(2)影响电泳中DNA迁移速率的因子1.DNA分子大小:迁移速率U与DNA分子碱基对数目N的对数值logN成反比2.电场强度:泳动速率与电场强度成正比。3. 琼脂糖浓度:logU=logU.K,tU为迁移率,U.为DNA的自由电泳迁移率,t为胶浓度,Kr为介质阻滞系数。质粒DNA构象:一般:CC>L >OC染料:EtBr会降低迁移率5.26.缓冲液:TAE、TBE、TPB7. 琼脂糖种类快口开环DNA线状DNA共价闭合超螺旋DNA
(2) 影响电泳中DNA迁移速率的因子 1. DNA分子大小:迁移速率 U与DNA分子碱基对数目N 的对数值 logN 成反比。 2. 电场强度:泳动速率与电场强度成正比。 3. 琼脂糖浓度: logU= logU0Kr t U为迁移率,U0 为DNA的自由电泳迁移率,t为胶浓度,Kr为介质阻滞系 数。 4. 质粒DNA构象: 一般: CC>L >OC 5. 染料:EtBr 会降低迁移率 6. 缓冲液:TAE、TBE、TPE 7. 琼脂糖种类
(3)常用DNA分子量标准1kbplusDNALadder 100bpDNA Ladder片段大小(bp)和电泳带型示瘾图2DNA/Hindllbpng1μgbp10000=8000100023130*477500090094161941356557800-2000904361*700-1600600232248-1000500(该片段亮度加重)42-2027700500400Oe-400-300300200-100%0200-564116叫加样,凝胶长度10cm,5μ加样,100电压8v/cm凝胶长度10cm,0.5xTBEBuffer电压8v/cm,0.5xTBEBuffer2.0%琼脂糖凝胶
(3) 常用DNA分子量标准