免疫学及免疫学检验 3.离子强度溶液的离子强越高,电导率 越高,则带电质点泳动速度越慢并有较 高的热效应;反之,离子强度低,质点 泳动快,热效应较小
免疫学及免疫学检验 3. 离子强度 溶液的离子强越高，电导率 越高，则带电质点泳动速度越慢并有较 高的热效应；反之，离子强度低，质点 泳动快，热效应较小
免疫学及免疫学检验 4.电渗在电场中液体相对于固体的移动称为 电渗。在琼脂凝胶电泳中,由于琼脂是带负 电荷的极性基团(如SO2、COO-),使琼脂 成为负电的固相,静电感应作用使琼脂网格 附近的水带正电,因此,液体向负极流动, 形成电渗力。带电质点泳动时受电泳力和电 渗力的共同作用。如电泳力低于电渗力,则 向负极移动。如抗体,在碱性环境带负电, 应向正极移动,但由于其等电点较高,电荷 少,抵不过电渗力而泳向负极
免疫学及免疫学检验 4. 电渗 在电场中液体相对于固体的移动称为 电渗。在琼脂凝胶电泳中，由于琼脂是带负 电荷的极性基团(如SO4 2—、COO—)，使琼脂 成为负电的固相，静电感应作用使琼脂网格 附近的水带正电，因此，液体向负极流动， 形成电渗力。带电质点泳动时受电泳力和电 渗力的共同作用。如电泳力低于电渗力，则 向负极移动。如抗体，在碱性环境带负电， 应向正极移动，但由于其等电点较高，电荷 少，抵不过电渗力而泳向负极
免疫学及免疫学检验 第二节对流免疫电泳 对流免疫电泳( counter immunoelectrophoresis, CIEP)又称免疫电渗电泳( immuno osmophoresis,EOP)。是在直流电场中进行的 免疫双扩散技术
免疫学及免疫学检验 第二节 对流免疫电泳 对 流免疫 电泳 (counter immunoelectrophoresis, CIEP) 又 称 免 疫 电 渗 电 泳 (immunoosmophoresis, IEOP)。是在直流电场中进行的 免疫双扩散技术
免疫学及免疫学检验 )原理 在pH8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白因等电点 高,只带有微弱的负电荷,而且分子又较大, 因此电泳力小,小于电渗力,泳向负极;而 般抗原蛋白质常带较强的负电荷,分子较小, 电泳力大,大于电渗力,泳向正极,电泳时抗 原放负极侧,抗体放正极侧,抗原抗体相对泳 动,一定时间后抗原和抗体将在两孔之间相遇 在比例适当处形成肉眼可见的沉淀线
免疫学及免疫学检验 (一) 原理 在pH8.6的琼脂凝胶中，抗体球蛋白因等电点 高，只带有微弱的负电荷，而且分子又较大， 因此电泳力小，小于电渗力，泳向负极；而一 般抗原蛋白质常带较强的负电荷，分子较小， 电泳力大，大于电渗力，泳向正极，电泳时抗 原放负极侧，抗体放正极侧，抗原抗体相对泳 动，一定时间后抗原和抗体将在两孔之间相遇， 在比例适当处形成肉眼可见的沉淀线
免疫学及免疫学检验 二)操作步骤 1.制备1.2%巴比妥琼脂凝胶板。 2在琼脂板上成对打孔,孔径3mm,孔距6mm。 3.于阴极侧孔内加入待检血清或阳性对照血清 阳极侧孔内加抗血清 4.电泳电泳条件34mAcm宽,电泳30min 5.观察结果或在室温放置数小时后观察沉淀线, 见图
免疫学及免疫学检验 (二) 操作步骤 1. 制备1.2%巴比妥琼脂凝胶板。 2.在琼脂板上成对打孔，孔径3mm，孔距6mm。 3.于阴极侧孔内加入待检血清或阳性对照血清， 阳极侧孔内加抗血清。 4. 电泳 电泳条件3~4mAcm宽，电泳30min。 5. 观察结果或在室温放置数小时后观察沉淀线， 见图