸馏水加至 100 毫升。将水合氯醛剂溶于适 量的蒸馏水中,然后加冰醋酸与蒸馏水至 100 毫升。 6、乳酸水合氯醛配制法水合氯醛 0、5 克,蒸馏水 1 毫升,甘油 1 毫升,纯 乳酸 2 毫升,冰醋酸 2—4 滴,40%甲醛 0、5 毫升。将水合氯醛溶于水后,再依 次加入其他成份。 7、寄生蜂直接封片封固剂 水合氯醛 50 克,树胶 30 克,冰醋酸 5 毫升,甘油 1 毫升,蒸馏水 20—30 毫升。 8、胶片液 取 X 光片或变 通照相胶片,用碱水或氢氧化钾溶液浸泡数小时后,将片上 感光膜洗去。后用水冲洗干净晾干,即成透明胶板。胶板可用以制作微小昆虫的 针插标本,又可将胶板切成小块置入瓶内,加工业用香蕉水使溶解成胶片溶液, 可用以封固盖片边缘。 9、酒精稀释方法 稀释酒精等溶液,常常直接利用量筒。例如用 95%酒精配成浓度达 70%的酒 精,其方法如下: 将酒精倒入 100 毫升量筒内,容量达到与需要稀释的百分率数值相等的刻度, 稀释到 70%,即倒至 70 毫升处,再加水到与酒精浓度原有百分率相等的数值处, 如原有浓度为 95%即倒至 95 毫升处。其他浓度的稀释法可依此类推。 2、几种昆虫的制片法 (1)黑尾叶蝉口器玻片标本制作法 刺吸式口器的昆虫种类很多,以黑尾叶 蝉为材料,具体步骤如下: 固定 取黑尾叶蝉活虫,用 70%酒精杀死,固定。置双筒解剖镜下观察, 用小镊子及解剖针轻轻将头部取下,放入 10%氢氧化钾溶液内,浸一天左右,以 使头部透明为限,或加热煮 5—10 分钟使头部透明,这样可缩短浸渍时间,使虫 体内部软组织溶解,头部几丁质减退。 脱水 头部透明后,移入玻皿内,用蒸馏水清洗 2—3 次,然后依次 50%、 70%、80%、95%、100%酒精中脱水 5—10 分钟。 透明 经脱水后的标本,用滤纸吸干水分后,用二甲苯透明,如材料在二 甲苯中有混浊现象,说明脱水不好,须再移入无水酒精中脱水 5—10 分钟,再用 二甲苯透明。 整姿封盖 封盖前应将材料放在玻片中央,然后小心挑出口针,不能挑断, 整理好姿式,再滴上一滴中性树胶,盖上盖玻片封固,作好的玻片,贴上标签。 以上操作的注意事项: 操作过程应在同一个有盖的小玻璃皿内进行,在更换液体时,用吸管将皿 内液体吸出,再另用吸管吸取其他液体放入皿内,切勿将虫体从一皿移入另一皿 中,以免损坏标本
②逐级脱水时,小玻璃皿必须加盖,以避免空气中水分侵入。 ③如制作玻片标本时,因特殊原因不能完成全过程时,材料必须移入70% 酒精中保存,以免材料变脆。 ④制成的玻片放入40℃左右的恒温箱内2-3天,即行干透而成永久性的玻 片标本 (2)蚜虫玻片标本制作法蚜虫种类繁多,体小,在鉴定“种”时需制成玻 片标本,蚜虫玻片标本的制作方法 ①取若干活蚜虫,用70%酒精杀死,然后取出每个蚜虫,用“0”号昆虫针从 胸部腹面后足基部穿孔1-2个,便于清除体内组织。 ②将穿刺后的蚜虫放入10%氢氧化钾溶液内,如有翅蚜,则用水浴加热,以 免翅损坏(无翅蚜虫可直接加热),加热15-20分钟。时间长短以蚜虫大小和除 去组织的难易而定。在加热中必须注意蚜体变化情况,加热到蚜体透明为好,如 不能完全清除体内组织,在透明液内仍能完全透明。或者放在10%氢氧化钾溶液 中浸泡一昼夜,不必加热。 ③煮过的标本,移入盛有蒸馏水的皿内,清洗1-2次后,移入70%酒精内 略加脱水,再迅速依次移入80%、95%、100%酒精中各脱水1-2分钟后,移入 冬青油(或二甲苯)透明。有翅蚜只要在80%酒精中脱水一次即可移入冬青油透 明。 ④在载玻片上滴一滴中性树胶,将透明的标本用挑针移到载玻片上,在解剖 镜下调整姿势。然后轻轻盖上盖玻片,写好标签,再放到40—50℃恒温箱内2-3 天,即行干透而成永久性的玻片标本 (3)介壳虫标本保存与制片介壳虫的保存:绵蚧科、尾蚧科和粉蚧科的介 壳虫,以及蜡蚧科和红蚧科的若虫及幼嫩的雌虫最好保存在70%酒精中,制成的 玻片才便于研究 裸介壳虫永久玻片制作法:在制作时,必须将活的材料放在70%酒精中,固 定2小时以上。然后在双筒镜下用眼科小剪刀或昆虫针沿背面或腹面剖开。被剖 开的介壳虫可放入80%氢氧化钾溶液中12-18小时,以后可放入水浴中加热10 30分钟。已经透亮的介壳虫从碱液取出而浸入蒸馏水或热水中,用昆虫针和毛 笔清除内含物。清除干净的虫体浸于水中一昼夜,并换水8-10次,浸渍过的昆 虫投入70%酒精中10-15分钟,然后在品红溶液中染色。很硬化的虫体只需染」 色1-5分钟,体软者则需2-3小时甚至24小时。染色的目的是为了使腺体和虫 体比较硬化的部分比不太硬化的部分更显示在清晰的着色底面上。将虫体从染料 中移入浓度逐渐增大的酒精中,即在70%、90%、95%或100%酒精中各15-20 分钟。然后移入丁香油中静置30-60分钟,然后在二甲苯中15-20分钟。再将 虫体从二甲苯中移于载玻片上,不要使虫体产生绉褶,滴上加拿大树胶,盖上盖 玻片。 盾介壳虫制片法:从介壳下将雌虫取出,浸于盛有80%氢氧化钾溶液的磁坩 埚中12—18小时,从碱溶液中取出呈透明状态的虫体放入蒸馏水或热水中,末呈 透明的虫体,可放在8%氢氧化钾溶液中加热到80-90℃直到透明为止,但不能 煮沸。如雌虫体内有卵粒,则在加热时必须剖开虫体胸部,排出内容物,千万当 心不要弄破臀板。已经呈透明状态的虫体放入水中,往后的手续同上节所述 品红溶液的配法:1克品红溶于10毫升的95%酒精中,在此溶液中加入5毫 升的冰醋酸和石炭酸,然后逐渐加入100毫升的蒸馏水中。过24小时后将品红溶 液滤清
17 逐级脱水时,小玻璃皿必须加盖,以避免空气中水分侵入。 如制作玻片标本时,因特殊原因不能完成全过程时,材料必须移入 70% 酒精中保存,以免材料变脆。 制成的玻片放入 40℃左右的恒温箱内 2—3 天,即行干透而成永久性的玻 片标本。 (2)蚜虫玻片标本制作法 蚜虫种类繁多,体小,在鉴定“种”时需制成玻 片标本,蚜虫玻片标本的制作方法: 取若干活蚜虫,用 70%酒精杀死,然后取出每个蚜虫,用“0”号昆虫针从 胸部腹面后足基部穿孔 1—2 个,便于清除体内组织。 将穿刺后的蚜虫放入 10%氢氧化钾溶液内,如有翅蚜,则用水浴加热,以 免翅损坏(无翅蚜虫可直接加热),加热 15—20 分钟。时间长短以蚜虫大小和除 去组织的难易而定。在加热中必须注意蚜体变化情况,加热到蚜体透明为好,如 不能完全清除体内组织,在透明液内仍能完全透明。或者放在 10%氢氧化钾溶液 中浸泡一昼夜,不必加热。 煮过的标本,移入盛有蒸馏水的皿内,清洗 1—2 次后,移入 70%酒精内 略加脱水,再迅速依次移入 80%、95%、100%酒精中各脱水 1—2 分钟后,移入 冬青油(或二甲苯)透明。有翅蚜只要在 80%酒精中脱水一次即可移入冬青油透 明。 在载玻片上滴一滴中性树胶,将透明的标本用挑针移到载玻片上,在解剖 镜下调整姿势。然后轻轻盖上盖玻片,写好标签,再放到 40—50℃恒温箱内 2—3 天,即行干透而成永久性的玻片标本。 (3)介壳虫标本保存与制片 介壳虫的保存:绵蚧科、尾蚧科和粉蚧科的介 壳虫,以及蜡蚧科和红蚧科的若虫及幼嫩的雌虫最好保存在 70%酒精中,制成的 玻片才便于研究。 裸介壳虫永久玻片制作法:在制作时,必须将活的材料放在 70%酒精中,固 定 2 小时以上。然后在双筒镜下用眼科小剪刀或昆虫针沿背面或腹面剖开。被剖 开的介壳虫可放入 80%氢氧化钾溶液中 12—18 小时,以后可放入水浴中加热 10 —30 分钟。已经透亮的介壳虫从碱液取出而浸入蒸馏水或热水中,用昆虫针和毛 笔清除内含物。清除干净的虫体浸于水中一昼夜,并换水 8—10 次,浸渍过的昆 虫投入 70%酒精中 10—15 分钟,然后在品红溶液中染色。很硬化的虫体只需染 色 1—5 分钟,体软者则需 2—3 小时甚至 24 小时。染色的目的是为了使腺体和虫 体比较硬化的部分比不太硬化的部分更显示在清晰的着色底面上。将虫体从染料 中移入浓度逐渐增大的酒精中,即在 70%、90%、95%或 100%酒精中各 15—20 分钟。然后移入丁香油中静置 30—60 分钟,然后在二甲苯中 15—20 分钟。再将 虫体从二甲苯中移于载玻片上,不要使虫体产生绉褶,滴上加拿大树胶,盖上盖 玻片。 盾介壳虫制片法:从介壳下将雌虫取出,浸于盛有 80%氢氧化钾溶液的磁坩 埚中 12—18 小时,从碱溶液中取出呈透明状态的虫体放入蒸馏水或热水中,末呈 透明的虫体,可放在 8%氢氧化钾溶液中加热到 80—90℃直到透明为止,但不能 煮沸。如雌虫体内有卵粒,则在加热时必须剖开虫体胸部,排出内容物,千万当 心不要弄破臀板。已经呈透明状态的虫体放入水中,往后的手续同上节所述。 品红溶液的配法:1 克品红溶于 10 毫升的 95%酒精中,在此溶液中加入 5 毫 升的冰醋酸和石炭酸,然后逐渐加入 100 毫升的蒸馏水中。过 24 小时后将品红溶 液滤清
碱性品红可以溶解于95%酒精中达饱和状态。在这种情况下,虫体在染色以 前经过酒精脱水,从品红中直接移入95%酒精中或无水酒精中 (4)蓟马玻片制作法蓟马是微小昆虫,在鉴定时必须制成玻片,其方法步 骤可参照(1)加拿大树胶法 (5)赤眼蜂等小型寄生蜂的玻片制作法加拿大树胶法是最基本的方法,制 成的标本可长期保存,标本质量也较好,用下述方法较简单,体不宜长期保存。 将寄生蜂标本直接从保存液(70%酒精)中取出,放在玻片上的水合氯醛树 胶液中,摆好位置,加盖玻片即成。若是活蜂可用40—50℃的热水将其迅速杀死, 这时寄生蜂的翅和触角就自动张开,然后移至70%酒精中,经30-60分钟后取 出整姿封片。上述封片待水合氯醛树胶干固后,用指甲油或白漆环封,可延长保 存时间 3、外生殖器标本制做 外生殖器标本的提取方法 过去取出昆虫外生殖器的方法,一般是将腹部剖开,或将腹部末端切下,经氢氧化钠水 煮去污,然后将外生殖器取出。这种方法显然不能保持原来昆虫标本的完整,特别是对模式 标本更成为难以弥补的缺陷。如果要求既能完整地取出外生殖器,又要保持标本的外观,那 么就要掌握一定的提取外生殖器技术,和一些简单工具 昆虫的种类很多,外生殖器的构造也因类群和种类不同而大有区别。因此,不同类群昆 虫外生殖器的提取制备方法也应分别对待 (1).鳞翅目昆虫外生殖器标本的提取方法刚毒杀死或死后24小时内的新鲜成虫标 本,只要将标本腹面向上,安放在软木解剖台上,在双目解剖镜下,用右手直握细微钩针, 左手按住小软木台,使左手拇指托住针身,沿标本尾端腹面里侧中央部位,使针钩尖端向上 伸人。伸人的深浅,视虫体大小而定,一般约伸人到腹部长度的四分之一处,将针钩尖端翻 转向下。这样就刚好钩住雄性抱握器腹内基的骨化部位。然后很均匀地用力向外拉,不久即 可见到抱握器两端平均向外伸开,逐渐被拉露出来。这说明所拉位置和方向都很恰当,再继 续向外拉,直到完整地拉出来为止。如向外拉时看不到抱握器很平均的分开或上下移动,则 说明所拉位置不当,如果再向外拉外生殖器便会被损坏。这样应把针钩再向里伸,并调整其 方向和位置。钩针所达到的深度要适当,位置也需正确,这是能否得到完整标本的关键。用 此种方法制备雄性外生殖器的效果很好,很完整,连储精囊也能完整地拉出来。如果是雌性 示本,只要用心仔细,也能将囊导管、管带及交配囊完整地拉岀来,而且腹部的鳞或毛都完 好地保存着,不会因用拇指和食指夹看拿取外生殖器而使鳞片及毛大量脱落。如果是长久保 存的干燥标本,必须进行还软工作。还软时间的长短,视保存年限及不同种类而定。如在室 温25℃0左右,还软48小时后的夜蛾科粘虫、毒蛾科的榆毒蛾、灯蛾科的红袖灯蛾、枯叶蛾 科的松毛虫雄性标本作比较,四种蛾类用钩针轻压腹部都稍可下陷,但只灯蛾能勉强全部拉 出来。另外三种只能将骨化较强的抱器腹和抱器端拉出来,其他部位则丢失在腹腔内。如再 反复钩拉,便会将外生殖器拉散。还软72小时的上述四种标本,腹部用钩针轻压已还软如 初,进行钩取都能完整取出,但以灯蛾为易,夜蛾次之,毒蛾及枯叶蛾较差 不同还软时间制备效果不同,还软时间稍短,腹部节间膜不易被拉长,但有些种类钩取 就困难些。还软时间过长,虽然拉取外生殖器比较容易,但腹部节间膜易被拉开,而且再干 燥后不易复原 干燥标本的还软时间,与保存年限很有关系,保存年限短,制备就易,年限越长就越难, 同时也要视虫体的大小而定。一般都需要还软48小时以上,所需还软时间越长,还软器中 的温度应略低,使湿度小些,这样水气便渗入标本体 起(还软过程中要防止长需)。曾将还软后的上述四而 种蛾类,在钩取前先将腹部末端几节腹板剪开5毫米 长小口,然后再用钩针向外拉,结果无论哪种蛾类都 无补益。反而易将腹部拉破且不易按合在一起,即便 用胶粘上也有失原来形状 制好的昆虫外生殖器玻片 (2).膜翅目昆虫外生殖器标本提取方法主 要以叶蜂作材料。叶蜂科昆虫雌性外生殖器的基部骨化较强,在制备时要先用剪刀剪断才能
18 碱性品红可以溶解于 95%酒精中达饱和状态。在这种情况下,虫体在染色以 前经过酒精脱水,从品红中直接移入 95%酒精中或无水酒精中。 (4)蓟马玻片制作法 蓟马是微小昆虫,在鉴定时必须制成玻片,其方法步 骤可参照(1)加拿大树胶法。 (5)赤眼蜂等小型寄生蜂的玻片制作法 加拿大树胶法是最基本的方法,制 成的标本可长期保存,标本质量也较好,用下述方法较简单,体不宜长期保存。 将寄生蜂标本直接从保存液(70%酒精)中取出,放在玻片上的水合氯醛树 胶液中,摆好位置,加盖玻片即成。若是活蜂可用 40—50℃的热水将其迅速杀死, 这时寄生蜂的翅和触角就自动张开,然后移至 70%酒精中,经 30—60 分钟后取 出整姿封片。上述封片待水合氯醛树胶干固后,用指甲油或白漆环封,可延长保 存时间。 3、外生殖器标本制做 外生殖器标本的提取方法 过去取出昆虫外生殖器的方法,一般是将腹部剖开,或将腹部末端切下,经氢氧化钠水 煮去污,然后将外生殖器取出。这种方法显然不能保持原来昆虫标本的完整,特别是对模式 标本更成为难以弥补的缺陷。如果要求既能完整地取出外生殖器,又要保持标本的外观,那 么就要掌握一定的提取外生殖器技术,和一些简单工具。 昆虫的种类很多,外生殖器的构造也因类群和种类不同而大有区别。因此,不同类群昆 虫外生殖器的提取制备方法也应分别对待。 (1).鳞翅目昆虫外生殖器标本的提取方法 刚毒杀死或死后 24 小时内的新鲜成虫标 本,只要将标本腹面向上,安放在软木解剖台上,在双目解剖镜下,用右手直握细微钩针, 左手按住小软木台,使左手拇指托住针身,沿标本尾端腹面里侧中央部位,使针钩尖端向上 伸人。伸人的深浅,视虫体大小而定,一般约伸人到腹部长度的四分之一处,将针钩尖端翻 转向下。这样就刚好钩住雄性抱握器腹内基的骨化部位。然后很均匀地用力向外拉,不久即 可见到抱握器两端平均向外伸开,逐渐被拉露出来。这说明所拉位置和方向都很恰当,再继 续向外拉,直到完整地拉出来为止。如向外拉时看不到抱握器很平均的分开或上下移动,则 说明所拉位置不当,如果再向外拉外生殖器便会被损坏。这样应把针钩再向里伸,并调整其 方向和位置。钩针所达到的深度要适当,位置也需正确,这是能否得到完整标本的关键。用 此种方法制备雄性外生殖器的效果很好,很完整,连储精囊也能完整地拉出来。如果是雌性 标本,只要用心仔细,也能将囊导管、管带及交配囊完整地拉出来,而且腹部的鳞或毛都完 好地保存着,不会因用拇指和食指夹看拿取外生殖器而使鳞片及毛大量脱落。如果是长久保 存的干燥标本,必须进行还软工作。还软时间的长短,视保存年限及不同种类而定。如在室 温 25C0 左右,还软 48 小时后的夜蛾科粘虫、毒蛾科的榆毒蛾、灯蛾科的红袖灯蛾、枯叶蛾 科的松毛虫雄性标本作比较,四种蛾类用钩针轻压腹部都稍可下陷,但只灯蛾能勉强全部拉 出来。另外三种只能将骨化较强的抱器腹和抱器端拉出来,其他部位则丢失在腹腔内。如再 反复钩拉,便会将外生殖器拉散。还软 72 小时的上述四种标本,腹部用钩针轻压已还软如 初,进行钩取都能完整取出,但以灯蛾为易,夜蛾次之,毒蛾及枯叶蛾较差。 不同还软时间制备效果不同,还软时间稍短,腹部节间膜不易被拉长,但有些种类钩取 就困难些。还软时间过长,虽然拉取外生殖器比较容易,但腹部节间膜易被拉开,而且再干 燥后不易复原。 干燥标本的还软时间,与保存年限很有关系,保存年限短,制备就易,年限越长就越难, 同时也要视虫体的大小而定。一般都需要还软 48 小时以上,所需还软时间越长,还软器中 的温度应略低,使湿度小些,这样水气便渗入标本体 内较慢,避免虫体上的毛及鳞片因湿度大而贴连在一 起(还软过程中要防止长霉)。曾将还软后的上述四 种蛾类,在钩取前先将腹部末端几节腹板剪开 5 毫米 长小口,然后再用钩针向外拉,结果无论哪种蛾类都 无补益。反而易将腹部拉破且不易按合在一起,即便 用胶粘上也有失原来形状。 (2).膜翅目昆虫外生殖器标本提取方法 主 要以叶蜂作材料。叶蜂科昆虫雌性外生殖器的基部骨化较强,在制备时要先用剪刀剪断才能
取下来。使用的标本首先要还软适当(初毒杀死或死后24小时内的标本按新鲜标本使用)。 还软时间过长标本极易变形和褪色,特别是较小型标本,体壁过软不易动手工作。还软时间 过短又易将标本腹部折断或震碎。一般只需要还软24小时即可。 操作时把还软好的标本放在小软木台上,使腹面 向上。用两支细昆虫针交叉插在软木台上将腹部压 住,使标本身体略侧置,生殖器部位略向着右侧方。昆虫外生殖器 左手按住软木台,右手握剪刀并以左手拇指作依托,甘油瓶装保夺法 伸向腹端。剪刀要以里刃在下方,外刃在上方,这样 可防止将生殖器的基部及护板损伤。剪刀要从腹部腹 板第七节与背板第九节间伸入,但角度不能过直或过 前过后。过前剪不断,过后不易伸人或伸人到负瓣的 下面去。位置摆好后,先右一剪,后左一剪。如所剪 位置恰当,生殖器端部即向上翘起。再将手腕翻转使 剪刀横着平伸向负瓣片与载片之间剪第三剪。如左右D 两剪剪得不好,生殖器端便不会翘起来,可用拔针将 生殖器拔动,使负瓣移动而显示出来再剪第三剪。 叶蜂雌性产卵器是由四瓣组成,背面的一对即第 负瓣片,腹面的一对即第一负瓣片。第二负瓣片的 左右两片在其背部至少有部分相连而不易分开,第一微小昆虫 负瓣片的两片则容易分开。在第一、二负瓣片之间的外生殖器 连接不是粘着和钩住,而是由槽与凸相连锁,第二负封存法 瓣片居外,第一负瓣片居内。要把两负瓣片上下分开 0|0 极易损坏,如把两块负瓣片各自向相反的方向推动, 更会很容易地分开。第一、二负瓣片是生在两块载片 上,而第三负瓣片显著厚而宽,是用来保护和支持第 负瓣片在产卵时发挥更大的功能。产卵时两块负瓣 (He 片通过中间的滑缝自由伸缩,用第一负瓣片上的锯, 锯破植物组织而产卵。因此,要想完整地剪取叶蜂的 雌性外生殖器,全面了解其构造是很必要的 叶蜂科昆虫雄性外生殖器粗大而集中,取出来就比较容易。新鲜标本只要将腹面向上 放在软木工作台上,在双目解剖镜下将钩针平行地紧贴下生殖板伸入。根据身体大小,约 在2毫米深处将钩针尖端翻转向下,再徐徐向外拉,便可完整地取出来。已经干燥保存2-4 年的标本,只要还软24小时也能顺利取出来。 (3).鞘翅目昆虫外生殖器标本提取方法鞘翅目昆虫的雄性外生殖器,在一般种类 中骨化程度都比较强,而且形状长大于宽。所以杀死后24小时内的新鲜标本,只要将钩针 自腹端腹板的里侧靠边伸入。伸入的深度视虫体的大小而定,再将钩针半翻转使其横着冋中 央移动,然后徐徐向外拉,都可全部拉出。干燥后再经过还软的标本(还软时间最好在24 小时以上),因腹内脂肪牵连太多极易将腹节拉长或拉断。要先用剪刀在腹板内两侧各剪- 下,但下剪不宜过深,以免将生殖器损伤。剪后再拉,也能全部取出来。 天牛、金龟子及其他较大型步甲的雄性外生殖器,与腹内浸泡约20分钟,使其完全软 化。用左手拇指和食指握住腹部末端两侧(腹面向上),轻轻一捏,腹部第九节与第十节间 即裂开一条横缝。右手握镊子将第九腹板掀起,即看见两片角质化的阳基侧突尖端露出。只 要用镊子夹住,轻轻向外拉,便将全部生殖器拉出,浸在75%酒精中备用。 处理和保存 处理和保存昆虫外生殖器备作研究的方法很多,经常使用而比较好的有 1).制片保存昆虫的外生殖器,一般说来角质化都比较强。因此,提取出来的材料, 最好要经过脱水、透明手续后用加拿大树胶封在玻片中保存。因作好的生殖器玻片已与原来 的标本分开,为防止混乱和丢失,玻片上一定要贴好与原标本完全相同的标签,写明种类 采集地点、日期及标本上的原来编号,然后放在玻片标本盒中保存。制片方法如下: (1)加拿大树胶制片法 将解剖出的昆虫外生殖器放在10%的氢氧化钾(KOH)溶液中,水浴加热数分钟(时间 看虫体的骨化程度而定),把不必要的肌肉、脂肪清除掉,用水洗净,经品红染色,放入75% 的酒精中保存备用。制片时用各种浓度的酒精(85%,90%,95%),进行脱水处理。每更 换一次浓度必须经过相当长的时间(一般约15分钟)。骨化较强的材料,要在每个浓度中 延长时间。然后再放人100%的酒精(无水酒精)中,浸泡约半小时或更长些。每次更换浓
19 取下来。使用的标本首先要还软适当(初毒杀死或死后 24 小时内的标本按新鲜标本使用)。 还软时间过长标本极易变形和褪色,特别是较小型标本,体壁过软不易动手工作。还软时间 过短又易将标本腹部折断或震碎。一般只需要还软 24 小时即可。 操作时把还软好的标本放在小软木台上,使腹面 向上。用两支细昆虫针交叉插在软木台上将腹部压 住,使标本身体略侧置,生殖器部位略向着右侧方。 左手按住软木台,右手握剪刀并以左手拇指作依托, 伸向腹端。剪刀要以里刃在下方,外刃在上方,这样 可防止将生殖器的基部及护板损伤。剪刀要从腹部腹 板第七节与背板第九节间伸入,但角度不能过直或过 前过后。过前剪不断,过后不易伸人或伸人到负瓣的 下面去。位置摆好后,先右一剪,后左一剪。如所剪 位置恰当,生殖器端部即向上翘起。再将手腕翻转使 剪刀横着平伸向负瓣片与载片之间剪第三剪。如左右 两剪剪得不好,生殖器端便不会翘起来,可用拔针将 生殖器拔动,使负瓣移动而显示出来再剪第三剪。 叶蜂雌性产卵器是由四瓣组成,背面的一对即第 二负瓣片,腹面的一对即第一负瓣片。第二负瓣片的 左右两片在其背部至少有部分相连而不易分开,第一 负瓣片的两片则容易分开。在第一、二负瓣片之间的 连接不是粘着和钩住,而是由槽与凸相连锁,第二负 瓣片居外,第一负瓣片居内。要把两负瓣片上下分开 极易损坏,如把两块负瓣片各自向相反的方向推动, 便会很容易地分开。第一、二负瓣片是生在两块载片 上,而第三负瓣片显著厚而宽,是用来保护和支持第 一负瓣片在产卵时发挥更大的功能。产卵时两块负瓣 片通过中间的滑缝自由伸缩,用第一负瓣片上的锯, 锯破植物组织而产卵。因此,要想完整地剪取叶蜂的 雌性外生殖器,全面了解其构造是很必要的。 叶蜂科昆虫雄性外生殖器粗大而集中,取出来就比较容易。新鲜标本只要将腹面向上, 安放在软木工作台上,在双目解剖镜下将钩针平行地紧贴下生殖板伸入。根据身体大小,约 在 2 毫米深处将钩针尖端翻转向下,再徐徐向外拉,便可完整地取出来。已经干燥保存 2-4 年的标本,只要还软 24 小时也能顺利取出来。 (3).鞘翅目昆虫外生殖器标本提取方法 鞘翅目昆虫的雄性外生殖器,在一般种类 中骨化程度都比较强,而且形状长大于宽。所以杀死后 24 小时内的新鲜标本,只要将钩针 自腹端腹板的里侧靠边伸入。伸入的深度视虫体的大小而定,再将钩针半翻转使其横着向中 央移动,然后徐徐向外拉,都可全部拉出。干燥后再经过还软的标本(还软时间最好在 24 小时以上),因腹内脂肪牵连太多极易将腹节拉长或拉断。要先用剪刀在腹板内两侧各剪- 下,但下剪不宜过深,以免将生殖器损伤。剪后再拉,也能全部取出来。 天牛、金龟子及其他较大型步甲的雄性外生殖器,与腹内浸泡约 20 分钟,使其完全软 化。用左手拇指和食指握住腹部末端两侧(腹面向上),轻轻一捏,腹部第九节与第十节间 即裂开一条横缝。右手握镊子将第九腹板掀起,即看见两片角质化的阳基侧突尖端露出。只 要用镊子夹住,轻轻向外拉,便将全部生殖器拉出,浸在 75%酒精中备用。 处理和保存 处理和保存昆虫外生殖器备作研究的方法很多,经常使用而比较好的有: 1).制片保存 昆虫的外生殖器,一般说来角质化都比较强。因此,提取出来的材料, 最好要经过脱水、透明手续后用加拿大树胶封在玻片中保存。因作好的生殖器玻片已与原来 的标本分开,为防止混乱和丢失,玻片上一定要贴好与原标本完全相同的标签,写明种类、 采集地点、日期及标本上的原来编号,然后放在玻片标本盒中保存。制片方法如下: (1)加拿大树胶制片法 将解剖出的昆虫外生殖器放在 10%的氢氧化钾(KOH)溶液中,水浴加热数分钟(时间 看虫体的骨化程度而定),把不必要的肌肉、脂肪清除掉,用水洗净,经品红染色,放入 75% 的酒精中保存备用。制片时用各种浓度的酒精(85%,90%,95%),进行脱水处理。每更 换一次浓度必须经过相当长的时间(一般约 15 分钟)。骨化较强的材料,要在每个浓度中 延长时间。然后再放人 100%的酒精(无水酒精) 中,浸泡约半小时或更长些。每次更换浓
度时,要用滤纸或脱脂棉把原来酒精吸收干净。以上这一步骤称为脱水。进行封片的标本所 以要进行脱水这一过程,是因为树胶和水不能溶解在一起,如将带有水分的标本封在胶中, 便会混浊不清或使标本变质,不易保存。 经过脱水的标本再放人二甲苯中把酒精替出,并起到透明作用。标本移到二甲苯中时 若溶液发现混浊现象,表示水分尚未脱浄,应再退回到100%的酒精中去处理。在二甲苯溶 夜中的时间不宜过长,只要虫体完全透明,便可移到载玻片上。将虫体位置摆好,并把标本 边缘多余的二甲苯吸去。立即滴上加拿大树胶,随即盖上盖片。盖片时必须小心,用镊子或 手夹住盖片的一端,斜向着载玻片,使盖片的一端先碰到树胶,然后很快将手或镊子松开, 使盖片自然地贴在胶液上。这样可避免产生气泡。如果仍有气泡发生,可用针轻压盖片,或 在载片下稍加热。但最好等待几小时或在50度恒温箱中放置一段时间,较小气泡就会自然 消失 如果树胶量加得合适,盖玻片放好后,树胶刚好溢到盖片的四周。如盖片下面仍有树胶 未溢到之处,说明加胶不充足。应及时用拨针粘树胶滴在盖片下缺胶部位的边缘,胶便自然 渗入与盖片下的胶液愈合。加胶时千万不要将胶掉在盖片上。盖好盖片后,在载片的一端写 上临时标签,放在平稳清洁但要通风的地方,最好放在上面有玻璃盖的、下面有通风纱窗孔 的晾片盒中。也可将载片放在用硬纸板作的,每张载片之间有隔格的晾片盘中,平稳地放在 干净的书柜中,使其自然干燥。经过10-15日后,盖片周围外溢的胶液已开始干固,便可开 始修整,先用小别刀刮去载片上多余的树胶,或用小毛笔蘸少许二甲苯轻轻擦去树胶(但不 要触动盖片),并擦净载片上的灰尘,贴上正式标签,一张玻片才算作好了。在未加修整前 如果看到盖片下标本的四周有似白色雾状体时,那是因脱水不净造成的。此种玻片标本不能 使用,如是稀有标本应及时将整个玻片故在二甲苯中,溶去胶液取出标本,重新脱水、透明 制作。封片时所用胶液如果过稀时,干固时由于二甲苯的蒸发会使盖片下产生空隙,称为脱 胶。此时可先在盖片下的空隙中滴入少许二甲苯,使原来胶液的边缘溶解后,再用拨针滴人 胶液,使其自然流人即可。一旦技术熟练后,上述许多缺点便会自然克服 加拿大树胶,是在化学试剂商店买的成品。如是树胶干粉,可先在干净玻皿中磨细,加 入适量二甲苯溶解,装人细颈瓶中备用。 (2)甘油鱼胶制片法 先把鱼胶切成小块,在蒸馏水中浸泡2小时。连同放鱼胶的溶器放在沸水中隔水煮至鱼 胶块完全溶解后,加入甘油与石碳酸,同时用玻棒加速搅拌,趁热过滤,保存在有色瓶中 甘油鱼胶的配方是 清洁的鱼胶4克 蒸馏水70毫升 纯甘油80毫升 石碳酸2毫升 这种胶液冷却后便会凝固,用时先把胶瓶放在热水中溶解。制片时先把标本放在甘油及 水各半的混合液中一段时间。并将载片擦干净烤暖,把标本放在适当位置,然后整姿,加甘 油鱼胶在标本上,盖上盖玻片,贴好标签便可。 用这种胶液制片,可省略脱水手续,作为一般观察效果很好。但在高温潮湿地区使用 长期保存,盖片边缘的胶有生霉现象,可用毛笔蘸少许石碳酸清除 2)·贴封保存是用厚纸剪成长方形块,在一端的中央打好圆形孔,先用透明玻璃胶 纸贴好一面,将处理好的外生殖器标本沾粘在胶纸向内的一面上,再用另一张胶纸贴好,或 先用两块胶纸把材料贴封在中间,再用两块打好圆洞的方形纸将其粘合在中间,然后在纸块 上注明种类、采集日期等,插在原来标本的标签下方。贴封保存昆虫外生殖器适合于体型较 小的种类。这种方法的优点是外生殖器不离开原来的标本,可随时取下在镜下观察。缺点是 保存时间长久,胶纸失去原有的粘韧性而发脆龟裂,将材料损坏。 也可在打好圆孔的厚纸片上,先贴上一块盖玻片,上面滴上胶液,放上经过脱水透明后 的昆虫外生殖器,再用四分之一大小的盖片封盖好。这种方法则兼顾了制片与贴封两种方法 的优点 3).瓶装保存是将用甘油临时封装法观察硏究过的昆虫外生殖器材料,用甘油浸泡 装在小玻璃管内,同原来标本插在一支昆虫针上,日后随用随取。甘油浸泡又能增加标本的 透明度便于观察;缺点是日久甘油会透过瓶塞外溢而挥发掉,要注意检查补充。也可用由聚 乙烯制成的小瓶封存。因聚乙烯不受普通酸及溶剂的影响,且不易破碎。瓶塞可用白硅酮橡 胶制成。瓶塞稍有坡度以便贴合塞入瓶中。在一角度用针刺穿瓶塞以防甘油流出。这种装昆 虫外生殖器小瓶直径为55毫米,带塞长17毫米。鳞翅目翅脉标本制作法利用翅脉作为分类 依据,在鳞翅目中尤为常见。为了使翅脉清晰易见,必须将翅制成透明程度极强,又将翅脉 染上颜色的玻片才便于观察。使用漂白方法制成的玻片,手续简便,省去涂刷鳞片的过程
20 度时,要用滤纸或脱脂棉把原来酒精吸收干净。以上这一步骤称为脱水。进行封片的标本所 以要进行脱水这一过程,是因为树胶和水不能溶解在一起,如将带有水分的标本封在胶中, 便会混浊不清或使标本变质,不易保存。 经过脱水的标本再放人二甲苯中把酒精替出,并起到透明作用。标本移到二甲苯中时, 若溶液发现混浊现象,表示水分尚未脱净,应再退回到 100%的酒精中去处理。在二甲苯溶 液中的时间不宜过长,只要虫体完全透明,便可移到载玻片上。将虫体位置摆好,并把标本 边缘多余的二甲苯吸去。立即滴上加拿大树胶,随即盖上盖片。盖片时必须小心,用镊子或 手夹住盖片的一端,斜向着载玻片,使盖片的一端先碰到树胶,然后很快将手或镊子松开, 使盖片自然地贴在胶液上。这样可避免产生气泡。如果仍有气泡发生,可用针轻压盖片,或 在载片下稍加热。但最好等待几小时或在 50 度恒温箱中放置一段时间,较小气泡就会自然 消失。 如果树胶量加得合适,盖玻片放好后,树胶刚好溢到盖片的四周。如盖片下面仍有树胶 未溢到之处,说明加胶不充足。应及时用拨针粘树胶滴在盖片下缺胶部位的边缘,胶便自然 渗入与盖片下的胶液愈合。加胶时千万不要将胶掉在盖片上。盖好盖片后,在载片的一端写 上临时标签,放在平稳清洁但要通风的地方,最好放在上面有玻璃盖的、下面有通风纱窗孔 的晾片盒中。也可将载片放在用硬纸板作的,每张载片之间有隔格的晾片盘中,平稳地放在 干净的书柜中,使其自然干燥。经过 10-15 日后,盖片周围外溢的胶液已开始干固,便可开 始修整,先用小别刀刮去载片上多余的树胶,或用小毛笔蘸少许二甲苯轻轻擦去树胶(但不 要触动盖片),并擦净载片上的灰尘,贴上正式标签,一张玻片才算作好了。在未加修整前 如果看到盖片下标本的四周有似白色雾状体时,那是因脱水不净造成的。此种玻片标本不能 使用,如是稀有标本应及时将整个玻片故在二甲苯中,溶去胶液取出标本,重新脱水、透明 制作。封片时所用胶液如果过稀时,干固时由于二甲苯的蒸发会使盖片下产生空隙,称为脱 胶。此时可先在盖片下的空隙中滴入少许二甲苯,使原来胶液的边缘溶解后,再用拨针滴人 胶液,使其自然流人即可。一旦技术熟练后,上述许多缺点便会自然克服。 加拿大树胶,是在化学试剂商店买的成品。如是树胶干粉,可先在干净玻皿中磨细,加 入适量二甲苯溶解,装人细颈瓶中备用。 (2)甘油鱼胶制片法 先把鱼胶切成小块,在蒸馏水中浸泡 2 小时。连同放鱼胶的溶器放在沸水中隔水煮至鱼 胶块完全溶解后,加入甘油与石碳酸,同时用玻棒加速搅拌,趁热过滤,保存在有色瓶中。 甘油鱼胶的配方是: 清洁的鱼胶 4 克 蒸馏水 70 毫升 纯甘油 80 毫升 石碳酸 2 毫升 这种胶液冷却后便会凝固,用时先把胶瓶放在热水中溶解。制片时先把标本放在甘油及 水各半的混合液中一段时间。并将载片擦干净烤暖,把标本放在适当位置,然后整姿,加甘 油鱼胶在标本上,盖上盖玻片,贴好标签便可。 用这种胶液制片,可省略脱水手续,作为一般观察效果很好。但在高温潮湿地区使用, 长期保存,盖片边缘的胶有生霉现象,可用毛笔蘸少许石碳酸清除。 2).贴封保存 是用厚纸剪成长方形块,在一端的中央打好圆形孔,先用透明玻璃胶 纸贴好一面,将处理好的外生殖器标本沾粘在胶纸向内的一面上,再用另一张胶纸贴好,或 先用两块胶纸把材料贴封在中间,再用两块打好圆洞的方形纸将其粘合在中间,然后在纸块 上注明种类、采集日期等,插在原来标本的标签下方。贴封保存昆虫外生殖器适合于体型较 小的种类。这种方法的优点是外生殖器不离开原来的标本,可随时取下在镜下观察。缺点是 保存时间长久,胶纸失去原有的粘韧性而发脆龟裂,将材料损坏。 也可在打好圆孔的厚纸片上,先贴上一块盖玻片,上面滴上胶液,放上经过脱水透明后 的昆虫外生殖器,再用四分之一大小的盖片封盖好。这种方法则兼顾了制片与贴封两种方法 的优点。 3).瓶装保存 是将用甘油临时封装法观察研究过的昆虫外生殖器材料,用甘油浸泡 装在小玻璃管内,同原来标本插在一支昆虫针上,日后随用随取。甘油浸泡又能增加标本的 透明度便于观察;缺点是日久甘油会透过瓶塞外溢而挥发掉,要注意检查补充。也可用由聚 乙烯制成的小瓶封存。因聚乙烯不受普通酸及溶剂的影响,且不易破碎。瓶塞可用白硅酮橡 胶制成。瓶塞稍有坡度以便贴合塞入瓶中。在一角度用针刺穿瓶塞以防甘油流出。这种装昆 虫外生殖器小瓶直径为 5.5 毫米,带塞长 17 毫米。鳞翅目翅脉标本制作法利用翅脉作为分类 依据,在鳞翅目中尤为常见。为了使翅脉清晰易见,必须将翅制成透明程度极强,又将翅脉 染上颜色的玻片才便于观察。使用漂白方法制成的玻片,手续简便,省去涂刷鳞片的过程