讨论： （1）当 CS<<Km 时， S m C K r r max = ，属一级反应。 （2）当 CS>>Km 时， max r = r ，属零级反应。 （3）当 CS＝Km 时， 2 max r r = 。Km 在数量上等于反应速度达到最大反应速度一 半时的底物浓度。 Km 和 rmax 的测定方法 Linewear Burk 法，即双倒数法。 对米氏方程两侧取倒数，得 S m r C K r r 1 1 1 max max = + 。以 CS r 1 ~ 1 作图，得一直线， 直线斜率为 max r K m ，截距为 max 1 r 。根据直线斜率和截距可计算出 Km 和 rmax。 图 2－2 双倒数法求解 Km 和 rmax 2.2.3 温度对酶促反应速率的影响 温度对酶促反应速率的影响，是通过影响 k2 和 KS（ Km ）实现的。 exp( ) 2 RT Ea k = A − Arrhenius 方程 （2－34） exp( ) RT H KS − Van’t-Hoff 方程 （2－35） 值得注意的是 Arrhenius 方程仅在较低温度下适用于酶促反应。过高的温度 将导致酶的失活（见教材 P23 图 2-4）。（2－35）式中 H 为反应热。 －1／Km 1／rmax 1／r 斜率－Km/rmax 1／CS
讨论： （1）当 CS<<Km 时， S m C K r r max = ，属一级反应。 （2）当 CS>>Km 时， max r = r ，属零级反应。 （3）当 CS＝Km 时， 2 max r r = 。Km 在数量上等于反应速度达到最大反应速度一 半时的底物浓度。 Km 和 rmax 的测定方法 Linewear Burk 法，即双倒数法。 对米氏方程两侧取倒数，得 S m r C K r r 1 1 1 max max = + 。以 CS r 1 ~ 1 作图，得一直线， 直线斜率为 max r K m ，截距为 max 1 r 。根据直线斜率和截距可计算出 Km 和 rmax。 图 2－2 双倒数法求解 Km 和 rmax 2.2.3 温度对酶促反应速率的影响 温度对酶促反应速率的影响，是通过影响 k2 和 KS（ Km ）实现的。 exp( ) 2 RT Ea k = A − Arrhenius 方程 （2－34） exp( ) RT H KS − Van’t-Hoff 方程 （2－35） 值得注意的是 Arrhenius 方程仅在较低温度下适用于酶促反应。过高的温度 将导致酶的失活（见教材 P23 图 2-4）。（2－35）式中 H 为反应热。 －1／Km 1／rmax 1／r 斜率－Km/rmax 1／CS
2.2.4 抑制剂对酶促反应速率的影响 首先应搞清失活作用与抑制作用的异同。 失活作用：指物理或化学因素部分或全部破坏了酶的三维结构，引起酶的 变性，导致酶部分或全部丧失活性。 抑制作用：指酶在不变性条件下，由于活性中心化学性质的改变而引起酶 活性的降低或丧失。 凡能使酶的活性下降而不引起酶蛋白变性的物质称做酶的抑制剂(inhibitor)。 使酶变性失活(称为酶的钝化)的因素如强酸、强碱等，不属于抑制剂。通常抑制 作用分为可逆性抑制和不可逆性抑制两类。 2.2.4.1 竞争性抑制 图 2－3 竞争性抑制作用示意图 反应机理： E S ES E P k k k + → + − 1 2 1 （2－36） E I EI KI + （2－37） 采用快速平衡法推导动力学方程： CES r k = 2 （2－38） S ES E S K k k C C C = = − 1 1 （2－39） I EI E I K C C C = （2－40） CE0 = CE +CES +CEI （2－41） 解之，得 S I I S S K C K C r C r + + = (1 / ) max （2－42） E S I
2.2.4 抑制剂对酶促反应速率的影响 首先应搞清失活作用与抑制作用的异同。 失活作用：指物理或化学因素部分或全部破坏了酶的三维结构，引起酶的 变性，导致酶部分或全部丧失活性。 抑制作用：指酶在不变性条件下，由于活性中心化学性质的改变而引起酶 活性的降低或丧失。 凡能使酶的活性下降而不引起酶蛋白变性的物质称做酶的抑制剂(inhibitor)。 使酶变性失活(称为酶的钝化)的因素如强酸、强碱等，不属于抑制剂。通常抑制 作用分为可逆性抑制和不可逆性抑制两类。 2.2.4.1 竞争性抑制 图 2－3 竞争性抑制作用示意图 反应机理： E S ES E P k k k + → + − 1 2 1 （2－36） E I EI KI + （2－37） 采用快速平衡法推导动力学方程： CES r k = 2 （2－38） S ES E S K k k C C C = = − 1 1 （2－39） I EI E I K C C C = （2－40） CE0 = CE +CES +CEI （2－41） 解之，得 S I I S S K C K C r C r + + = (1 / ) max （2－42） E S I
式中， max 2CE0 r = k ， 1 1 k k KS − = 采用稳态法推导动力学方程： CES r k = 2 （2－ 43） = 1 E S − −1 ES − 2 ES = 0 ES k C C k C k C dt dC （2－ 44） = i E I − −i EI = 0 EI k C C k C dt dC （2－ 45） CE0 = CE +CES +CEI （2－ 46） 解之，得 m I I S S K C K C r C r + + = (1 / ) max （2－ 47） 式中: max 2CE0 r = k ， 1 1 2 k k k Km + = − 令 (1 / ) Km = Km +CI KI ，（2－47）式可变形为 m S S K C r C r + = max （2－ 48） 式中 Km Km 将（2－48）式与米氏方程比较，可知最大反应速率测有变化，而 Km 增大。 以 CS r 1 ~ 1 作图，得一直线，直线斜率为 max r K m ，截距为 max 1 r ，如图 2－3 所示。 1／r 1／CS 1／rmax -1／Km -1／Km’ CI = 0 CI
式中， max 2CE0 r = k ， 1 1 k k KS − = 采用稳态法推导动力学方程： CES r k = 2 （2－ 43） = 1 E S − −1 ES − 2 ES = 0 ES k C C k C k C dt dC （2－ 44） = i E I − −i EI = 0 EI k C C k C dt dC （2－ 45） CE0 = CE +CES +CEI （2－ 46） 解之，得 m I I S S K C K C r C r + + = (1 / ) max （2－ 47） 式中: max 2CE0 r = k ， 1 1 2 k k k Km + = − 令 (1 / ) Km = Km +CI KI ，（2－47）式可变形为 m S S K C r C r + = max （2－ 48） 式中 Km Km 将（2－48）式与米氏方程比较，可知最大反应速率测有变化，而 Km 增大。 以 CS r 1 ~ 1 作图，得一直线，直线斜率为 max r K m ，截距为 max 1 r ，如图 2－3 所示。 1／r 1／CS 1／rmax -1／Km -1／Km’ CI = 0 CI
图 2－4 竞争性抑制作用下 CS r 1 ~ 1 曲线 2.2.4.2 非竞争性抑制 图 2－5 非竞争性抑制作用示意图 反应机理： E S ES E P k k k + → + − 1 2 1 （2 －49） E I EI KI + （2 －50） ES I ESI KI + （2 －51） 采用快速平衡法推导动力学方程： CES r k = 2 （2 －52） S ES E S K k k C C C = = − 1 1 （2 －53） I EI E I K C C C = （2 －54） I ESI ES I K C C C = （2 E S I
图 2－4 竞争性抑制作用下 CS r 1 ~ 1 曲线 2.2.4.2 非竞争性抑制 图 2－5 非竞争性抑制作用示意图 反应机理： E S ES E P k k k + → + − 1 2 1 （2 －49） E I EI KI + （2 －50） ES I ESI KI + （2 －51） 采用快速平衡法推导动力学方程： CES r k = 2 （2 －52） S ES E S K k k C C C = = − 1 1 （2 －53） I EI E I K C C C = （2 －54） I ESI ES I K C C C = （2 E S I
－55） CE0 = CE +CES +CEI （2 －56） 解之，得 (1 / )( ) max I I S S S C K K C r C r + + = （2 －57） 式中， max 2CE0 r = k ， 1 1 k k KS − = 采用稳态法推导动力学方程： CES r k = 2 （2 －58） = 1 E S − −1 ES − 2 ES + −i ESI − i ES I = 0 ES k C C k C k C k C k C C dt dC （2 －59） = i E I − −i EI = 0 EI k C C k C dt dC （2 －60） = i ES I − −i ESI = 0 ESI k C C k C dt dC （2 －61） CE0 = CE +CES +CEI +CESI （2 －62） 解之，得 (1 / )( ) max I I m S S C K K C r C r + + = （2 －63） 式中， max 2CE0 r = k ， 1 1 2 k k k Km + = − 令 CI KI r r 1 / ' max max + = ，（2－63）式可变形为
－55） CE0 = CE +CES +CEI （2 －56） 解之，得 (1 / )( ) max I I S S S C K K C r C r + + = （2 －57） 式中， max 2CE0 r = k ， 1 1 k k KS − = 采用稳态法推导动力学方程： CES r k = 2 （2 －58） = 1 E S − −1 ES − 2 ES + −i ESI − i ES I = 0 ES k C C k C k C k C k C C dt dC （2 －59） = i E I − −i EI = 0 EI k C C k C dt dC （2 －60） = i ES I − −i ESI = 0 ESI k C C k C dt dC （2 －61） CE0 = CE +CES +CEI +CESI （2 －62） 解之，得 (1 / )( ) max I I m S S C K K C r C r + + = （2 －63） 式中， max 2CE0 r = k ， 1 1 2 k k k Km + = − 令 CI KI r r 1 / ' max max + = ，（2－63）式可变形为