实验十五碱变性法小量制备质粒DNA和DNA酶切
实验十五 碱变性法小量制备质粒 DNA和DNA酶切
基因克隆的技术路线ForeignDNA载体目的基因regionof interestgene forPlasmidEcoRIantibioticEcORIresistanceEcoRI体外连接EcoRIEcoRI（杂合DNA）重组子Stickyends转化Hybridization+DNAligaseRecombinant受体细胞DNADNAinsertionBacteria筛选阳性克隆Bacteria platted on mediumBacterialcellchromosome+antabioticCloningOnlybacteria containing大量扩增，获得子代DNArecombinantDNAgrowCulture!CloneDNA凡purification品自的基因在原核细胞中表达Cloninginto a plasmid
目的基因 载体 体外连接 重组子（杂合DNA） 转化 受体细胞 筛选阳性克隆 大量扩增，获得子代DNA 基因克隆的技术路线 目的基因在原核细胞中表达
1、质粒DNA的提取
1、质粒DNA的提取
一．实验目的及背景质粒是染色体外的DNA分子，大小可为1kb到200kb。大多数来自细菌的质粒是双链、共价闭合环状的分子，以超螺旋形式存在。它是细菌内的共生型遗传因子。其复制和遗传独立于细菌染色体，但复制和转录依赖于宿主编码的蛋白和酶
一．实验目的及背景 质粒是染色体外的DNA分子，大小可为 1kb到200kb。 大多数来自细菌的质粒是双链、共价闭合 环状的分子，以超螺旋形式存在。它是细 菌内的共生型遗传因子。 其复制和遗传独立于细菌染色体，但复制 和转录依赖于宿主编码的蛋白和酶
质粒特点质粒能在细菌中垂直遗传并月赋予宿主细胞一些表型，是比病毒更简单的原始生命质粒通过细菌的结合作用，从雄性体转移到雌性体，是细菌有性繁殖的性因子1952年由Lederburg正式命名为质粒
质粒特点 质粒能在细菌中垂直遗传并且赋予宿主细胞 一些表型，是比病毒更简单的原始生命。 质粒通过细菌的结合作用，从雄性体转移到 雌性体， 是细菌有性繁殖的性因子. １９５２年由Lederburg正式命名为质粒